广东蛇葡萄的化学成分研究

吴新星，黄日明，徐志防*，邱声祥*

1中国科学院华南植物园，广州 510650;2 中国科学院大学，北京 100049

广东蛇葡萄［Ampelopsis cantoniensis (Hook.et Arn.)planch.］是葡萄科(Vitaceae)蛇葡萄属植物，别名粤蛇葡萄，在民间常被称作山葡萄、田浦茶、背带藤、牛牵丝、山甜茶等，主要分布在江西、湖南、广东、广西和海南等地［1］。广东蛇葡萄为民间常用药材，特别在江西、两广地区其茎叶常作为“藤茶”的主要品种［另一种为同属植物显齿蛇葡萄(A.grossedentata)］饮用，具有清热解毒、降血脂和降血压等功效［2］。

目前，国内外对广东蛇葡萄化学成分的研究鲜见报道，为进一步开发利用该植物的化学资源，作者对广东蛇葡萄的化学成分进行了研究，从其藤茎乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部共分离得到13 个化合物，分别为白藜芦醇(1)、5，7-二羟基香豆素(2)、山奈酚(3)、二氢木犀草素(4)、槲皮素(5)、二氢槲皮素(6)、没食子酸(7)、杨梅素(8)、二氢杨梅素(9)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(10)、杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷(11)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(12)、表儿茶素-3-O-没食子酸酯(13)。除杨梅素和二氢杨梅素外，其余化合物均为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

Eyela N-1100 旋转蒸发仪、Eyela SB-1100 水浴锅、Eyela Aspirator A-1000S 循环水真空泵(Tokyo Rikakai，日本);DLSB-5/20 低温冷却循环泵(郑州长城科工贸有限公司，中国);WFH-203 三用紫外分析仪(上海精科实验有限公司，中国);APCI 2000 LC-MS-MS(Applied Biosystems，美国);Bruker DRX-400、AV Ⅲ500 核磁共振仪(Bruker，瑞士)。

柱色谱硅胶(100～200 目、200～300 目，青岛海洋化工厂，中国);柱层析反相硅胶RP-18(50 μm、70 μm，J.T.Baker，美国);柱层析凝胶为Sephadex LH-20(Amersham Biosciences，瑞典);其它有机溶剂和化学药品均为国产分析纯。

植物材料采自江西赣州大余县，经中国科学院华南植物园王发国研究员鉴定为葡萄科蛇葡萄属植物广东蛇葡萄(Ampelopsis cantoniensis)，样本保存于中国科学院华南植物园天然产物化学生物学实验室。

2 提取与分离

取广东蛇葡萄藤茎12 kg，充分粉碎，用95%的乙醇室温浸泡3 次，每次约3 d，合并滤液减压浓缩至浸膏约600 g。向浸膏中加入水形成悬浊液，然后用正己烷与乙酸乙酯萃取，回收溶剂后得正己烷部16 g、乙酸乙酯部380 g 以及水部210 g。

将乙酸乙酯部380 g 进行硅胶(200～300 目)柱层析，氯仿∶甲醇(100∶0～0∶100)梯度洗脱，得到7 个组分:Fr.1～Fr.7。

Fr.3 有大量灰黄色固体析出，溶出固体重结晶得到化合物1(1250 mg)，Fr.3 再过硅胶柱色谱，用正己烷∶丙酮(9∶1～0∶10)洗脱，得到3 个亚组分Fr.3.1～Fr.3.3。组分Fr.3.2 过反相硅胶柱色谱，用甲醇∶水(3∶7～10∶0)洗脱，得到化合物2(15 mg)和3(11 mg);组分Fr.3.3 过凝胶柱色谱(Sephadex LH-20)得到化合物4(27 mg)。

Fr.4 硅胶柱层析，用二氯甲烷∶甲醇(15∶1～7∶3)梯度洗脱，得到Fr.4.1～Fr.4.4 四个亚组分。组分Fr.4.1 继续用硅胶柱色谱纯化得到化合物5(13 mg);组分Fr.4.2 过Sephadex LH-20 得到化合物6(10 mg);组分Fr.4.3 过硅胶柱色谱，用二氯甲烷∶甲醇(18∶1)洗脱得到化合物7(2200 mg);组分Fr.4.4 用硅胶柱色谱纯化后过Sephadex LH-20 得到化合物8(12 mg)和9(13 mg)。

组分Fr.5 过硅胶柱色谱用二氯甲烷∶甲醇(9∶1～1∶1)梯度洗脱，得到亚组分Fr.5.1、Fr.5.2 和Fr.5.3。组分Fr.5.2 过硅胶柱色谱，用氯仿∶甲醇(8∶1～6∶1)梯度洗脱，得到亚组分Fr.5.2.1 和Fr.5.2.2;组分Fr.5.2.1 过Sephadex LH-20 得到化合物10(51 mg)和12(10 mg);组分Fr.5.2.2 重结晶得到化合物11(334 mg)。

组分Fr.5.3 过硅胶柱色谱重结晶得到化合物13(8 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 白色粉末;ESI-MS m/z:227(［MH］-);1H NMR(C3D6O，400 MHz)δ:7.44(2H，d，J=8.0 Hz，H-2'，H-6')，7.05(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，6.92(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，6.87(2H，d，J=8.0 Hz，H-3'，H-5')，6.61(2H，d，J=2.0 Hz，H-2，H-6)，6.34(1H，t，J=2.0 Hz，H-4);13C NMR(C3D6O，100 MHz)δ:159.6(C-3，C-5)，158.2(C-4')，140.8(C-1)，129.9(C-1')，129.0(C-8)，128.7(C-2'，C-6')，126.8(C-7)，116.3(C-3'，C-5')，105.6(C-2，C-6)，102.6(C-4)。以上数据与文献［3］报道一致，故鉴定化合物1 为白藜芦醇。

化合物2 白色粉末;ESI-MS m/z:177(［MH］-);1H NMR(C3D6O，400 MHz)δ:8.02(1H，d，J=9.6 Hz，H-4)，6.36(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.28(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.05(1H，d，J=9.6 Hz，H-3);13C NMR(C3D6O，100 MHz)δ:163.0(C-2)，161.7(C-7)，157.7(C-8a)，156.8(C-5)，140.0(C-4)，109.9(C-3)，102.9(C-6)，99.0(C-4a)，95.1(C-8)。以上数据与文献［4］报道一致，故鉴定化合物2 为5，7-二羟基香豆素。

化合物3 黄色粉末;ESI-MS m/z:285(［MH］-);1H NMR(C3D6O，400 MHz)δ:8.18(2H，d，J=8.0 Hz，H-2'，H-6')，7.02(2H，d，J=8.0 Hz，H-3'，H-5')，6.55(1H，s，H-8)，6.28(1H，s，H-6);13C NMR(C3D6O，100 MHz)δ:176.7(C-4)，165.0(C-7)，162.2(C-5)，160.2(C-9)，157.7(C-4')，147.0(C-2)，132.9(C-3)，130.4(C-2'，C-6')，123.3(C-1')，116.2(C-3'，C-5')，104.1(C-10)，99.1(C-6)，94.4(C-8)。以上数据与文献［5］报道一致，故鉴定化合物3 为山奈酚。

化合物4 黄色粉末;ESI-MS m/z:287(［MH］-);1H NMR(C3D6O，400 MHz)δ:7.00(1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，6.85(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，6.82(1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6')，5.93(2H，s，H-6，H-8)，5.33(1H，dd，J=4.0，12.0 Hz，H-2)，3.12(1H，dd，J=12.0，16.0 Hz，H-3)，2.90(1H，dd，J=4.0，16.0 Hz，H-3);13C NMR(C3D6O，100 MHz)δ:197.2(C-4)，167.8(C-7)，164.9(C-5)，164.1(C-9)，146.4(C-4')，146.0(C-3')，131.0(C-1')，118.9 (C-6')，115.9 (C-5')，114.5 (C-2')，102.8(C-10)，96.7(C-6)，95.8(C-8)，79.8(C-2)，43.2(C-3)。以上数据与文献［4］报道一致，故鉴定化合物4 为二氢木犀草素。

化合物5 黄色针状晶体;ESI-MS m/z:301(［M-H］-);1H NMR(C3D6O，400 MHz)δ:7.84(1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，7.71(1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6')，7.00(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，6.54(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.27(1H，d，J=2.0 Hz，H-6);13C NMR(C3D6O，100 MHz)δ:176.4(C-4)，164.9(C-7)，162.0(C-5)，157.7(C-9)，148.2(C-2)，146.8(C-4')，145.7(C-3')，136.6(C-3)，123.7(C-1')，121.4(C-6')，116.1(C-5')，115.6(C-2')，104.0(C-10)，99.0(C-6)，94.4(C-8)。以上数据与文献［6］报道一致，故鉴定化合物5 为槲皮素。

化合物6 黄色粉末;ESI-MS m/z:303(［MH］-);1H NMR(C3D6O，400 MHZ)δ:7.07(1H，d，J=2.0，H-2')，6.90(1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6')，6.86(1H，d，J=8.0 Hz，H-5')，5.99(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，5.94(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.01(1H，d，J=12.0 Hz，H-3)，4.61(1H，d，J=12.0 Hz，H-2);13C NMR(C3D6O，100 MHz)δ:198.1(C-4)，168.0(C-7)，164.9(C-5)，164.0(C-9)，146.6(C-4')，145.8(C-3')，129.6(C-1')，120.6(C-6')，115.7(C-5')，115.6(C-2')，101.3(C-10)，97.0(C-6)，96.0(C-8)，84.4(C-2)，73.0(C-3)。以上数据与文献［7］报道一致，故鉴定化学物6 为二氢槲皮素。

化合物7 无色针状结晶;ESI-MS m/z:169(［M-H］-);1H NMR(C3D6O，400 MHz)δ:7.17(2H，s，H-2，H-6);13C NMR(C3D6O，100 MHz)δ:169.2(-COOH)，145.7(C-3，C-5)，138.8(C-4)，121.4(C-1)，110.1(C-2，C-6)。以上数据与文献［6］报道一致，故鉴定化合物7 为没食子酸。

化合物8 黄色粉末;ESI-MS m/z:317(［MH］-);1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.36(2H，s，H-2'，H-6')，6.39(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=2.0 Hz，H-6);13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:176.4(C-4)，165.0(C-7)，162.1(C-5)，157.6(C-9)，146.9(C-2)，146.2(C-3'，C-5')，135.9(C-3)，135.5(C-4')，121.7(C-1')，107.1(C-2'，C-6')，103.1(C-10)，97.8(C-6)，92.9(C-8)。以上数据与文献［8］报道一致，故鉴定化合物8 为杨梅素。

化合物9 淡黄色粉末;ESI-MS m/z:319(［MH］-);1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:6.57(2H，s，H-2'，H-6')，5.95(1H，d，J=2.1 Hz，H-8)，5.90(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，4.85(1H，d，J=11.4 Hz，H-3)，4.49(1H，d，J=11.4 Hz，H-2);13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:196.9(C-4)，167.3(C-7)，163.8(C-5)，163.0(C-9)，145.5(C-3'，C-5')，133.5(C-4')，127.7(C-1')，106.8(C-2'，C-6')，100.4(C-10)，96.0(C-6)，94.9(C-8)，83.8(C-2)，72.3(C-3)。以上数据与文献［8］报道一致，故鉴定化合物9为二氢杨梅素。

化合物10 黄色粉末;ESI-MS m/z:447(［MH］-);1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.34(1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，7.29(1H，dd，J=8.3，2.1 Hz，H-6')，6.92(1H，d，J=8.3 Hz，H-5')，6.30(1H，d，J=1.9 Hz，H-8)，6.15(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.37(1H，d，J=1.5 Hz，H-1'')，4.29(1H，dd，J=3.3，1.5 Hz，H-2'')，3.82(dd，J=9.3，3.3 Hz，H-3'')，3.48～3.43(1H，m，H-5'')，3.43～3.38(1H，m，H-4'')，0.97(3H，d，J=8.0 Hz，H-6'');13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:178.1(C-4)，164.2(C-7)，161.6(C-5)，157.8(C-9)，157.0(C-2)，148.2(C-4')，144.8(C-3')，134.8(C-3)，121.7(C-1')，121.6(C-6')，115.7(C-5')，115.0(C-2')，104.5(C-10)，102.1(C-1'')，98.5(C-6)，93.5(C-8)，71.9(C-4'')，70.8(C-3'')，70.6(C-2'')，70.5(C-5'')，16.3(C-6'')。以上数据与文献［9］报道一致，故鉴定化合物10 为槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物11 黄色粉末;ESI-MS m/z:463(［MH］-);1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:6.97(2H，s，H-2'，H-6')，6.39(1H，d，J=2.1 Hz，H-8)，6.23(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，5.33(1H，d，J=1.7 Hz，H-1'')，4.24(1H，dd，J=3.3，1.7 Hz，H-2'')，3.81(1H，dd，J=9.5，3.3 Hz，H-3'')，3.54(1H，dq，J=9.5，6.3 Hz，H-5'')，3.33(1H，m，H-4'')，0.97(3H，d，J=8.0 Hz，H-6'');13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:178.3(C-4)，164.4(C-7)，161.8(C-5)，158.1(C-9)，157.1(C-2)，145.4(C-3'，5')，136.5(C-4')，135.0(C-3)，120.5(C-1')，108.2(C-2'，6')，104.5(C-10)，102.2(C-1'')，98.4(C-6)，93.3(C-8)，71.9(C-4'')，70.7(C-3'')，70.6(C-2'')，70.4(C-5'')，16.3(C-6'')。以上数据与文献［10］报道一致，故鉴定化合物11 为杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物12 黄色粉末;ESI-MS m/z:431(［MH］-);1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.77(2H，d，J=8.7 Hz，H-2'，6')，6.95(2H，d，J=8.7 Hz，H-3'，H-5')，6.37(1H，d，J=1.3 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=1.3Hz，H-6)，5.39(1H，d，J=1.5 Hz，H-1'')，4.25(1H，dd，J=3.1，1.6 Hz，H-2'')，3.75(1H，m，H-3'')，3.35(1H，m，H-5'')，3.33(1H，m，H-4'')，0.94(3H，d，J=6.3Hz，H-6'');13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:178.2(C-4)，164.4(C-7)，161.8(C-5)，160.1(C-9)，157.9(C-4')，157.1(C-2)，134.9(C-3)，130.6(C-2'，6')，121.3(C-1')，115.3(C-3'，5')，104.5(C-10)，102.1(C-1'')，98.5(C-6)，93.4(C-8)，71.8(C-4'')，70.7(C-3'')，70.6(C-2'')，70.4(C-5'')，16.3(C-6'')。以上数据与文献［11］报道一致，故鉴定化合物12 为山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物13 白色粉末;ESI-MS m/z:441(［MH］-);1H NMR(CD3OD，500 MHz)δ:6.97(2H，s，H-2''，H-6'')，6.95(1H，d，J=2.1 Hz，H-2')，6.83(1H，dd，J=8.3，2.1 Hz，H-6')，6.72(1H，d，J=8.3 Hz，H-5')，5.99(1H，d，J=2.3 Hz，H-6)，5.98(1H，d，J=2.3 Hz，H-8)，5.55(1H，m，H-3)，5.05(1H，s，H-2)，3.02(1H，dd，J=17.3，4.6 Hz，H-4a)，2.87(1H，dd，J=17.3，2.2 Hz，H-4b);13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:166.2(C=O)，156.5(C-9)，156.5(C-5)，155.9(C-7)，144.9(C-3''，5'')，144.6(C-3')，144.5(C-4')，138.4(C-4'')，130.1(C-1')，120.1(C-1'')，118.0(C-6')，114.6(C-5')，113.7(C-2')，108.8(C-2''，6'')，98.0(C-10)，95.1(C-8)，94.5(C-6)，77.3(C-2)，68.6(C-3)，25.5(C-4)。以上数据与文献［12］报道一致，故鉴定化合物13 为表儿茶素-3-O-没食子酸酯。

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