用气相色谱质谱联用技术分析鼻窦炎口服液中正己烷萃取物

★ 刘明颖 马晋芳 罗国安 葛发欢 (.江西中医学院 南昌0004;.广州中大南沙科技创新产业园有限公司 广州5458;.清华大学 北京00084;4.中山大学 广州5075)

1 引言

鼻窦炎口服液由辛夷、荆芥、薄荷、桔梗、竹叶柴胡、苍耳子、白芷等14 味中药组成，具有疏风清热、祛湿通窍的功效。鼻窦炎口服液由辛夷、荆芥、薄荷、竹叶柴胡4 味药材通过水蒸气蒸馏提取芳香水，此4 味药材蒸馏后的药渣再与其余10 味药材煎煮，然后将芳香水与煎煮液混合得到［1］。辛夷为鼻炎要药，辛夷挥发油［2－4］具有抗炎、抗过敏、抗组胺、抗菌和抗病毒作用;薄荷具有抗炎［5］、抗过敏、抗组胺和抗菌［6］的作用;荆芥有解热镇痛和抗炎抗菌［7］的作用，荆芥挥发油中具有抗流感病毒［8］作用。鼻窦炎口服液对慢性鼻窦炎［9］、慢性副鼻窦炎［10］具有明显的疗效。目前，尚未有鼻窦炎口服液的挥发性成分的研究报道，本方的主药辛夷、荆芥、苍耳子、竹叶柴胡［11］为芳香通窍之药，主要药效成为挥发性成分，本文应用气质联用技术对其挥发性成分进行定性鉴别，为鼻窦炎口服液的质量控制和药理作用机制的研究提供了基础。

2 仪器与试药

仪器:Trace 1300 － ISQ 气相色谱质谱联用仪(美国Thermo Fisher Scientific 公司)，Hettich Mikro22R 离心机(德国Hettich 公司)，Milli －Q 超纯水系统(美国Millipore 公司)。

试剂:正己烷(色谱纯，美国Fisher 公司，批号601037000)，无水硫酸钠(分析纯，国药集团化学试剂有限公司，批号20120820)，超纯水(自制)。

样品:鼻窦炎口服液，批号10120102，太极集团重庆桐君阁药厂有限公司。

3 方法与结果

3.1 气相色谱条件

VF － 5ms 毛 细 管 柱(30m × 0. 25mm × 0.25μm);载气为氦气，流速1.0mL/分，分流进样，分流比为10:1;进样口温度为250 ℃;检测器温度为280 ℃;程序升温:起始温度为50 ℃，以2℃/分升温至120 ℃，再以5 ℃/分升温至200 ℃，再以10 ℃/分升温至280 ℃，保持3 分钟。进样量1μL。

3.2 质谱条件

电子轰击离子源，电子能量70eV，离子源温度220 ℃，传输线温度280 ℃，溶剂延迟时间3 分钟，扫描范围40 －650m/z。

3.3 供试品溶液的制备

精密移取鼻窦炎口服液20mL，置气相涡旋瓶中，精密加入1mL 正己烷，涡旋5 分钟，于4 ℃5 000 rpm 离心10 分钟，取有机层，加入适量无水硫酸钠除水，即得。

3.4 分析结果

将上述供试品溶液注入气质联用仪，得到总离子流图(见图1)，与NIST2008 质谱数据库进行检索，应用峰面积归一化法测得各成分的相对百分含量，结果见表1。

图1 鼻窦炎口服液正己烷提取物总离子流图

表1 鼻窦炎口服液正己烷提取物成分分析

初步共鉴定出56 个成分，其中L－薄荷醇、桉叶油醇、3 －甲基环己酮、水合莰烯、胡薄荷酮、α －萜品醇、薄荷酮等7 种含量较高，约占总成分含量的80%。

4 讨论

4.1 提取溶剂的选择

本文对乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、石油醚等4 种有机溶剂进行考察，比较溶剂对鼻窦炎口服液萃取成分信息量的影响。得到正己烷萃取得到的图谱信息量最大，能最大程度地表征鼻窦炎口服液中挥发性成分，因此选择正己烷为提取溶剂。

4.2 提取方法的选择

本文选择水蒸气蒸馏法、超声法和萃取法3 种提取方式进行考察，比较提取方式对鼻窦炎口服液萃取成分信息量的影响。超声法得到的信息量最小，萃取法与水蒸气蒸馏法相当，萃取法较水蒸气蒸馏法操作简便、易于重复，因此选择萃取法作为样品的提取方法。

4.3 载气流速的选择

分别对不同载气流速0.5 mL/分、0.8 mL/分、1.0 mL/分和1.2 mL/分进行色谱分析，考察不同载气流速对各色谱峰色谱行为的影响。随着载气流速的增加，各色谱峰的保留时间变短，分离度增大;但是当流速增大到1.2 mL/分时，部分色谱峰分离度降低，无法达到完全分离，因此选择载气流速为1.0 mL/分。

本文共检测到66 个主要色谱峰，通过数据库匹配，初步鉴定出了56 个成分，其中43 个化合物为萜类化合物，有30 个化合物为单萜;2 个香豆素类化合物;11 个烷烃类化合物;1 个脂肪族化合物，另外10 个化合物结构未知，需要进一步的研究。经过文献调研可知，结构鉴定中两个含量较高的成分胡薄荷酮和薄荷酮［8］来源于荆芥和薄荷药材，具有抗流感病毒的作用。目前鼻窦炎口服液的质量控制指标成分主要为水溶性成分栀子苷［1］、木兰脂素［13］、黄芩苷［14］，此3 种指标成分不能全面地反映鼻窦炎口服液的质量。为了更加全面有效的对鼻窦炎口服液进行质量控制，需要对该方中挥发油成分药材归属和有效成分含量进行进一步的研究。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］. 一部. 北京:中国医药科技出版社，2010:1 212 －1 213.

［2］Bajpai VK，Yoon JI，Kang SC.Antioxidant and antidermatophytic activities of essential oil and extracts of Magnolia liliflora Desr［J］.Food and chemical toxicology，2009，47(10):2 606 －2 612.

［3］Bajpai V K，Kang SC.In Vitro and in vivo inhibition of plant pathogenic fungi by essential oil and extracts of Magnolia liliflora Desr［J］.Journal of agricultural science and technology，2012，14(4):845 －856.

［4］管政.辛夷挥发油抗变应性鼻炎的药理研究［D］.浙江中医药大学，2011.

［5］陈光亮，姚道云，汪远金，等.薄荷油药理作用和急性毒性的研究［J］.中药药理与临床，2001，17(1):10 －12.

［6］Edris AE，Farrag ES.Antifungal activity of peppermint and sweet basil essential oils and their major aroma constituents on some plant pathogenic fungi from the vapor phase［J］. Nahrung，2003，47(2):117 －121.

［7］Yue GL，Chan CL，Kwok HF. Screening for anti －inflammatory and bronchorelaxant activities of 12 commonly used chinese herbal medicines［J］.Phytotherapy research，2012，26(6):915 －925.

［8］汤奇，杨发龙，曾南，等.荆芥挥发油及其主要成分抗流感病毒作用研究［J］.中药药理与临床，2008，28(2):28 －31.

［9］吴延涛，封彦蕾.鼻窦炎口服液治疗慢性鼻窦炎144 例［J］.现代中医药，2009，29(4):55 －57.

［10］于虹，赵和云.鼻窦炎口服液治疗慢性副鼻窦炎100 例疗效观察［J］.中国医药导报，2007，4(24):49 －50.

［11］刘素茹.鼻窦炎口服液防治急性鼻窦炎的作用机制研究［D］.成都中医药大学，2002.

［12］谢静，冉海琳，邹亮.高效液相色谱法测定鼻窦炎口服液中木兰脂素含量［J］.药物鉴定，2006，15(9):33.

［13］罗红霞，潘晓鸥.高效液相色谱法测定鼻窦炎口服液中黄芩苷的含量［J］.药物鉴定，2004，13(5):31 －32.