严小平 王 楠 刘彩琴 梅 瑜 孟莉英 李成平
(浙江树人大学生物与环境工程学院1,杭州 310015)(浙江树人大学科研处2,杭州 310015)
番木瓜(CaricaPapayaL.)是一种多年生常绿草本果树,原产于墨西哥南部以及邻近的美洲中部地区,我国主要分布在广东、海南、广西、云南、福建、台湾等省(区)。番木瓜呈绿色或黄色,果肉为黄色,其皮薄肉厚、汁多味甜、清香沁人,具有健脾胃、助消化、清暑解渴、润肺止咳的功效[1]。番木瓜籽为番木瓜果肉加工的副产物,往往作为垃圾扔掉,这样不仅污染环境,而且浪费了大量的生物资源。番木瓜籽中脂肪质量分数可达30%以上,其中的主要脂肪酸为油酸[2],这种不饱和脂肪酸对人体有重要的保健作用,具有较高的营养价值和开发利用价值。
目前,有关番木瓜籽油提取方法的研究甚少,利用超声波辅助提取番木瓜籽油的研究鲜见报道。超声波辅助技术已广泛应用于天然产物有效成分的提取,具有操作简便快捷、提取温度低、提取物的结构不被破坏等优点[3-11]。本试验采用溶剂浸提,超声波辅助萃取的方法对番木瓜籽油的提取工艺进行探讨,为番木瓜籽的开发利用提供一定的理论基础。
番木瓜籽:番木瓜购自欧尚杭州大关店,番木瓜籽经清洗干净后在60 ℃恒温干燥箱中烘干备用;石油醚:杭州长征化工厂;正己烷:杭州双林化工试剂厂,所用试剂均为分析纯。
SK10GT型超声波清洗器:上海科导超声仪器有限公司;SHZ-Ⅲ型循环水真空泵:巩义予华仪器责任有限公司;RE-52A型旋转蒸发器:上海亚荣生化仪器厂。
准确称取一定量经粉碎的番木瓜籽粉,用滤纸包裹装入烧瓶中,于设置的条件下进行萃取,超声结束后减压抽滤,滤液经旋转蒸发器蒸馏,将提取物放入干燥箱中干燥直到恒重,计算番木瓜籽油的提取率。
番木瓜籽油的提取率=(m2-m1)/m×100%
式中:m2为空瓶和番木瓜籽油的质量/g,m1为空瓶质量/g,m为番木瓜籽的质量/g。
粗蛋白测定采用GB/T 6432—2008法;粗脂肪测定采用GB/T 5512—2008法;水分测定采用GB/T 5528—2008法;灰分测定采用GB/T 5505—2008法;碘值测定采用GB/T 5532—2008法;折光率测定采用GB/T 5527—2008法;过氧化值测定采用GB/T 5538—2005法。
番木瓜籽的主要成分分析结果如表1所示。
表1 番木瓜籽的主要成分/%
从表1可以看出,番木瓜籽中含有35.8%的粗脂肪,油脂含量高于一般大豆(20%),是一种具有较大开发潜力的油料资源。
2.2.1 溶剂对提取率的影响
准确称取烘干至恒重、质量为10.00 g番木瓜籽粉6份,按料液比1∶4(g∶mL)加入不同溶剂,在超声功率120 W,超声温度50 ℃抽提30 min,结果见图1。
图1 不同溶剂对提取率的影响
从图1中可知,乙酸乙酯的提取率较低,而石油醚、三氯甲烷、正己烷、甲苯的提取率相当,但考虑到三氯甲烷、甲苯有一定的毒性,正己烷的价格相对较高,综合考虑选择石油醚为抽提溶剂。
2.2.2 料液比对提取率的影响
准确称取烘干至恒重、质量为10.00 g番木瓜籽粉6份,按料液比1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6(g∶mL)加入石油醚,在超声功率120 W,超声温度50 ℃抽提30 min,结果如图2所示。
图2 料液比对提取率的影响
由图2可知,料液比小于1∶4时,番木瓜籽油提取率随料液比增大而增大;当料液比大于1∶4时,番木瓜籽油提取率随料液比增大基本不变,因此选择料液比为1∶4比较适宜。
2.2.3 超声温度对提取率的影响
准确称取烘干至恒重、质量为10.00 g番木瓜籽粉6份,按料液比1∶4加入石油醚,在超声功率120 W,温度为30、40、50、60、70 ℃抽提30 min,结果如图3所示。由图3 可知随着温度的升高,番木瓜籽油提取率迅速增大,当温度高于50 ℃,温度的升高对提取率的提高影响不明显,从经济和安全角度考虑,确定提取温度为50 ℃是合适的。
图3 温度对提取率的影响
2.2.4 超声功率对提取率的影响
准确称取烘干至恒重、质量为10.00 g番木瓜籽粉6份,按料液比1∶4(g∶mL)加入石油醚,在超声温度50 ℃,超声功率60、80、100、120、150 W抽提30 min,结果如图4所示。
图4 超声功率对提取率的影响
由图4可知,番木瓜籽油提取率随着超声功率的增大而增大,但当超声功率达到一定值时,提取率趋于恒定,适宜的超声功率为120 W。
2.2.5 超声时间对提取率的影响
准确称取烘干至恒重、质量为10.00 g番木瓜籽粉6份,按料液比1∶4(g∶mL)加入石油醚,在超声温度50 ℃,超声功率120 W抽提10、15、20、25、30 min,结果如图5所示。
图5 超声时间对提取率的影响
由图5可知,在20 min之内,番木瓜籽油提取率与超声时间成正比关系,超声时间越长,提取率越高,在20 min之后,提取率随时间的变化不大,确定超声时间20 min较为适宜。
在单因素的基础上,选择料液比,超声温度,超声功率,超声时间为考查对象,以番木瓜籽油提取率为指标,采用L9(34)进行正交试验。各因素水平见表2,正交试验结果见表3。
表2 正交试验设计
表3 正交试验结果
由表3可知,影响番木瓜籽油提取率的因素主次顺序为:料液比>超声温度>超声时间>超声功率,最佳工艺条件是A3B2C2D1,即料液比1∶4,超声温度50 ℃,超声时间20 min,超声功率120 W。
按2.3所得出的番木瓜籽油提取的最佳工艺条件进行重复验证试验,在最佳工艺条件下,6次提取所得番木瓜籽油的提取率均在34.89%~35.25%之间,平均值为35.10%,与正交试验数据相符。
2.5.1 番木瓜籽油的特性常数
按2.3确定的最佳工艺条件抽提所得番木瓜籽油测定其特性常数,结果见表5。折光指数是油脂和脂肪酸的特征之一,由于其与油脂和脂肪酸的结构存在一定的联系,故用来鉴别油脂的纯度、观测油脂的反应过程等,已广泛应用于日常的检测中[12]。油酸和亚油酸50 ℃时的折光指数分别为1.448 7和1.458 3,因此可以初步推测番木瓜籽油脂肪酸组成中含有较多的油酸。
表5 番木瓜籽油的特性常数
2.5.2 番木瓜籽油的脂肪酸组成
番木瓜籽油的脂肪酸组成测定结果如表6 所示。
表6 番木瓜籽油的脂肪酸组成/%
从表6 可以看出,番木瓜籽油的脂肪酸主要由不饱和脂肪酸组成,特别是油酸的质量分数高达72.7%。
3.1 影响番木瓜籽油提取率的主要因素是料液比,其次是超声温度和超声时间,超声功率的影响最小;正交试验确定的最佳工艺条件是:石油醚为抽提溶剂,料液比为1∶4,超声温度50 ℃,超声时间20 min,在此条件下番木瓜籽油提取率为35.1%。
3.2 番木瓜籽油的脂肪酸主要由不饱和脂肪酸组成,不饱和脂肪酸占80.7%,特别是油酸的质量分数高达72.7%,具有较高的利用价值。
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