结核蛋白芯片对肺结核及肺外结核的诊断价值

吴友根,刘红兵，杨兴萍，王军，罗菊华

(攀枝花市第六人民医院，四川攀枝花617023)

结核蛋白芯片对肺结核及肺外结核的诊断价值

吴友根,刘红兵，杨兴萍，王军，罗菊华

(攀枝花市第六人民医院，四川攀枝花617023)

目的探讨结核蛋白芯片检测对诊断肺结核及肺外结核的价值。方法使用蛋白芯片系统检测血清结核抗体的病例共4765例,其中肺结核334例,肺外结核83例,肺结核并肺外结核69例，非结核病4279例。我们采用的蛋白芯片包含了结核分枝杆菌(MTB)中5种成分，即ESAT-6、CFP10、LAM、38KD和16KD。结果334例肺结核中227例结核抗体阳性,83例肺外结核中50例阳性,69例肺结核并肺外结核中51例阳性，4279例非结核病797例阳性,结核蛋白芯片检测肺结核的阳性率为67.96%,肺外结核的阳性率为60.24%,肺结核并肺外结核的阳性率为73.91%，非结核病的阳性率为18.62%。结论结核蛋白芯片是对肺结核及肺外结核的辅助诊断有重要价值。但在淋巴结结核、结核性胸膜炎中阳性率偏低,敏感性稍差。

结核蛋白芯片；肺结核；肺外结核；诊断价值

结核分枝杆菌不仅可引起肺结核，而且可引起肺外多种器官的感染。结核病是MTB感染引起的一种感染性疾病。全球已有1/3的人口，即约20亿结核感染者[1]。在我国一些地区结核病已在感染性长期发热的病因中上升至首位，其中肺外结核远较肺内结核为多[2]。采用蛋白芯片技术检测患者抗体的MTB中5种成分，为早期分泌性低分子量6KD抗原靶(ESAT-6)、培养滤液蛋白10 (CFP10)、脂阿拉伯甘露聚糖抗原(LAM)、结核分枝杆菌复合群特异蛋白(38KD、16KD)。2009年12月至2014年4月，利用该技术进行了临床试验，现将试验报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源(1)结核组:选取我院感染科临床表现、细菌学、影像学或抗结核治疗有效而明确诊断的结核患者486例；其中肺结核334例；肺外结核83例(结核性胸膜炎29、淋巴结结核18例，骨结核19例，泌尿系结核8例，其他9例)；肺结核并肺外结核69例(含结核性胸膜炎46、淋巴结结核4例，骨结核7例，其他12例)。男320例，女166例，年龄1～84岁,平均年龄48岁。(2)非结核疾病组:选取我院非结核患者4279例(且以出院诊断为准),男2539例，女1740例，年龄1月～94岁,平均年龄57岁。结核病患者中59例痰涂片查见抗酸杆菌，33例病理符合结核诊断。均抽取空腹血液5ml。所有研究对象均无HIV感染、妊娠、使用免疫抑制剂或增强剂。5种MTB复合群特异性的抗原来检测待检血清中的抗体,如果任一抗体检测阳性,结果可判定为阳性,5种抗体检测均为阴性,结果可判定为阴性。

1.1.2 仪器及试剂西安联尔科技有限公司的配套仪器及相应试剂盒。

1.2 检测方法严格依照配套说明书进行操作，结果由仪器自动判读。

1.3 统计学分析采用SPSSl0.0软件进行统计学处理。结核与非结核组患者的阳性率比较采用χ2检验，P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

4765例血清标本MTB-IgG抗体的敏感性为67.49%(328/486),特异性为81.38%(3482/4279)。详见表1、表2。

表1 结核蛋白芯片法检测结核病人和对照组的结果

表2 83例单纯肺外结核抗体蛋白芯片法结果

3 讨论

辅助结核病诊断的蛋白芯片是近年来蛋白质组学研究中兴起的一种新方法，此技术是一高特异性、高通量、高灵敏度且微型化的蛋白质分析技术，朱同华[3]报告该方法诊断结核病的特异性96．5%，灵敏度为83.0%，因此，可用于结核病的快速诊断，特别是肺外结核及菌阴肺结核病的快速诊断，该技术为临床诊断结核病起到了积极的作用。本研究淋巴结结核(均为手术病理诊断)、结核性胸膜炎抗体阳性率过低具体原因理论上不好解释，可能是结核性胸膜炎等肺外结核并不都是由MTB感染所致的疾病，可能也包含部分非结核分枝杆菌(NTM)肺外疾病。李宁等[4]对283株分枝杆菌的菌型鉴定结果显示，MTB占152株，NTM占131株，NTM占46.3%，应该引起同行重视[4]。虽然目前诊断技术日益提高肺外结核在FUO病因诊断中仍是个难点，有文献报告[5]FUO的肺外结核大多数是依靠诊断性抗结核治疗确诊，因此开展结核病诊断研究很有意义。如果将蛋白芯片抗体与张周云等[6]利用基因工程方法检测患者血清中结核抗原相结合，笔者推测抗体与抗原联合检测，相互印证，更有利于结核病的诊断。本研究敏感性为67.49%,特异性为81.38%，P<0.01说明与对照组有显著性差异，值得临床推广应用。

[1]葛均波,徐永健,梅长林,等.内科学[M].第8版.北京:人民卫生出版社,2013:61.

[2]陈灏珠,廖履坦,杨秉辉,等.实用内科学[M].第12版.北京:人民卫生出版社,2005:782-786.

[3]朱同华.血清结核抗体蛋白芯片检测与痰抗酸染色实验室分析[J].实验与检验医学,2010,28(5):492-496.

[4]李宁,伍严安,胡辛兰,等.结核分枝杆菌的实验室检测方法学评价及耐药情况分析[J].实验与检验医学,2013,31(3):214-216.

[5]石秋萍,王超,徐定华,等.不明原因发热372例临床分析[J].中华内科杂志,2014,53(4):298-302.

[6]张周云,熊国亮.探讨ELISA法检测血清结核杆菌抗原对肺结核病的诊断价值[J].实验与检验医学,2010,28(6):537-538.

Clinical value of tuberculosis protein chip in diagnosis of pulmonary and extra pulmonary tuberculosis

WU Yougen,LIU Hongbing,YANG Xingping,et al.The Sixth People's Hospital of Panzhihua,Sichuan Panzhihua 617023，China

Objective To explore the diagnosis value of tuberculosis protein chip for pulmonary and extra pulmonary tuberculosis(TB).Methods The serum tuberculosis antibodies were detected by using protein chip system in 4765 cases,including 334 cases of pulmonary tuberculosis,83 cases of extra pulmonary tuberculosis,69 cases of pulmonary tuberculosis and extra pulmonary tuberculosis,4279 cases of non tuberculosis.The protein chip we used contain 5 components of Mycobacterium tuberculosis,namely ESAT-6、CFP10、LAM、38KD and 16KD.ResultsThe TB antibody was detected positive in 227 of 334 pulmonary TB cases，positive in 50 of 83 extra pulmonary TB cases,positive in 51 of 69 pulmonary TB and extra pulmonary TB cases,and positive in 797 of 4279 non-TB cases.The positive rate of detection of tuberculosis antibody using tuberculosis protein chip in pulmonary tuberculosis group was 67.96%.The positive rate in extra pulmonary tuberculosis group was 60.24%.The positive rate in pulmonary and extra pulmonary group was 73.91%.The positive rate in non-TB group was 18.62%.Conclusion The TB protein chip is a fast,easy and effective method for diagnosing the pulmonary TB and extra pulmonary TB with good specificity,but it is less sensitive in the diagnosis of lymphoid tuberculosis and tuberculous pleurisy.

Tuberculosis protein chip；Pulmonary tuberculosis；Extra pulmonary tuberculosis；Diagnostic value

R378.91+1

A

1674-1129(2014)05-0503-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.004

2014-04-14；

2014-07-07)

攀枝花市应用技术研究与开发项目(编号：2013CYS-16-10)

吴友根，1967年生，男，本科，主任医师，主要从事传染病临床诊治与医疗质量。