鼠曲草TLC鉴别及质量检查项目研究

张立庆，曲畅游，李渤文，肖海燕，路立峰

（山东药品食品职业学院，山东威海264210）

鼠曲草TLC鉴别及质量检查项目研究

张立庆，曲畅游，李渤文，肖海燕，路立峰

（山东药品食品职业学院，山东威海264210）

目的建立简单快捷的鼠曲草药材质量控制方法和标准。方法通过对3个不同产地的鼠曲草药材进行TLC鉴别、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、水分以及灰分测定的研究，建立其质量控制标准。结果确定了鼠曲草TLC鉴别、水分、灰分和水溶性浸出物、醇溶性浸出物的测定方法，制定了其质量控制标准。结论研究结果表明本研究制定的鼠曲草药材质量控制标准，可为山东省以及其他地区使用和检验提供依据。

鼠曲草；薄层色谱鉴别；水分检查；灰分检查；水溶性浸出物；醇溶性浸出物

鼠曲草最早收录于《名医别录》中，又名佛耳草，为菊科鼠曲草属植物鼠曲草（Gnaphalium affine D.Don）的干燥全草。主要分布在亚洲地区，以我国和朝鲜、菲律宾等地多见。在历朝古籍书如《本草纲目》、《本草拾遗》、《品汇精要》中均有相关记载，民间尤其是江浙一带多以清明节前后采摘其幼苗，制成饭团等多种食品。具有化痰止咳、祛风平喘、除湿止痹之功效。现代研究多着重于其化学成分与药理作用，并认为鼠曲草具有抗菌抗炎［1］、止咳祛痰［2，3］、保肝［4］、抗氧化作用［5］。目前文献关于其质量标准的研究几乎未见报道［6～9］，本文拟通过对鼠曲草药材开展TLC鉴别；水溶性浸出物、醇溶性浸出物及水分、灰分等检测而确定多个检查项目，进行实验研究，建立其药材简单而快捷的质量控制标准，为山东省以及其他省、自治区、直辖市等地区该药材提供使用和检验依据。

1 仪器与试药

电子分析天平（EQP206－4RB型，贵阳涂兴电子有限公司）；真空干燥箱（DRP－ZK－3型，苏州德瑞普烘箱制造有限公司）；恒温水浴锅（WHKGT2型，湖北云锦电子有限公司）；马福炉（RBS6L型，山西华天科技有限公司）；槲皮素对照品（批号为081－9003，中国药品生物制品检定所），试验所用其他试剂均为分析纯，水为纯化水。

鼠曲草主要购于安徽省亳州市中药材市场，由山东中医药大学周凤琴教授鉴定为菊科鼠曲草（Gnaphalium affine D.Don）的干燥地上部分。

2 方法

2.1 薄层鉴别 在3个250 mL烧瓶中分别加入不同产地适当粉碎的鼠曲草粗粉各10 g后再分别注入100 mL 70%乙醇，分别在水浴持续回流处理4 h后趁热滤过，滤液分别分次转移至表面皿中，水浴蒸干。残留物中分别添加少量水充分搅拌溶解后滤过，再分别加入20mL乙酸乙酯置滤液中，轻摇后静置，等其分层，各样品分离水层和乙酸乙酯层。再各加入20 mL乙酸乙酯液置水层，各反复萃取4次后，分别将乙酸乙酯液合并。分别将20 g干燥无水硫酸钠加入各合并液中，分别滤过，将各滤液分别移至表面皿中，水浴蒸干后室温放冷。各加入2 mL乙酸乙酯，搅拌，待残留物溶解后，转移至3个2 mL容量瓶中，定容至刻度，得3个供试品试液。另取2 mL容量瓶加入槲皮素对照品2 mg，用乙酸乙酯溶解并定容至刻度，得对照品溶液。用毛细管取以上溶液各5μL，于Merck硅胶G薄层板上分别点样，以甲酸－甲苯－乙酸乙酯（0.5∶4∶5）为展开剂展开，取出后晾干，再喷以浓度为2%的AlCl3甲醇溶液于薄层板上，薄层板晾干后置于紫外灯（365 nm）下观察，供试品与对照品色谱相同位置处显示相同颜色斑点，见图1。

图1 鼠曲草荧光薄层色谱鉴别图1、2、6、7、11、12.槲皮素对照品；3、8.江苏样品；4、9.湖北样品；5、10.浙江样品

检测结果表明3种不同产地鼠曲草药材TLC鉴别结果基本一致。

2.2 水分测定 取3种产地不同的鼠曲草各适量，按照《中国药典》2010年版（一部）附录ⅨH水分测定法第一法进行检测，结果如表1所示。

表1 水分测定数据

样品检测结果显示药材含水量在7.72%～8.12%之间。

2.3 灰分测定

2.3.1 总灰分测定 各取3种产地不同的鼠曲草适量，按照《中国药典》2010年版（一部）附录ⅨK灰分测定法第一法进行检测，设定温度分别为500、550、600℃，结果如表2所示。

表2 总灰分测定

2.3.2 酸不溶性灰分测定 各取3种产地不同的鼠曲草适量，根据《中国药典》2010年版（一部）附录ⅨK灰分测定法第二法进行检测，结果如表3所示。

表3 酸不溶性灰分测定

结果显示在500～600℃范围内，两项指标几乎不发生变化。总灰分：最高为18.72%，最低为14.19%；酸不溶性灰分：最高为11.33%，最低为7.68%。

2.4 浸出物测定

2.4.1 水溶性浸出物测定 按《中国药典》2010版（一部）附录ⅩA浸出物测定法第一法测定。

测定方法的选择通过对同一批次鼠曲草采用水作溶剂，冷浸法与热浸法浸出物含量的考察研究，从而确定适合的水溶性浸出物质量控制方法，结果见表4。

表4 水溶性浸出法选择

由表4可知，选用热浸法。

样品测定：采用热浸法对3种不同产地的鼠曲草药材进行检测，检测结果如表5所示。

2.4.2 醇溶性浸出物测定 按《中国药典》2010版（一部）附录ⅩA浸出物测定法第二法测定。

表5 热浸法测定结果

醇溶性测定方法的选择采用相同浓度的乙醇作溶剂，对鼠曲草分别用冷浸法与热浸法测定浸出物含量，从而确定适合的醇溶性浸出物质量控制方法，结果见表6。

表6 醇溶性浸出物测定方法选择

由表6可知，选用乙醇热浸法。

乙醇浓度的选择以浸出物含量为指标以同一批药材为样品进行检测，考察不同浓度下的乙醇热浸渍法，考查最佳乙醇浸出浓度，结果见表7。

表7 乙醇浓度的确定

由表7可知，采用70%乙醇溶液。

样品测定取3个不同产地鼠曲草药材，测定醇溶性浸出物含量，结果见表8。

表8 醇溶性浸出物测定结果

3 结论

本研究旨在对鼠曲草建立一种快捷、简便的质量控制方法，虽然亦可以采用HPLC法对其某一种成分进行测定，但考虑到产地差异、含量差异比较大，且目前无法确定哪一种成分为鼠曲草的主要有效成分，以某一种成分为其含量测定成分有一定的片面性和局限性，也会造成部分地区鼠曲草质量不合格。采用TLC法，只对槲皮素进行定性鉴别，避免了上述缺点。

在TLC鉴别中，本次试验采用的提取方法设计合理，提取较完全，杂质去除较干净，效果较好。以甲酸－甲苯－乙酸乙酯（0.5∶4∶5）为展开剂展开后，各成分分离度较好，在紫外灯（365 nm）下检测，斑点清晰，对检测结果基本无干扰。

本文首次使用《中国药典》方法对鼠曲草药材进行质量控制，相关文献未见报道。根据所测结果和鼠曲草各地实际差异，建议制定如下质量控制标准：槲皮素TLC鉴别为阳性；水分、总灰分和酸不溶性灰分应不超过8.12%、18.72%、11.33%；水溶性浸出物含量和醇浸出物含量不低于13.80%、16.38%。

［1］潘明.鼠曲草提取物抑菌作用初步研究［J］.四川食品与发酵，2006，42（6）：53－56.

［2］俞冰，杜瑾，张亚珍，等.鼠曲草止咳祛痰作用的实验研究［J］.浙江中医药大学学报，2006，30（4）：352－353.

［3］陈元，许静.咳嗽良药—鼠曲草［J］，中国民族民间医药杂志，2002，11（2）：121.

［4］姜丽君，朴锦花，刘宇，等.鼠曲草提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤保护作用［J］.时珍国医国药，2008，19（8）：1901－1902.

［5］李超，王孟楚.鼠曲草总黄酮的抗氧化活性研究［J］.中国食品添加剂，2012，1：111－115.

［6］王世宽，冉燃，侯华.超声波强化提取鼠曲草中总黄酮的研究［J］.四川理工学院学报，2008，21（4）：61－64.

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［8］徐玉婷，吴丹慧.鼠曲草的研究进展［J］.医药导报，2012，31（2）：192－194.

［9］曹晖.中药鼠曲草的本草考证［J］.江西中医学院学报，1992，4（2）：42－43，48.

Study on TLC identification and quality inspection project of Gnaphalium affine

ZHANG Li-qing，QU Chang-you，LIBo-wen，XIAO Hai-yan，LU Li-feng
（Shandong Drug and Food Vocational College，Weihai264210，China）

ObjectiveTo establish a simple and rapid quality control method and standard for Gnaphalium affine quantification.MethodsSamples from three different regions were studied on TLC identification.Themoisture，ashes，water－soluble and ethanol－soluble extractives of these sampleswere determined to establish the quality control standard.Results Quality control standard was developed by the confirmed indicators：TLC identification，moisture，ash，water－soluble extract and alcohol－soluble extractof Gnaphalium affine.ConclusionThe quality control standard for the Gnaphalium affine established by this research could provide the testing basis for Shandong Province and other regions.

Gnaphalium affine；TLC identification；Moisture test；Ashes test；Water－soluble extractive；Ethanol－soluble extractive

R284.1

A

2095－5375（2014）09－0511－003

山东省食品药品监督管理局2011年立项项目——《山东省中药材标准》、《山东省中药饮片炮制规范》（2012年版）标准研究

张立庆，男，讲师，研究方向：药物质量控制，E－mail：zlq5068＠163.com