玉郎伞提取物抗炎作用研究

曾 嵘，黄建春，陈春霞，付书婕，黄仁彬*

1广西医科大学药学院;2 广西江滨医院，南宁 530021

玉郎伞是一种尚未开发利用的民间草药，为蝶形花科植物疏叶崖豆［Millettia pulchra Kurz var.laxior (Dunn)Z.Wei］的块根，用于治疗高血压、跌打损伤、消化不良、病后虚弱等。研究表明本品具有保护心肌、保肝及抗自由基、调节免疫等作用［1-3］。本实验主要研究玉郎伞水提物及从玉郎伞中分离提取三种有效成份——黄酮、皂苷、多糖的抗炎作用。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

JA1003 型上皿电子天平(上海天平仪器厂);DH-X 型电热恒温干燥箱(上海跃进医疗器械一厂)。地塞米松磷酸钠注射液(天津药业集团新郑股份有限公司);角叉菜胶(sigma 公司);巴豆油(本实验室自制);玉郎伞水提物、黄酮、皂苷、多糖均由本课题研究小组自行提取，另文报道，并取得专利一项［4］。

1.2 动物

小鼠，20～25 g，雌雄兼用，由本校动物实验中心提供。饲养条件2 级，室温保持在22～24 ℃，相对湿度50%，光照时间7:00～17:00。试验动物生产许可证:SCXK 桂2003-0003。

2 实验方法

2.1 小鼠足跖肿胀法

参照文献方法［5］，取小鼠100 只，随机分成10组，每组10 只，雌雄各半，分别为空白组(生理盐水，10 mL/kg);阳性组(地塞米松，5 mg/kg);玉郎伞水提物、黄酮、皂苷、多糖(以上四种药物大剂量均为30 g 生药/kg，小剂量均为15 g 生药/kg)。分组后即开始灌胃给药，每天给药一次，连续7 d，末次给药后1 h 每只小鼠以0.5%角叉菜胶液(用生理盐水配制)0.1 mL 皮下注射于左后足趾部致炎。致炎5 h 后处死小鼠，剪取后双足等同部位，称重，以左右足重量之差为肿胀度(mg)，并计算用药组肿胀抑制率，评价药物对角叉菜胶所致足肿胀的影响。

2.2 小鼠耳片肿胀法

参照文献方法［6］，取小鼠100 只，随机分为10组，每组10 只，雌雄各半，分组及给药剂量同上。每天灌胃给药1 次，连续7 d，末次给药后1 h，用混合致炎液(内含2%巴豆油、20%无水乙醇、5%蒸馏水、73%乙醚)涂于小鼠左耳前后两面，每鼠50 μL，5 h 后将小鼠颈椎脱臼致死，延耳廓基线剪下两耳，用9 mm 直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，称重。以耳片肿胀度(两耳片重量之差)作为炎症指标，计算用药组肿胀抑制率，来评价药物对巴豆油所致耳廓炎症的影响。

2.3 对小鼠棉球肉芽肿形成的影响［6］

取小鼠100 只，雌雄各半。20%乌拉坦腹腔注射麻醉(0.05 mL/10g 体重)，在无菌条件下作胸部切口，将5 mg 的灭菌棉球植入右侧腋窝部皮下。术后选合格小鼠随机分为10 组，分组同上。术后第2 d，各组分别给药(i.g.)，剂量同上，每天一次，连续7 d。于第8 d 处死小鼠，剥离并取出棉球肉芽肿组织，放入90 ℃烘箱内干燥1 h 后取出精确称重，减去原棉球重量即为肉芽肿净重(mg)。以mg/10 g体重表示肉芽肿重量。

2.4 统计方法

3 实验结果

3.1 玉郎伞水提物及各成份对小鼠足跖肿胀的抑制作用

实验结果如表1、图1 所示，除黄酮、多糖低剂量组外，其余各组与空白组比较，小鼠足跖肿胀度均明显降低。说明YLS 水提物及三种成份对角交菜胶所致小鼠足跖肿胀有较好的抑制作用。

表1 玉郎伞水提物及各成份对小鼠足跖肿胀的抑制作用(，n=10)Table 1 The inhibitory effects of YLS water extract and three purified components on hind paw edema in mice(，n=10)

注:与空白组对照，* P＜0.05，＊＊P＜0.01。Note:Compare with blank，* P＜0.05，＊＊P＜0.01.

图1 玉郎伞水提物及各成份对小鼠足跖肿胀的抑制作用Fig.1 The inhibitory effects of TYLS and three purified components on hind paw edema in mice

3.2 玉郎伞水提物及各成份对耳片肿胀的抑制作用

实验结果如表2、图2 所示，除皂苷、多糖低剂量组外，其余各组与空白组比较，小鼠耳片肿胀度均明显降低。说明YLS 水提物及三种成份对巴豆油所致小鼠耳片肿胀有较好的抑制作用。

表2 玉郎伞水提物及各成份对小鼠耳片肿胀的抑制作用(，n=10)Table 2 The inhibitory effects of TYLS and three purified components on ear swelling in mice(，n=10)

表2 玉郎伞水提物及各成份对小鼠耳片肿胀的抑制作用(，n=10)Table 2 The inhibitory effects of TYLS and three purified components on ear swelling in mice(，n=10)

注:与空白组对照，* P＜0.05，＊＊P＜0.01。Note:Compare with blank，* P＜0.05，＊＊P＜0.01.

图2 玉郎伞水提物及各成份对小鼠耳片肿胀的抑制作用Fig.2 The inhibitory effects of TYLS and three purified components on ear swelling in mice

3.3 玉郎伞各成份对小鼠棉球肉芽肿形成的抑制作用

实验结果如表3、图3 所示，除水提物、皂苷低剂量组外，其余各组与空白组比较，小鼠棉球肉芽肿肿胀度均明显降低。说明YLS 水提物及三种成份对小鼠棉球肉芽肿的形成有较好的抑制作用。

4 讨论

炎症是机体组织受损伤时所发生的一系列保护性应答，以局部血管为中心，典型特征是红、肿、热、痛和功能障碍，可参与清除异物和修补组织等。巴豆油致小鼠耳片肿胀及角叉菜胶诱发小鼠足爪肿胀是常用的急性炎症模型。主要表现为局部的充血、水肿及渗出等病理反应过程，是应用最多的研究药物抗炎作用的方法之一。研究结果表明，除了YLS皂苷低剂量组及多糖低剂量组外，其余各组药物均可显著抑制小鼠耳片肿胀及足爪肿胀，表明玉郎伞水提物、黄酮、皂苷、多糖具有较强的抑制急性炎症的作用。小鼠棉球肉芽肿模型是一亚急性(慢性)炎症模型，是发展局部异物持续刺激的迟缓性变态反应，有异物的病灶内表现为肉芽肿的形成。实验结果表明，除玉郎伞水提物低剂量组及皂苷低剂量组外，其余各组药物均能显著抑制小鼠棉球肉芽肿的生长，说明玉郎伞水提物、黄酮、皂苷、多糖对慢性炎症也有较强的抑制作用。

表3 玉郎伞各成份对小鼠棉球肉芽肿形成的抑制作用(，n=10)Table 3 The inhibitory effects of TYLS and three purified components on cotton granuloma in mice

表3 玉郎伞各成份对小鼠棉球肉芽肿形成的抑制作用(，n=10)Table 3 The inhibitory effects of TYLS and three purified components on cotton granuloma in mice

注:与空白组对照，* P＜0.05，＊＊P＜0.01。Note:Compare with blank，* P＜0.05，＊＊P＜0.01.

图3 玉郎伞各成份对小鼠棉球肉芽肿形成的抑制作用Fig.3 The inhibitory effects of TYLS and three purified components on cotton granuloma in mice

1 Li JL(李健玲)，Chen ZN(陈兆霓)，Lv JH(吕纪华)，et al.Effect of saponin of Yulangsan on myocardial ischemia reperfusion injury in isolated rat hearts.Chin J Exp Tradit Med Form(中国实验方剂学杂志)，2012，18:250-253.

2 Duan XQ (段小群)，Jiao Y(焦阳)，Huang RB(黄仁彬)，et al.Effects of Yulangsan polysaccharide on proliferation and collagen I production of hepatic stellate cells.Chin J Mod Med(中国现代医学杂志)，2008，18:423-425.

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4 Huang RB.Preparation and application of Yulangsan extracts(玉郎伞提取物的制备及应用).CN200710034771.2，2007-04-16.

5 Chen Q.Research Methods in Pharmacology of Chinese Materia Medica，Vol 3(中药药理研究方法学，3 卷)Beijing:People's Publishing House，2011.353.

6 Wolfgang HV.Drug Discovery and Evalution-Pharmacological Assays(药理学实验指南-新药发现和药理学评价).Beijing:Science Publishing House，2001.535，583.