血清标本艾滋病毒抗体检测结果的分析

邹继红

（沈阳铁路局吉林铁路疾病预防控制所长春疾控站检验科，吉林 长春 130051）

血清标本艾滋病毒抗体检测结果的分析

邹继红

（沈阳铁路局吉林铁路疾病预防控制所长春疾控站检验科，吉林 长春 130051）

目的了解到院单位就诊患者中HIV的感染状况，分析其感染途径及分布状况。方法采用酶联免疫法（ELISA）对血清进行初筛，初筛阳性者再行胶体硒检测法复检。结果42198例血清标本经筛查，复检试验，结果108例阳性，占0.26%。结论对HIV高危人群和可能经医源性途径传播或感染HIV的患者进行常规HIV抗体检测，是尽早发现HIV感染并防止其医源性传播的必要措施。

血清；艾滋病毒；检测

艾滋病，即获得性免疫缺陷综合征（AIDS）。人类因为感染人类免疫缺陷病毒（HIV）后引起获得性免疫缺陷综合征和相关疾病的。HIV是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒，属反转录病毒的一种。病毒主要侵犯CD4T细胞、CD4单核细胞和B淋巴细胞。是一种至今无法治疗的致命性传染病[1]。该病毒破坏人体的免疫能力，导致免疫系统失去抵抗力，以致各种疾病及癌症得以在人体内生存，发展到最后，导致艾滋病。HIV主要存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物、乳汁中，通过性行为、静脉注射吸毒、母婴、血液传播。1981年，HIV病毒在美国首次发现。截至2008年底，全球AIDS感染者存活3340万，新感染270万，死亡200万。AIDS严重威胁着人类的生存，已引起各国政府的高度重视。1985年，我国第一次发现，截至2010年12月31日我国累计报告AIDS感染者51.7万，患病13.8万，死亡7.2万，艾滋病已成为严重威胁世界人民健康的公共卫生问题。目前，HIV感染可通过检测HIV 特异性抗体、抗原、核酸或病毒分离培养加以确定。常规使用的标准诊断项目是血清学抗体检测。AIDS检测方法主要有酶联免疫吸附检测法（ELISA）和免疫荧光检测法（IFA）。HIV抗体检测包括筛查试验、复筛试验和确认试验3个部分。笔者现将2009年4月至2012年5月检测42198例血清标本筛查与确认结果分析如下。

1 资料与方法

1.1 检测对象

本组42198标本均为2009年4月至2012年5月来单位就诊的高危人群，有吸毒史、到过AIDS高发区或有AIDS疑似症状的患者，术前、产前、戒毒病区住院患者、需输血或内镜检查及治疗的患者；其中门诊患者24296例，住院患者19096例；其中男性20123例，女性22075例；年龄1～85岁。

1.2 仪器与试剂

EILSA法试剂采用珠海丽珠试剂有限公司、郑州华美生物技术有限公司（HIV1+2 型）诊断试剂盒，确认试验试剂采用美国Abbott 生产的雅培试剂，采用HIV1+2 型抗体免疫印迹试剂盒（Western Blot），仪器采用酶标仪（博赛2010）和全自动洗板机（博赛Flaido），以上试剂均经国家药监局注册批准，批检合格，并在有效期内。

1.3 检测方法

筛查试验采用酶联吸附双抗夹心法和胶体硒快速检测法。酶联吸附试验其标记程序为：将5 μg HRP溶于0.5 mL蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠水溶液0.5 mL，混匀，于4 ℃条件下静止30 min，取出，加入0.16 mol/L的乙二醇水溶液0.5 mL，室温放置30 min后，加入含5 g纯化抗体的水溶液1 mL，混匀，装透析袋，以0.05 mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液，在4 ℃条件下慢慢搅拌透析6 h使之结合，然后吸出，加5 g/mL硼氢化钠（NaBH4）溶液0.2 mL，于4 ℃下静止2 h，将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液，在4 ℃静止30 min，将所得沉淀物溶于少许0.02 mol/L、pH7.4PBS中，并对之透析过夜（4 ℃），次日离心除去不溶物，即得到酶标抗体，用0.02 mol/L、pH7.4PBS稀至5 mL，进行测定后，冷冻干燥或低温保存。

胶体硒快速检测是一种用免疫层析法原理定性测定血样的HIV抗体。加50 μL血清于样品反应垫中。等待15～60 min，读取结果。如果样品中含有HIV1/2抗体，抗体将会与硒胶体-抗原结合，形成一条红线。如果样品中无HIV抗体，硒胶体-抗原结合物将不会与固相包被的合成肽和重组抗原结合，则没有一条红线形成。

1.4 判定标准[2]

按照中国疾病预防控制中心《全国艾滋病检测技术规范》的标准判定。HIV抗体阳性：至少有2条env 带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；HIV-2抗体阳性：至少有2条env 带（gp36 和gp140/gp105）出现，符合试剂盒提供的阳性判断标准；HIV抗体阴性：无HIV抗体特异带出现；HIV抗体不确定：出现HIV抗体特异带，但不足以判定阳性。

2 结 果

2.1 检测结果

42198例血清标本经筛查试验，确认试验，结果108例阳性，占0.26%。经确认的108例HIV阳性标本中，出现9条带的42例，占38.89%，5～8条带45例，占41.67%，1～2条带21例，占19.44%。108份标本性别分布，男61例（56.48%），女47例（43.52%） 。

2.2 年龄分布

108例HIV抗体阳性病例中，20～40岁病例数合计87例，占全部阳性病例的80.56%，各年龄组HIV抗体阳性病例分布分别＜10岁2例，10～19岁7例，20～29岁44例，30～39岁14例，40～49岁18例，50～59岁12例，60～85岁11列。

2.3 感染途径分析

108份HIV抗体阳性病例中，有输供血史46例（42.59%）；性接触感染，包括夫妻、同性，34例（31.48%）；吸毒11例（10.19%）；母婴垂直感染10例（9.26%），其余7例（6.48%）感染途径不明。在108例AIDS 感染者中，有11对为夫妻同时感染。

2.4 职业分布

108例AIDS 感染者中，农民41例（37.96%），个体或无业者40例（37.04%），学生10例（9.26%），干部5例（4.63%），其余不明职业4例（3.70%）。

3 讨 论

HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的T4淋巴组织作为攻击目标，大量破坏T4淋巴组织[3]，产生高致命性的内衰竭。这种病毒在地域内终生传染，破坏人的免疫平衡，使人体成为各种疾病的载体。最终因感染各种疾病而致死。

早发现早阻断是控制HIV传播的重要措施，所以HIV抗体的检测就显得十分的必要。在HIV感染初期，感染者的免疫功能没有受到严重破坏，临床症状不明显。本组6例HIV抗体阳性者均无AIDS症状，此6例分别来自于不同科室，这就提示临床科室都应对术前、产前、需输血或需内镜检查及治疗的患者，有可疑AIDS 症状、患者中有性病史、吸毒史、冶游史、在偏远地区做过手术并输过血的高危人群应详细询问病史，将其列为重点检测对象，且经检测HIV抗体阴性的疑似患者还要考虑其处在窗口期的可能性，建议其度过窗口期后复检。因此血清HIV抗体检测，在防止医源性传播中起着重要的作用。

酶联免疫法用于检测包被于固相板孔中的待测抗原[4]，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。本组HIV抗体检测试验，检测程序完全按照《全国艾滋病检测技术规范》实施。本组对送检的标本先经过初筛，再复筛，然后再做确认试验。初筛、复筛试剂选用高敏感性、高特异性的试剂，以避免假阳性的出现。

[1] 王素娟,徐建萍.2002～2008年某医院院内HIV[J].中国皮肤性病学杂志,2009,23(6):362-363.

[2] 李韶深,赵俊芳.4318例血清标本梅毒和HIV检测结果分析[J].天津医药,2012,40(8):853-854.

[3] 王春波.河北省滦南县523例性病门诊就诊者性病艾滋病流行病学分析[J].中国药物依赖性杂志,2011,20(1):50-53.

[4] 王丽,白莉.性病就诊人群的HIV筛查及意义[J].中国皮肤性病学杂志,2010,24(1):50-51.

R446.11；R512.91

B

1671-8194（2014）14-0189-02