细胞色素P450酶4F2基因多态性对中国人服用华法林起始七天内剂量的影响*

熊筱伟，刘红，韩璐璐，娄莹，华潞，李彦，李一石

细胞色素P450酶4F2基因多态性对中国人服用华法林起始七天内剂量的影响*

熊筱伟，刘红，韩璐璐，娄莹，华潞，李彦，李一石

目的：研究细胞色素P450酶4F2（CYP4F2, rs2108622）基因多态性对中国汉族人群服用华法林起始七天内剂量的影响。

华法林；CYP4F2基因多态性；初始剂量

(Chinese Circulation Journal, 2014,29:910.)

华法林是目前常用的口服抗凝药，其抗凝效果同血药浓度呈正相关性[1]。华法林药物基因组学的研究明确了基因多态性对服用华法林患者的剂量差异有影响[2]。细胞色素P450酶2C9（CYP2C9），维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1（VKORC1, -1639G＞A）和细胞色素P450酶4F2（CYP4F2, rs2108622）的基因多态性在不同人群中对华法林的稳定剂量均有显著的影响[3-5]。对华法林初始剂量的影响，目前研究较多的是CYP2C9和VKORC1的基因多态性[6-8]，而有关CYP4F2基因多态性的研究较少。本研究旨在评价CYP4F2基因多态性对中国汉族人服用华法林起始七天（初始阶段）剂量的影响。

1 对象与方法

研究对象：本研究入选我院2008-05至2008-10因心脏瓣膜置换和2010-11至2011-12因肺栓塞在我院首次接受华法林抗凝治疗，年龄≥18周岁，无肝、肾功能疾病及感染和肿瘤，无严重的心功能衰竭，服药起始七天内国际标准化比值（INR）至少1次进入1.8≤INR≤3.0（治疗窗）的患者271例，并检测其CYP4F2基因多态性。所有患者均签署书面知情同意书，试验经由阜外心血管病医院伦理委员会批准。

实验室检测：依地酸（EDTA）抗凝采集患者外周静脉全血4 ml，用脱氧核糖核酸（DNA）提取试剂盒（天根生化科技有限公司，北京）提取DNA后置于-80℃冰箱待测。利用直接测序的方法检测CYP4F2基因型。

INR检测及给药：检测患者华法林用药前及用药起始七天内每天的INR值。根据INR基线值，初次华法林剂量为2～3 mg，此后每日剂量根据前一日INR值进行调整。患者住院用药期间均予以均衡适量饮食。

临床观察指标：记录所有患者年龄、性别、身高、体重，体表面积等人口学信息。记录每日华法林剂量和INR检测结果以及每位患者服药后INR首次进入治疗窗的时间和服药起始七天内华法林的平均剂量。并记录主要的合并疾病和用药。

统计方法：利用计算机SPSS 17.0统计软件完成。计量资料以均数±标准差表示。Hardy-Weinberg遗传符合度及计数资料用卡方检验；两组间比较用独立样本t检验，非正态分布数据用非参数秩和检验。多元线性回归分析性别，年龄，体表面积，基因多态性和合并疾病及用药对华法林剂量的影响。P＜0.05被认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1患者人口学特征及CYP4F2基因多态性分布

CYP4F2基因多态性的CC、CT和TT基因型基因变异比例分别为：57.20%，34.31%，8.49%，基因多态性分布符合Hardy-Weinberg规律（P＞0.05），该人群符合群体基因遗传平衡。CC、CT和TT各基因型患者的性别、年龄、身高、体重等基线水平以及各基因型间合并疾病和合用药情况差异均无统计学意义（P＞0.05）。表1

表1 271例患者人口学特征及CYP4F2基因多态性分布[例(%),

表1 271例患者人口学特征及CYP4F2基因多态性分布[例(%),

注：CYP4F2：细胞色素P450酶4F2

CC基因型(n=155) CT基因型(n=93) TT基因型(n=23)基因变异比例 (%) 57.20 34.31 8.49男74 (47.7) 41 (44.1) 10 (43.5)女81 (52.3) 52 (55.9) 13 (56.5)年龄 (岁) 52.02±12.49 52.15±13.14 51.00±14.78身高 (cm) 163.79±8.23 164.98±8.19 163.83±7.24体重 (kg) 63.50±12.14 63.41±11.83 62.30±11.34体表面积 (m2) 1.66±0.19 1.67±0.19 1.64±0.17合并房颤 47 (30.3) 28 (30.1) 8 (34.8)未合并房颤 108 (69.7) 65 (69.9) 15 (65.2)合用胺碘酮 25 (16.1) 21 (22.6) 4 (17.4)未合用胺碘酮 130 (83.9) 72 (77.4) 19 (82.6)合用他汀 39 (25.2) 25 (26.9) 5 (21.7)未合用他汀 116 (74.8) 68 (73.1) 18 (78.3)

2.2CYP4F2基因多态性的CC、CT和TT各基因型华法林初始剂量及INR首次进入治疗窗时间的比较

TT、CT/TT基因型的平均华法林初始剂量显著高于CC基因型（P＜0.05），差异具有统计学意义。TT基因型的INR首次进入治疗窗的时间显著高于CC基因型（P＜0.05），差异具有统计学意义。表2

表2 CC、CT和TT各基因型的华法林初始剂量及INR首次进入治疗窗时间的比较

表2 CC、CT和TT各基因型的华法林初始剂量及INR首次进入治疗窗时间的比较

注：与CC基因型相比*P＜0.05。INR：国际标准化比值

例数 华法林初始剂量(mg/d) INR首次进入治疗窗时间 (d) CC基因型 155 3.20±0.75 3.41±1.60 CT基因型 93 3.37±0.91 3.67±1.51 TT基因型 23 3.67±0.75* 4.22±1.60*CT/TT基因型 116 3.43±0.89* 3.78±1.53

2.3多元线性回归分析结果

除外患者性别，年龄，身高，体重，CYP2C9和VKORC1基因多态性以及合并疾病和合用药等多种因素，CYP4F2基因多态性对患者华法林起始七天内华法林剂量的影响仍有统计学意义（回归系数0.21，P=0.003）。

3 讨论

我们的研究发现，在中国汉族人群服华法林后的起始七天内，CYP4F2基因多态性的CC基因型携带者INR进入治疗窗时所需的华法林剂量与CT/TT基因型携带者相比较低，差异具有统计学意义，且不受其他因素的影响。该研究结果同国内有关CYP4F2基因多态性对华法林稳定剂量影响的研究结果一致[9,10]。本研究数据也显示，CYP4F2基因多态性对华法林初始剂量的影响主要存在于CC和TT两基因型内，CC基因型携带者进入INR治疗窗所需要的时间短于TT基因型携带者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。提示在中国汉族人口服华法林抗凝治疗的起始阶段，携带CC基因型的中国人群对华法林抗凝治疗反应的敏感性较高。

在基因多态性对华法林初始作用影响的研究中，娄莹等[7]研究发现，CYP2C9和VKORC1对于肺栓塞或者心脏瓣膜置换术后患者初始阶段华法林的抗凝作用有影响。CYP4F2是维生素K1的代谢酶，其基因变异可以通过影响体内维生素K的水平从而影响维生素K相关的凝血因子水平，继而影响个体间的华法林剂量[11]。Caldwell等[12]于2008年首次发现CYP4F2基因多态性影响患者华法林的稳定剂量，并在随后的多个研究中得到证实[3-5]。有研究提示，初始阶段服用华法林的患者的维生素K1的水平可能与稳定剂量情况下的维生素K1的水平不同[13]，而CYP4F2在维生素K1循环中的作用也使得其基因多态性对华法林抗凝作用的影响在初始阶段和稳定阶段也可能不同。在一项有关CYP4F2基因多态性对华法林初始作用影响的研究中[14]，人们并未发现CYP4F2基因多态性对华法林抗凝患者的剂量和INR进入治疗窗的时间有明显的影响。而在服用华法林抗凝治疗的中国汉族人群中，我们研究发现，在华法林服用的初始七天内，同CT/TT基因型携带者相比较，CC基因型携带者能在服用较低华法林剂量的情况下，在较短的时间内即可进入INR的治疗窗，显示出CC基因型携带者较高的华法林治疗的敏感性。

综上所述，本研究发现，CYP4F2的基因多态性不仅对华法林的稳定剂量有影响，而在华法林抗凝治疗的中国汉族人群中，其对华法林的初始剂量和抗凝作用也具有显著的影响，该发现对初始阶段华法林的个体化治疗具有一定的指导意义。

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Effect of Cytochrome P-450 4F2 Gene Polymorphisms in Patients With Warfarin for Initial Doses in 7 Days

XIONG Xiao-wei, LIU Hong, HAN Lu-lu, LOU Ying, HUA Lu, LI Yan, LI Yi-shi.
Key Laboratory of Clinical Trials Research in Cardiovascular Drugs, Ministry of Health, State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Cardiovascular Institute and Fu Wai Hospital, CAMS and PUMC, Beijing (100037), China

LI Yi-shi, Email: lchyl_fuwai@sina.com

Objective: To study the effect of cytochrome P-450 4F2 (CYP4F2, rs2108622) gene polymorphisms in patients with warfarin for initial doses in 7 days.Methods: A total of 271 patients treated by warfarin were studied. The CYP4F2 gene polymorphisms were assessed by real-time PCR, the average initial warfarin doses in 7 days and the time of international normalized ratio (INR) fi rst arrived to therapeutic range were recorded. The differences of initial warfarin doses and the time of INR fi rst arrived to therapeutic range among CYP4F2 gene polymorphisms of CC, CT and TT genotypes were analyzed by statistical method.Results: The average initial warfarin doses among CYP4F2 polymorphisms of TT and CT/TT were higher than CC, P＜0.05. The times of INR first arrived to therapeutic range in TT genotype was higher than CC genotype, P＜0.05. With adjusted gender, age, body height and weight, CYP2C9 and VKORC1 polymorphisms, conditions of disease and medication, the effect of CYP4F2 gene polymorphisms on initial warfarin doses in 7 days were still with the statistic meaning (regression coeff i cient=0.21, P=0.003).Conclusion: CYP4F2 polymorphisms inf l uenced the initial warfarin doses in 7 days in relevant patients.

Warfarin; Cytochrome P-450 4F2 gene polymorphisms; Initial dose

2014-05-29）

（编辑：王宝茹）

2010年国家临床重点专科建设项目——《卫生部重点实验室项目》；《大品种药物IV期临床试验及新药临床试验审评研究技术平台》（2011ZX09304）

100037 北京市，北京协和医学院 中国医学科学院 国家心血管病中心 阜外心血管病医院 卫生部心血管药物临床研究重点实验室

熊筱伟 博士研究生 主要从事临床药理研究 Email：bddwxxw@aliyun.com 通讯作者：李一石 Email: lchyl_fuwai@sina.com

R54

A

1000-3614（2014）11-0910-03

10.3969/j.issn.1000-3614.2014.11.014

方法：利用Real-time PCR的方法分析271例服用华法林抗凝患者的CYP4F2基因多态性，记录患者服用华法林七天内的平均华法林初始剂量，国际标准化比值（INR）首次进入治疗窗的时间。统计学方法分析CYP4F2基因多态性的CC，CT和TT各基因型间初始剂量和INR首次进入治疗窗的时间差异。

结果：CYP4F2基因多态性的TT、CT/TT基因型的平均华法林初始剂量显著高于CC基因型（P＜0.05），差异具有统计学意义。TT基因型的INR首次进入治疗窗的时间显著高于CC基因型（P＜0.05），差异具有统计学意义。除外患者性别，年龄，身高，体重，CYP2C9和VKORC1基因多态性以及合并疾病和合用药等多种因素，CYP4F2基因多态性对患者华法林起始七天内华法林剂量的影响仍有统计学意义（回归系数0.21，P=0.003）。

结论：在服用华法林的中国人中，CYP4F2基因多态性对华法林起始七天内的剂量有影响。