两种猪口蹄疫O型疫苗应用效果对比试验

黄志坚 福建省三明市动物疫病预防控制中心 365000

口蹄疫（foot and mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）所致的偶蹄动物共患的急性、热性、高度接触性传染病。临床上以口腔黏膜、蹄部及乳房皮肤发生水疱和溃烂为主要特征。该病具有流行快、传播广、发病急、危害大等流行病学特点。世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类家畜传染病之首。自1514年FMD首次报道以来，世界各地均有暴发流行，对家畜养殖业的发展造成严重威胁［1-2］。在我国，防治猪O型FMD主要采用疫苗免疫与扑杀等综合性防治措施相结合的方法，收到了较明显的效果，但由于传统的灭活疫苗质量参差不齐，干扰因素多，免疫效果不理想，对野毒与疫苗产生的抗体鉴别困难，且应激反应强烈，甚至造成死亡等情况，给广大养殖户带来巨大损失，故使研究安全、高效的新型口蹄疫疫苗成为研究热点。猪口蹄疫O型合成肽疫苗是采用固相多肽合成技术制作而成，具有良好的免疫原性和安全性，是近年来主要推广的新型猪口蹄疫疫苗。

2012年，三明市引进猪口蹄疫O型合成肽疫苗并在全市范围内推广，为了解掌握其临床应用效果，为制定科学的免疫程序提供可靠依据。应用猪口蹄疫O型合成肽疫苗、猪口蹄疫O型灭活疫苗进行免疫效果对比试验。通过观察免疫后临床反应和检测免疫后21 d、28 d后的抗体效价水平，对两种疫苗临床应用效果进行比较。现将试验报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 从某规模养猪场选用品种、来源相同的50日龄左右的同一批体质健康仔猪200头。

1.1.2 疫苗 猪口蹄疫O型灭活疫苗和猪口蹄疫O型合成肽疫苗均采购于同一家疫苗生产企业。

1.1.3 试剂盒 猪O型口蹄疫VPl抗体检测试剂盒，上海优耐特生物医药有限公司生产，批号：201209019；口蹄疫O型正向间接血凝试验诊断液，中国农业科学院兰州兽医研究所生产，批号：121017。

1.2 方法

1.2.1 分组 200头猪随机分为2组（A组和B组），每组100头。A组接种猪口蹄疫O型灭活疫苗；B组接种猪口蹄疫O型合成肽疫苗。

1.2.2 免疫剂量 按照说明书的免疫剂量对试验猪只进行免疫接种。口蹄疫O型灭活疫苗，每头仔猪2 mL；口蹄疫O型合成肽疫苗，每头仔猪1mL。

1.2.3 样品采集 疫苗免疫前采血检测母源抗体；免疫后分别于21 d、28 d采血检测。

1.2.4 检测方法 母源抗体和灭活疫苗的抗体使用猪口蹄疫O型正向间接血凝试验检测；免疫合成肽疫苗的抗体使用VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒进行检测。

1.2.5 判定标准 正向间接血凝试验，抗体效价≥25判定为免疫合格；VP1结构蛋白抗体ELISA，抗体效价≥25判定为免疫合格。

2 结果

2.1 免疫应激反应观察结果 对免疫接种的200头生猪进行观察和登记，第1 d每4 h观察1次，第2 d每8 h观察1次，第3 d每12 h观察1次，结果A组中有5头试验猪出现轻度应激反应，主要表现为体温升高0.5～1℃，减食1～2 d，个别猪只注射部位肿胀，观察期内未发生死亡；B组未发现任何不良应激反应。

2.2 母源抗体正向间接血凝试验检测结果 在进行疫苗免疫前用正向间接血凝试验对200头试验猪进行母源抗体检测，其抗体效价均＜25。

2.3 免疫21 d后抗体检测结果 由表1可见，免疫21 d后对A组和B组试验猪进行抗体水平检测，抗体效价合格的有133份，平均免疫合格率为66.5%。其中A组100份血清有45份的抗体效价≥25，免疫合格率为45%；B组100份血清有88份血清的抗体效价≥25，免疫合格率为88%。

表1 免疫21 d后试验组抗体检测结果

2.4 免疫28 d后抗体检测结果 由表2可见，免疫28 d后对A组和B组试验猪进行抗体水平检测，抗体效价合格的有155份，平均免疫合格率为77.5%。其中A组100份血清有62份的抗体效价≥25，免疫合格率为62%；B组100份血清有93份血清的抗体效价≥25，免疫合格率为93%。

表2 免疫28 d后试验组抗体检测结果

3 讨 论

1）从检测结果来看，A组和B组的试验结果存在较为明显的差异。A组免疫21 d后抗体平均合格率仅为45%，免疫28 d后上升至62%，虽然抗体上升的幅度较大，但仍低于农业部规定的抗体合格率高于70%的要求，说明口蹄疫灭活疫苗在临床上一次免疫效果偏差，达不到国家规定的标准范围；B组免疫21 d后抗体平均合格率为88%，比A组高出43个百分点，免疫28 d后上升至93%，比A组高出31个百分点，说明合成肽疫苗一次免疫效果良好，且在免疫21 d后其抗体合格率就达到了峰值。由此可见，免疫接种疫苗21 d和28 d后，免疫口蹄疫合成肽疫苗的合格率都高于传统的灭活疫苗的合格率，从而表现出口蹄疫合成肽疫苗良好的免疫原性。

2）从疫苗免疫后临床应激反应的观察来看，接种合成肽疫苗的猪只在观察期内精神状态良好，各项生理指标正常，未出现体温升高、食欲下降、呼吸困难等不良反应，而接种灭活疫苗的猪只在观察期24 h内，先后有5头出现轻度应激反应，主要表现为焦躁不安、呼吸加快、肌肉震颤、口吐白沫等，在注射肾上腺素后逐渐恢复正常。临床上出现应激反应主要是由于灭活疫苗中含有大量异体蛋白，对致敏因子引起变态反应，而合成肽疫苗采用人工多肽合成技术，是一种单一抗原，不存在异体蛋白，能有效避免异体蛋白引起不良应激反应。由该次试验临床观察来看，口蹄疫合成肽疫苗具有良好的生物安全性，不易产生过敏反应。这与朱玉华等［3］关于合成肽疫苗安全、稳定及副反应小等特点的报道相一致。

3）由于某些原因，该次试验未对两种疫苗二次免疫的效果进行比较，但从该次试验结果表明，猪口蹄疫O型合成肽疫苗比传统的灭活疫苗更快诱导机体产生特异性抗体，且抗体维持时间也较长。这与周静华等［4］应用合成肽苗首免后4周抗体合格率已达到80%以上的结果基本一致，说明该疫苗高效、安全、副反应小，是目前预防猪O型口蹄疫的理想疫苗。

［1］ 白文彬，于康震.动物传染病诊断学［M］.北京：中国农业出版社，2002：543-549.

［2］ 李国平.规模猪场传染病诊断与防治［M］.北京：中国农业科技出版社，2001：85-90.

［3］ 朱玉华，陈亮.生猪注射口蹄疫灭活苗引起免疫应激的防治［J］.安徽农学通报，2007，13（18）：223.

［4］ 周静华，李巧根，张晓东，等.猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果实验［J］.上海畜牧兽医通讯，2009（2）：56.