水貂肉毒梭菌中毒诊治

任 桥，邹 明，张启迪

（青岛农业大学动物科技学院，山东 青岛266109）

2012年2月25日，青岛红岛一水貂养殖场水貂出现发病症状。该场共饲养了水貂960只，其中母貂800只，公貂160只。饲喂自家配制的混合饲料，将生鱼、鸡头、鸡蛋、猪肝与膨化玉米面拌匀、和稀后进行饲喂。23日上午开始发病，且有2只公貂死亡，下午又有10多只出现发病症状的病貂；24日早上有40～50只死亡貂，均为公貂。临床症状表现为患病水貂精神沉郁，食欲下降或不食，拉黑色粪便，个体大的先死，死后倒提喘后吐血水，口流发白或红色的黏液。大部分水貂后肢瘫痪。发病急，死亡率高。通过临床症状、病理剖检及实验室检验，初步诊断为水貂肉毒梭菌中毒。

1 材料与方法

1.1 材料 病料来自青岛红岛某养殖场的6只发病水貂；培养基及试剂：普通琼脂、普通肉汤，均购自中国进出口商品检验技术研究所；药敏纸片，购自杭州天和微生物试剂有限公司；小鼠购自青岛市药品检验所。

1.2方法

1.2.1 剖检 肺脏局部淤血；脾脏肿大，边缘有黑色坏死点；肝脏有不同程度的弥漫性出血，边缘变薄；肾脏颜色变暗，表面有大小不等的灰白色坏死灶；肠系膜淋巴结肿大、出血。

1.2.2 涂片镜检 取新鲜病死貂的心血、肺脏、肝脏、脾脏直接进行涂片，分别进行吉姆萨染色和革兰染色，显微镜下观察。

1.2.3 细菌分离 挑取肺脏、肝脏、脾脏、胃肠内容物分别接种于普通琼脂平板、血琼脂平板和肉汤培养基，并分别进行有氧培养和厌氧培养，37℃培养24 h，观察有无菌落生长及菌落形态。

1.2.4 毒物接种试验 将死貂的胃肠内容物和剩余饲料，等量加入灭菌生理盐水，在无菌状态下研碎，室温浸放1 h～2 h，滤过使之透明。将滤液分为2份，1份不做任何处理对5只小鼠进行腹腔注射，每只0.5mL；另1份经高温处理30min后，再对5只小鼠进行腹腔注射，每只0.5mL，同一环境下饲养观察。

1.2.5 药敏试验 将纯化的菌落接种于普通肉汤，37℃厌氧培养12 h。用灭菌的棉棒蘸取肉汤培养物在普通琼脂平板上涂抹，之后将药敏纸片贴在培养基的表面，37℃厌氧培养24 h。

2 结果

2.1 涂片镜检 显微镜下观察，可见有一种梭形产芽孢的革兰阳性杆菌，同时发现肝脏细胞破坏严重。

2.2 细菌培养 有氧培养无细菌生长，厌氧培养菌落生长良好。其特性是：普通琼脂培养基，接种24 h～48 h后，长出边缘不整齐、颗粒状、圆形扁平、中央突起光滑的白色菌落，培养5 d以上时变为黄棕色菌落。血琼脂平板，可见圆形或圆形不规则，半透明的露滴样菌落，有溶血环。肉汤培养基，呈浑浊生长，具有均匀的白色沉淀或絮状沉淀。细菌形态：取培养物涂片染色镜检，为两端钝圆的大杆菌，单独或成双排列，有芽孢，芽孢呈椭圆形，偏于一端较菌体膨大。

2.3 毒素接种试验 结果表明注射未经任何处理滤液的小鼠在12 h内先后死亡；而注射经过高温处理滤液的小鼠没有任何变化，最终确定为肉毒梭菌中毒。

2.4 药敏试验 药敏试验结果见表1。试验结果表明，新霉素、头孢曲松、头孢噻呋高敏；氨苄青霉素中敏；其他药物均无明显抑菌环。

表1 药敏试验 （直径：mm）

3 防治措施

3.1 立即停用可疑饲料，更换无污染的新鲜饲料。对病貂和有症状的病貂进行隔离，及时消毒貂舍，清理貂粪，加强饲养管理，提高貂的抗病力。

3.2 将所饲喂的鱼、鸡头等动物性饲料解冻后，用0.3%高锰酸钾液进行清洗、浸泡5min～10min，然后用清水冲洗干净，处理完再进行煮熟、饲喂。每天对绞肉机及饲槽等进行清洗。

3.3 根据药敏试验结果，在饲料中按临床常规用量添加新霉素或头孢曲松，每天2次，连用5 d～7 d。配合用葡萄糖、维生素C、维生素B进行辅助治疗，增强病貂抵抗力。

4 讨论

水貂肉毒梭菌中毒是由于食入含有肉毒梭菌毒素的肉类饲料引起的一种急性致死性中毒，以呈现运动中枢神经麻痹和延脑麻痹症状为特征［1］。肉毒梭菌的芽孢分布广泛，动物肠道内容物、粪便、腐败尸体、腐烂饲料中经常含有肉毒梭菌。该菌在动物尸体、肉类、饲料内繁殖产生毒素［2］。水貂肉毒梭菌中毒的传染源主要是被该菌污染的饲料。当肉、鱼饲料被肉毒梭菌污染后，在繁殖过程中产生大量的外毒素，水貂吃了这种饲料，就会发生中毒；含有毒素的饲料外观无异常变化，不易被发现；这种含毒素饲料即使放在低温冷库也不会被破坏，拿出喂貂还会引起中毒［3］。因此该病一年四季均可发生。同时不分年龄、性别均易中毒。

该养殖场暴发本病的起因怀疑是食用了被肉毒梭菌污染的饲料。通过询问畜主得知，本场所用的饲料为自家配制的，且是采用生喂的方式饲喂水貂，22日曾采购一批猪肝，增加饲喂猪肝后出现发病，同时绞肉机用后不进行清洗，这种饲喂模式存在着隐患。本病发病较快，常来不及治疗，应以预防为主。平时注意饲料及饮水卫生，防止饲料和饮水被肉毒梭菌毒素污染。鱼、肉类饲料应保持新鲜，做到速冻、速融、速加工，防止污染或长期堆放而腐败，严格禁止生喂，对于新引进饲料原料，应小区域预添加确保饲喂安全后再进行全群添加。加工饲料的用具应经常消毒。治疗此类疾病时最好尽早做出正确诊断，保证食物及饲喂器具的洁净，并通过药敏试验，选择敏感药物，才能收到显著的防治效果，避免浪费药物和延误防治时机，减少损失。

［1］ 孙卫东，刘家国.经济动物疾病诊疗与处方手册［D］.北京：化学工业出版社，2007：41-42.

［2］ 林修光，寇运口.肉毒梭菌与食物中毒［J］.食品科学，2003，24(8)：194-196．

［3］ 葛春艳，马景芳，王红梅，等.水貂肉毒梭菌中毒症［J］.山东畜牧兽医.2003(2)：47-48.