α-羟丁酸脱氢酶检测对非霍奇金淋巴瘤诊断及预后的意义*

杨海平 陈 琳 魏旭东 米瑞华 尹青松 杜建伟

非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin's lymphoma,NHL）是起源于淋巴组织的一类恶性增殖性疾病。乳酸脱氢酶（LDH）是一种糖酵解酶，广泛存在于人体组织内。β2-微球蛋白（β2-MG）是细胞组织相容性抗原的一部分，主要由淋巴细胞合成。人们发现在NHL患者血清中LDH与β2-MG水平升高并于1993年将LDH作为独立预后因素，将血清LDH水平纳入NHL国际预后指数模型。α-羟丁酸脱氢酶（α-HBDH）是LDH的同功酶，已经发现在急性白血病［1］、多发性骨髓瘤［2］等恶性血液疾病中升高。但NHL中α-HBDH的相关研究国内外鲜见报道。本文回顾性分析了2011年11月至2012年10月本院诊治的104例NHL患者血清α-HBDH情况，报道如下。

1 材料与方法

1.1 病例

选择郑州大学附属肿瘤医院血液科2011年11月至2012年10月收治的104例NHL患者，所有患者均经病理组织学确诊，采用CT、彩超、PET-CT等辅助检查以明确分期，骨髓细胞学检查以明确是否有骨髓累及，病理分型按世界卫生组织淋巴组织肿瘤分类，临床分期采用Ann Arbor分期系统。入组患者分别按年龄（＞60岁、≤60岁）、性别、疾病分期（Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ/Ⅳ期）和病理类型（惰性、侵袭性）进行分组，患者中DLBCL36例，MCL12例，FL13例，NK/T28例，其他病理类型15例（表1）。因心功能异常时α-HBDH亦会升高，故同时检测患者肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）以观察心功能，排除CK及CK-MB异常及肝肾功能异常的患者。患者化疗2～3个周期后检测上述指标以评估LDH、α-HBDH及β2-MG随着肿瘤负荷下降而变化的趋势。15例患者采用R-CHOP方案化疗，其余患者均采用CHOP方案化疗。正常对照标本80例来自本院健康体检者，排除肿瘤、心肺肝肾功能异常等可能引起LDH、α-HBDH异常的疾病，未检测血清β2-MG水平，只进行血清α-HBDH、LDH比较。

1.2 检测方法

采集标本前经过患者知情同意，于入院后次日空腹采集静脉血3 mL，不抗凝，1 h内送检。将标本离心后取血清，血清采用罗氏P800全自动生化分析仪检测α-HBDH、LDH、β2-MG。操作方法详见操作手册。正常参考范围α-HBDH为72～182 U/L，LDH为109～245 U/L，β2-MG为0.8～2.2 mg/L。

1.3 统计学分析

数据统计使用SPSS 18.0软件，治疗前后的观察指标值（血清LDH、α-HBDH及β2-MG水平）与正常人指标值的比较采用两独立样本的t检验。治疗前后的观察指标值比较采用配对资料的t检验。Ⅰ/Ⅱ期与Ⅲ/Ⅳ期的观察指标升高阳性率的比较采用χ2检验。相关性分析采用秩相关进行检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 α-HBDH与疾病分期、肿瘤恶性程度的关系

所有NHL患者检测血清α-HBDH水平，34.6%（36/104）的患者血清α-HBDH升高，Ⅲ/Ⅳ期患者升高比例为39.1%（25/64），明显高于Ⅰ/Ⅱ期患者升高比例 17.5%（7/40）；Ⅲ/Ⅳ期组α-HBDH 绝对值为（222.73±125.03）U/L，明显高于 I/II期组（172.24±104.13）U/L。侵袭性淋巴瘤患者中α-HBDH升高比例35.5%（27/76）亦高于惰性淋巴瘤患者32.1%（9/28）；侵袭性淋巴瘤患者血清α-HBDH绝对值为（205.98±114.00）U/L，亦明显高于惰性淋巴瘤患者该值（153.51±40.11）U/L。但在不同年龄及性别的患者中，HBDH升高率及血清绝对值无明显差异（表2）。

2.2 NHL患者与健康人群血清α-HBDH水平的比较

正常对照的血清α-HBDH均在正常范围内，均值为（120.06±15.11）U/L。淋巴瘤患者α-HBDH明显升高为（323.62±114.74）U/L，化疗2～3个疗程后表达水平下降，为（155.92±35.70）U/L，但仍高于正常对照组，三者之间有有统计学差异（表3）。

表1 患者资料Table 1 Basic characteristics of patients with NHL

表2 患者血清α-HBDH、LDH及β2-MG水平比较 （±s）Table 2 Comparison of serum α-HBDH,LDH,and β2-MG levels of patients with NHL （±s）

表2 患者血清α-HBDH、LDH及β2-MG水平比较 （±s）Table 2 Comparison of serum α-HBDH,LDH,and β2-MG levels of patients with NHL （±s）

FactorsⅠ/Ⅱ stageⅢ/Ⅳ stage P Indolent Aggressive P＞60 years old≤60 years old P Male Female P HBDH（U/L）172.24±104.13 222.73±125.03 0.036 153.51±40.11 205.98±114.00 0.047 176.52±71.54 211.11±126.97 0.549 207.93±124.24 179.63±82.24 0.449 LDH（U/L）240.11±149.27 298.04±145.60 0.230 212.93±68.07 287.59±160.05 0.024 249.29±105.98 287.83±207.94 0.685 286.98±163.29 247.75±110.63 0.453 β2-MG（mg/L）2.66±1.13 3.47±1.65 0.005 2.77±1.18 3.05±1.44 0.185 4.24±2.09 2.58±0.80＜0.001 3.36±1.80 2.71±0.85 0.292

2.3 血清α-HBDH、LDH、β2-MG水平与缓解率

36例血清α-HBDH值升高的NHL患者中，获得缓解和部分缓解的共有24例，总有效率为66.7%，α-HBDH正常的患者的总有效率为85.3%（58/68）（P=0.02，表1，图1）。

LDH结果与α-HBDH类似，35.6%（37/104）的NHL患者LDH升高，除不同分期之间未发现显著性差异之外（P=0.23），余统计学处理结果与α-HBDH高度一致，即与病症恶性程度呈正相关，与年龄及性别无关（表1、2，图2）。

59.6%（62/104）患者血清β2-MG升高，Ⅲ/Ⅳ期患者升高比例高于Ⅰ/Ⅱ期患者，其血清绝对值在不同分期之间差异明显（P=0.005），但其绝对值在不同病理类型组之间无显著性差异（P=0.185），患者化疗2～3个周期后，β2-MG水平下降但化疗前后无统计学差异（P=0.153，图3）。

对α-HBDH与LDH、β2-MG进行相关性分析，均具有明显相关性：α-HBDH和LDH：rs=0.945，P＜0.001；HBDH和β2-MG：rs=0.347，P=0.001。

表3 LDH、α-HBDH及β2-MG治疗前后指标比较 （±s）Table 3 Comparison of indices before and after LDH,α-HBDH,and β2-MG treatment （±s）

表3 LDH、α-HBDH及β2-MG治疗前后指标比较 （±s）Table 3 Comparison of indices before and after LDH,α-HBDH,and β2-MG treatment （±s）

a：Before treatment group compared to normal controls；b：After treatment group compared to normal controls；c：Comparison before and after treatment

Group Before treatment After treatment Control β2-MG（mg/L）4.47±4.41 2.70±1.21 Pa Pb Pc LDH（U/L）425.59±137.04 216.00±41.92 147.39±17.60＜0.001＜0.001＜0.001 α-HBDH（U/L）323.62±114.74 155.92±35.70 120.06±15.11＜0.001＜0.001＜0.001——0.153

图2 患者治疗前后及正常人血清LDH水平比较Figure 2 Comparison of serum LDH before and after treatment

图1 患者治疗前后及正常人血清α-HBDH水平比较Figure 1 Comparison of serum α-HBDH before and after treatment

图3 患者治疗前后及正常人血清β2-MG水平比较Figure 3 Comparison of serum β2-MG before and after treatment

3 讨论

α-HBDH可以催化α-酮丁酸为α-羟丁酸，它是含H基团的LDH1和LDH2的总称，实际反映的是体内LDH1和LDH2的总体水平，文献报导在白血病［1］、多发骨髓瘤［2］以及贫血性疾病［3］中都存在α-HBDH增高。LDH在机体内存在5种同工酶：LDH1，LDH2，LDH3，LDH4，LDH5。其中淋巴组织中主要是LDH3。在肿瘤组织中LDH释放增加［4］，Dumontet等［5］指出，NHL患者中，LDH3升高最具有特异性，而LDH2升高最常见。在总LDH升高的NHL患者中，不仅LDH2升高人数较其他亚型多，LDH2/总LDH比值改变更为明显，而LDH1/总LDH、LDH3/总LDH与正常对照相比改变较小。LDH的5种同工酶中，LDH4和LDH5的活性很弱，其余三种同工酶活性依次是LDH2＞LDH1＞LDH3，因人体差异，有的人酶活性依次为LDH2＞LDH3＞LDH1，LDH2和LDH3均与较短的总体生存率及无病生存率相关，LDH1主要存在于心肌、肾脏中。在LDH2升高的患者中，当心功能正常即CK和CK-MB正常时，α-HBDH升高主要反映LDH2的改变，α-HBDH或许更能直接反映患者的肿瘤负荷并推断预后。

非霍奇金淋巴瘤是一组源于淋巴组织的恶性肿瘤，具有高度异质性，不同分期和病理类型之间预后差别较大。研究证实，LDH和β2-微球蛋白（β2-MG）是反映非霍奇金淋巴瘤肿瘤负荷和判断预后的重要指标。LDH影响淋巴瘤患者的总生存［6-7］，NHL的β2-MG水平升高，其升高机制多样［8］，其水平与疾病程度及进展相关［9-11］。本组资料显示NHL患者与正常人的β2-MG含量具有明显差异，在Ⅲ/Ⅳ期患者升高例数明显高于Ⅰ/Ⅱ期患者例数，两组在升高的程度上亦具有明显差异，侵袭性淋巴瘤患者血清β2-MG水平亦较惰性淋巴瘤患者高，这与之前的报导［12］相符。而且在Ⅰ/Ⅱ期患者中，β2-MG升高的比例明显高于LDH及α-HBDH，可能β2-MG在早期诊断上的意义较LDH及α-HBDH更明显。另外β2-MG升高的NHL患者治疗前与治疗2～3疗程后β2-MG水平无明显变化（P＞0.05），这与报道［13］相符。

本组资料所有NHL患者中，α-HBDH和LDH进行回归分析显示二者具有明显相关性，在Ⅲ/Ⅳ期与Ⅰ/Ⅱ期患者比较中，LDH水平差异无统计学意义，其原因可能是因为：Ⅲ/Ⅳ期患者中年轻患者比例较Ⅰ/Ⅱ期患者高，减弱了分期对于血清指标水平的比较意义，但即便如此，α-HBDH在两组之间的差异仍具有显著意义。文献［14］报导LDH2和LDH3在晚期淋巴瘤和侵袭性淋巴瘤出现频率最高，本组资料亦显示惰性与侵袭性NHL的患者间的血清α-HBDH及LDH均具有明显的差异。本组资料将NHL患者的α-HBDH水平同LDH、β2-MG进行关联性分析，发现他们有明显的正相关，LDH已经是国际公认的NHL预后指标，α-HBDH亦能较好的反应NHL患者的病情程度和预后［15］，在α-HBDH正常表达的患者中其有治疗效率明显高于α-HBDH高表达的患者。患者治疗前后的血清α-HBDH及LDH水平下降，具有显著性差异，但是化疗2到3个疗程的患者与正常人比较仍具有显著性差异，可能是因为化疗后患者虽有缓解，但体内仍存在一定的肿瘤负荷。α-HBDH在NHL患者中的表达同LDH和β2-MG呈正相关，有可能成为反应患者肿瘤负荷的新指标，并协助判断预后。

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