新辅助化疗对宫颈癌患者OPN和MMP-9表达的影响

张玲玲，李广起，赵 靓，刘书斌，赵伟珠

(滨州市人民医院，山东滨州256610)

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤，许多患者确诊时已处于晚期，手术效果不佳，易转移及复发。近年研究显示，术前行新辅助化疗可缩小肿瘤体积和范围，且可控制术中、术后医源性转移，为手术切除创造良好的条件。骨桥蛋白(OPN)是一种分泌型钙结合型磷酸化糖蛋白，可以特异性结合与细胞黏附有关的氨基酸序列，通过与其受体结合，可以增强细胞的趋化、黏附和迁移能力，促进肿瘤细胞的侵袭和转移［1］。基质金属蛋白酶-9(MMP-9)可以降解细胞外基质和基底膜，增强肿瘤性血管的生成，从而促进肿瘤细胞的侵袭和转移［2］。本研究观察了新辅助化疗对宫颈癌患者肿瘤组织中OPN和MMP-9表达的影响，并探讨二者的表达与化疗效果的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2010年12月～2013年12月我院收治的宫颈癌患者81例，年龄26～68(42.9±8.1)岁。均经HE切片复读确认，未接受过手术或化放疗。宫颈癌临床分期按FIGO(1995年)标准，Ⅱa期24例，Ⅱb期29例，Ⅲa期16例，Ⅲb期10例，Ⅳ期2例。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 化疗前12 h及6 h分别给予地塞米松20 mg，化疗前30 min静滴奥美拉唑40 mg+苯海拉明50 mg。化疗方案采用紫杉醇联合顺铂，先给予紫杉醇135～175 mg/m2滴注3 h，随后顺铂50～75 mg/m2滴注，3周为一疗程，共治疗2个疗程。

1.2.2 检测方法 新辅助化疗前行宫颈组织活检，化疗后手术取活组织进行检测，标本用10%甲醛固定，石蜡包埋，切4 μm厚的石蜡切片，65℃烘烤，脱蜡，采用免疫组织化学染色SP法测定OPN和MMP-9的表达。根据切片染色程度和阳性细胞数所占百分比综合计分。染色强度:细胞无显色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分;阳性细胞数所占百分比:阴性为0分，阳性细胞数≤10%为1分，11% ～50%为2分，51% ～75%为3分，＞75%为4分。染色强度计分×阳性细胞计分＞3分为阳性。

1.2.3 疗效评价标准 按照 RECIST标准 1.0版［3］进行疗效评价，完全缓解(CR):肉眼观察肿瘤完全消失，且无新病灶;部分缓解(PR):肿瘤缩小≥50%，且无新病灶;稳定(SD):肿瘤缩小＜50%，且无新病灶;进展(PD):肿瘤无缩小或有新病灶出现。以CR+PR计算总有效率。不良反应评价采用WHO抗癌药物急性与亚急性毒副反应分级标准。

1.2.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，计数资料的比较采用χ2检验，P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 新辅助化疗的疗效与安全性 化疗2个疗程后，CR 27例，PR 37例，SD 10例，PD 7例，总有效率为79.0%。化疗过程中出现贫血28例，白细胞减少62例，血小板减少35例，神经毒性14例，肝功能损害11例，肾功能损害5例，恶心呕吐73例。

2.2 化疗前后 OPN、MMP-9表达比较 化疗前OPN和MMP-9的表达阳性率分别为88.9%(72/81)和 84.0%(68/81)，化疗后分别为 13.6%(11/81)和12.3%(10/81)，化疗后OPN和MMP-9的表达阳性率均明显低于化疗前(P均＜0.01)。

2.3 OPN、MMP-9表达与新辅助化疗效果的关系化疗前OPN表达阳性者化疗总有效率为77.8%，阴性者为88.9%，OPN表达阴性者的化疗效果更理想(P＜0.05)。化疗前MMP-9表达阳性者化疗总有效率为77.9%，阴性者为84.6%，MMP-9表达阴性者的化疗效果更理想(P＜0.05)。见表1。

表1 OPN、MMP-9表达与新辅助化疗的关系

3 讨论

据统计，30% ～80%的宫颈癌患者死于侵袭和转移［4，5］。单纯手术治疗局部晚期宫颈癌难度大，易发生淋巴结或远处转移。放疗疗效相对肯定，但卵巢遭受放射剂量为6～10 Gy时，可永久性被破坏，阴道上皮发生纤维化，进而发生阴道挛缩［6］。新辅助化疗方案作为综合治疗的一部分，用于头颈部癌、骨肿瘤及乳腺癌的治疗已取得一定效果。新辅助化疗分为全身静脉化疗和子宫动脉介入栓塞化疗两种方式，动脉介入化疗的缺点是具有侵入性，且费用较高;静脉化疗与动脉化疗效果相同，且更简便、经济［7］。本研究对宫颈癌患者采用紫杉醇联合顺铂化疗，总有效率为79.0%，不良反应包括贫血、白细胞减少、血小板减少、神经毒性、肝功能损害、肾功能损害、恶心呕吐。表明新辅助化疗治疗宫颈癌效果显著，不良反应程度较轻。

OPN是一种多功能的细胞外基质中的磷酸化唾液酸糖蛋白。OPN一方面与细胞表面的多种整合素受体通过黏附序列 RGD结合，另一方面与CD44通过非依赖RGD序列结合，从而将细胞内一系列信号激活，合成内在的蛋白水解酶，加快降解纤维粘连蛋白和层粘连蛋白等细胞外基质，促进肿瘤的浸润和转移［8，9］。Tuck 等［10］证实，在转染实验中，良性肿瘤高表达OPN后可以向恶性转化。研究表明，多种肿瘤组织均存在OPN高表达，并且其表达程度与肿瘤的浸润转移相关。MMP属于内切蛋白水解酶家族，主要由肿瘤细胞等合成和分泌，能降解基底膜，利于血管内皮细胞出芽，促进宫颈癌局部血管的生成。MMP-9分子量为92 kD，是MMP中分子量最大的酶，其不仅可以降解细胞外基质和基底膜，还能改建细胞外基质，是新生血管形成的关键因素［11］。徐平等［12］报道，在宫颈癌患者不同分期中MMP-9的表达强度存在差异，随肿瘤进展其表达逐渐增强，与宫颈癌的临床分期相关。本研究显示，化疗前OPN和MMP-9的表达阳性率分别为88.9%和84.0%，化疗后分别为13.6%和12.3%，化疗后阳性率均明显降低;化疗前OPN表达阴性、MMP-9表达阴性者的化疗效果更理想。因此认为，新辅助化疗可以减少OPN和MMP-9的表达，监测OPN和MMP-9可以判断化疗效果。

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