前列地尔对兔内皮细胞缺氧复氧损伤后抗栓功能的影响

邹维生

前列地尔对兔内皮细胞缺氧复氧损伤后抗栓功能的影响

邹维生

目的探讨前列地尔(PGE1)对兔内皮细胞缺氧复氧损伤模型的抗栓功能影响。方法对体外培养、并建立兔内皮细胞缺氧复氧损伤的模型进行分组：模型组、低浓度PGE1组、中浓度PGE1组、高浓度PGE1组、正常组。对以上各组培养上清液中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、细胞内血管假性血友病因子(vWF)的含量或表达等进行测量。结果与正常组比较, 模型组NO含量、SOD活性、vWF表达均有所下降, MDA含量增加, 且差异具有统计学意义(P＜0.05)；而低、中、高浓度PGE1组与模型组比较, 其NO含量、SOD活性、vWF表达均有所增加或增强, MDA含量降低, 且差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论PGE1对机体缺氧复氧损伤之后的血管内皮细胞抗栓功能具有积极的保护作用。

前列地尔；内皮细胞；模型；缺氧复氧；抗栓功能

前列地尔(PGE1)具有广泛的药理性活作用, 对某些神经-体液因子的表达有积极的调节作用, 从而间接地具有保护内皮的作用［1］。本文通过对体外培养、并建立兔内皮细胞缺氧复氧损伤的模型进行分组研究, 以探讨PGE1对内皮细胞抗栓功能的保护作用。现将结果报告如下。

1 材料

1. 1实验动物 1周龄试验用大白兔。

1. 2药品及试剂 前列地尔注射液、胶原酶、胰蛋白酶、SOD、NO试验剂盒、RPMⅠ164培养液、兔抗人Factor Ⅷ抗体等。

2 实验方法

2. 1兔内皮细胞培养 无菌环境中, 取急死试验用兔主动脉, 将其主动脉外膜去除, 并用PBS清洗3次之后加入0.1%Ⅱ型胶原酶；并于37℃条件下, 消化40 min；离心10 min之后弃除上清液；加入RPMⅠ164培养液混匀沉淀细胞。置于37℃条件、5% CO2培养箱中培养, 待用。

2. 2建立缺氧复氧模型 配制模拟缺氧和复氧溶液。将缺氧溶液替换正常培养液3 h, 以达缺氧目的；再将复氧溶液替换缺氧溶液2 h, 达到复氧效果［2］。

2. 3分组实验 正常组：正常细胞培养；模型组：缺氧复氧操作损伤模型；低浓度组：0.05 μg/ml+缺氧复氧损伤；中浓度组：0.20 μg/ml+缺氧复氧损伤；高浓度组：0.40 μg/ml +缺氧复氧损伤；同时, 将前列地尔加入缺氧复氧液中, 并逐渐调整至以上终浓度。

2. 4统计学方法 本文采用SPSS16.0对文中所有相关数据进行统计分析, 计数资料采用χ2检验, P＜0.05表示差异具有统计学意义。

3 结果

与正常组比较, 模型组NO含量、SOD活性、vWF表达均有所下降, MDA含量增加, 且差异具有统计学意义(P＜0.05)；而低、中、高浓度PGE1组与模型组比较, 其NO含量、SOD活性、vWF表达均有所增加或增强, MDA含量降低, 且差异具有统计学意义(P＜0.05)。

4 讨论

内皮细胞及其合成物质具有对抗和促进血栓形成的双重功能。则可以通过对内皮细胞分泌物活性物质来进一步判断内皮细胞的抗栓功能。国内外诸多文献均指明：引发内皮细胞结构损伤以及功能障碍主要是由于氧化操作引起的脂质过氧化化产物MDA, 并由MDA的变化进一步判断内皮细胞损伤的大概原因。与此同时, 作为机体重要的抗氧化酶SOD的活性变化也同样可以对机体内部抗氧化损伤能力的加以具体反映［3］。

本文通过比较正常组和模型组SOD和MDA水平发现,模型组SOD活动降低明显, 而MDA水平升高明显, 从而证明缺氧复氧曾对细胞造成了较为严重的氧化损伤。本文又通过将三组不同PGE1浓度组与模型组比较, 其中, SOD活性均升高明显；而MDA水平均低于模型组。因此, 该对比实验也说明了PGE1可有效提高内皮细胞清除氧自由基的能力, 从而使缓角、降低内皮细胞脂质过氧化损伤程度, 起到了积极的保护作用。同时, 内皮细胞分泌的重要抗栓因子——NO, 也是反映内皮细胞功能的指标之一。而在文中的实验结果中, 则可以看出, 与正常组比较, 模型组NO含量下降明显；而低、中、高浓度PGE1组与模型组比较, 其NO含量均有所增加, 且差异明显。从而也证明了PGE1可通过积极活化NO, 使其浓度升高, 可有效对抗血栓形成。vWF作为外源性凝血系统的启动因子, 具有促进血小板聚焦和黏附作用, 也是内皮细胞抗栓功能的重要标志物。本文模型组与正常组比较, vWF表达均有所下降；而低、中、高浓度PGE1组与模型组比较, vWF表达均有所增加；这也明说了vWF具有保护内皮细胞抗栓功能的作用。

因此, PGE1对机体缺氧复氧损伤之后的血管内皮细胞抗栓功能具有积极的保护作用。

［1］ 王少纲.前列地尔脂微球载体治疗急性脑梗死临床疗效观察.中国实用神经疾病杂志, 2010, 13(20):21-22.

［2］ 关欣, 李应东.细胞缺氧复氧模型建立方法的研究进展.医学综述, 2008, 14(18):2737-2739.

［3］ Fang W, LT H, Zhou L. Protective effects of prostanglandin E1 on human umbilical vein endothelial cell in jury induced by hydrogen peroxide.Acta Phamacol Sin, 2010, 31(4):485-492.

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