实验性鸡高尿酸血症模型的建立

任予勇

（杜集区农水局畜牧水产中心，安徽 淮北 235000）

嘌呤代谢紊乱和尿酸排泄减少会引起高尿酸血症（hypemricemia）和痛风（gout）疾病，痛风的病理基础产生于高尿酸血症，痛风都会伴有高尿酸血症。［1］高尿酸血症是指细胞外液的尿酸盐呈超饱和状态，当血尿酸盐大于等于417μmol／L时应考虑高尿酸血症。引起嘌呤代谢紊乱的重要原因认为是超高蛋白膳食，过量摄入糖、盐、脂肪、蛋白质及大量饮酒与该病也有重要关系。鸡痛风病又称尿石症、肾结合内脏或营养性痛风等，是家禽的一种常见病，以鸡多见，在我区各鸡场时有发生，造成鸡场不小损失。人类痛风是由单钠尿酸盐（MSU）沉积所致的晶体相关性关节病，与嘌呤代谢紊乱和（或）尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关。随着人民饮食结构的改变以及药物的作用，人类高尿酸血症及痛风的发病率也明显升高，对该病的研究也逐渐增多。［2］因此本实验采取高钙、高蛋白双因素相结合建立实验性鸡高尿酸血症模型，探讨不同含量的钙和蛋白日粮对鸡血尿酸指标的影响，从而为今后高钙和高蛋白饮食致鸡高尿酸血症及痛风病人的防治提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物及分组

雄性“罗曼蛋鸡”（从淮北市某鸡养殖场购买）80只，体重为700±50g，鸡龄60天，实验鸡在动物房适应性喂养5天后称重，测量实验鸡的踝关节周径。然后随机分成4组，A、B、C为造模组。A组高蛋白组；B组高钙组；C组高钙高蛋白组；D组对照组；每组20只实验用鸡。A、B、C三组造模组采用专用的造模饲料来喂养，而D组对照组则采用常规的蛋鸡饲料喂养，笼养，在其他方面四组的条件相同。

1.1.2 常规饲料与造模饲料制备

蛋鸡前期配合饲料喂养的是常规饲料，从淮北市正大饲料有限公司购入。造模饲料［3］为1号饲料：高钙饲料；2号饲料：高蛋白饲料；3号饲料：高钙高蛋白饲料；4号饲料：基础饲料。饲料组成为：其中1号饲料中85%的基础饲料，15%的石粉；2号饲料中50%的基础饲料，50%的豆粕；3号饲料中50%的豆粕，35%的基础饲料，15%的石粉。

1.1.3 试剂与仪器

测定尿酸试剂盒购于温州东瓯津玛生物科技有限公司，分光光度计购于上海安亭科学仪器厂；低速离心机购于美国Beckman公司。

1.2 方法

1.2.1 动物模型建立

对照组常规饲料喂养，A、B、C组造模组予以相应的造模饲料喂养。约17d后造模组鸡开始出现痛风表现，会出现精神不振，羽毛松乱，脱落，进食减少，排粪白且稀，关节肿大，轻轻捏之会躲闪哀鸣，站立不稳等现象。以上体征出现表明鸡高尿酸血症模型造模成功，造模成功后按照原方案继续喂养。

1.2.2 体重测量

每周用精密电子秤准确秤量鸡的体重，并密切观察鸡造模前后的不同表现。

1.2.3 踝关节周径测量

用软尺测量两腿踝关节周径，为鸡踝部第一足爪的下方环绕跗踝部的周径长度，分别测量2次，求出平均值，计数精确到0.1cm，每周测量1次。

1.2.4 血清尿酸值测定

将鸡翅展开暴露翼根静脉，垂直刺破血管，取1.5ml血液，3000转×10min离心，分离血清。酶偶联比色法测定血清尿酸水平，高尿酸血症判断标准是以血尿酸＞476.57μmol／L（8mg／dl）。［4］

1.2.5 统计学处理

实验数据采用SPSS程序软件进行方差分析，“平均数±标准差”表示，P﹤0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组鸡的体重变化情况（见表1）。

表1 实验不同时期鸡体重变化（kg）

由此可见，高蛋白质高钙饲料致雏鸡高尿酸血症时伴有体重的快速增长。鸡的体重与饲养时间呈正相关。各组鸡随着饲养时间的延长，体重变化有显著性差异，但同一阶段各组间体重的差异不显著（p＞0.05）。

2.2 各组鸡踝关节周径的变化（见表2、表3）

表2 实验不同时期鸡踝关节周径（左爪）（cm）

表3 实验不同时期鸡踝关节周径（右爪）（cm）

左踝关节周径在实验的不同时期（见表2），模型组鸡与D组相比差异均显著（p＜0.05），各造模组之间无显著差异（p＞0.05）；D组各时期踝关节周径变化不大；各组间7d时左踝关节周径变化差异不显著；第17d各造模组左踝关节周径均明显增长，差异具有统计学意义（p＜0.05）。第27d时各组无明显增长（p＞0.05）。

右踝关节周径在不同的实验时期（见表3），造模组与D组相比差异均显著，模型组之间无明显差异；D组出现踝关节增长的原因可能是饲养管理或者测定时读数有误差。随着饲养时间的延长，第7dA组右踝关节周径明显增加（p＜0.05），其他模型组增加不明显（p＞0.05）；喂养17d后，A、B、C组的踝关节周径均明显增加，差异显著（p＜0.05），喂养第27d，三组踝关节周径无明显增长，差异不显著（p＞0.05）。

2.3 各组试验鸡血尿酸值的变化

各试验组鸡的血尿酸值变化情况见表4。

表4 实验不同时期鸡血尿酸指标（μmol／L）

由表4可见，随着饲养时间的延长，造模组三组鸡的血尿酸值均明显升高。A组血尿酸值升高速度最明显，喂养第17d最高，已达到高尿酸血症的标准，与其他组相比具有显著差异，而C组血尿酸有一定的升高，但没达到诊断高尿酸血症的水平。与其他组比较，差异不显著，B组与D组血尿酸值升高不明显，无统计学意义（p＞0.05）。喂养第27d时，血尿酸含量，A组、C组均已达到或者超过高尿酸血症的标准水平，与D组比较，均增加显著（p＜0.05），其中C组的血尿酸值显著高于其他造模组。B组血尿酸值则升高不明显，未达到高尿酸血症的诊断水平。

2.4 饲养过程中鸡状态的变化

在实验过程中，各造模组鸡出现进食减少，精神不振，羽毛松落，排白色稀粪（稀粪中含有大量的白色尿酸盐），踝关节肿大，轻捏即躲闪哀鸣，站立不稳，喜伏卧等现象。

3 讨论

鸡体内嘌呤代谢的最终产物是尿酸，可引起高尿酸血症及痛风症［5］。禽痛风的致病因素比较复杂，有报道［6］认为导致禽痛风的因素可达20多种，如饲料中蛋白质含量过高、钙、磷比例失调、维生素A的含量长期不足及水摄入不足等，本实验结果表明，日食中蛋白质的量和性质及钙含量影响较明显。研究认为，关节型痛风的病因主要有两种因素：高蛋白饲料和遗传因素。许多研究者证实高蛋白日食可引起痛风性关节炎，高核蛋白类饲料可引起鸡内脏或关节出现尿酸盐沉积，因为大量高核蛋白摄入后，血尿酸含量会增高，达到一定程度会引起肾小管上皮的损害，肾脏排泄阻碍，造成尿酸代谢紊乱，引起痛风病。有研究［7］认为当饲料中蛋白质含量过高，体内尿酸生成过多，肾增强排泄功能后仍不能把尿酸全部排出时，会发生痛风。在本次实验中，高蛋白日粮成功地复制了典型的高尿酸血症模型，与以往研究结果一致。

喂养的饲料中含钙量过高，钙、磷比例失调也与鸡痛风发病有关，如果钙和磷的比例失调，高钙饲料就可能引发痛风病。以往研究发现［8］青年蛋鸡对饲料中的高钙十分敏感，饲料中的钙含量如果超过标准的50%可引起不良后果，认为饲喂含钙21.5%、磷0.14%日食的蛋鸡有发生肾病的危险，血钙持续升高会导致肾小管上皮细胞发生变性、肿胀、坏死和脱落等病变。在本次实验中，高钙日粮喂养的鸡血尿酸有所升高，但未达到高尿酸血症水平。提示高钙参与了禽痛风的发病过程，但可能不起主要作用。

体内组织分解代谢的加强与高尿酸血症有密切关系。尿酸是禽类蛋白质和核酸代谢的含氮最终产物，如果饲料中蛋白含量过高，就会产生大量的尿酸，在动物肾功能正常情况下，尿酸可正常排泄，但予以高钙高蛋白复合日食饲喂时，高钙引发肾小管上皮细胞损害，使肾功能受损，饲料中的高蛋白会产生大量的尿酸，从而促进尿酸积聚，导致典型的痛风病。实验结果显示：高钙高蛋白日粮成模率最高，提示高钙、高蛋白联合作用更易引起高尿酸血症［5］。

易发生痛风的阶段是鸡25～45日龄，因此养禽户一般会在鸡45日龄左右改用低蛋白的中期配合饲料。建立鸡高尿酸血症模型，为预防鸡高尿酸血症提供实验依据。

由于鸟、禽类、爬行类和灵长类及人类缺乏尿酸分解酶，而其他大多数动物包括哺乳动物体内存在尿酸分解酶能将体内尿酸分解为尿囊素，随尿液排出，所以很少在体内形成痛风结石引起损害。因此建立哺乳动物高尿酸血症模型比较困难，所以至今尚无理想的痛风动物模型。有研究证实禽类与人类的嘌呤核苷酸代谢途径相似，鸡体内的核蛋白水解后产生核酸，降解成嘌呤类物质代谢成尿酸，其过程中与人类一样，当日食中含高量蛋白质及核蛋白时，生成尿酸的量大大增加。同时鸡体内同样缺乏尿酸酶，其嘌呤代谢的最终产物亦为尿酸，增加嘌呤吸收、合成以及减少尿酸降解和排泄，可使血尿酸含量增加，从而引发鸡高尿酸血症，该病理过程与人相似。［9］故研究鸡高尿酸血症模型对探讨人类高尿酸血症和痛风的防治也有重要意义。

4 小结

综上所述，随着饲养时间的延长，高蛋白、高钙、高钙高蛋白日粮均可引起鸡体内尿酸盐的明显升高，其中高蛋白组和高钙高蛋白组血尿酸值达到了鸡高尿酸血症标准，成功复制了鸡高尿酸血症模型。试验结果显示，高蛋白日粮成模最快，而高钙高蛋白日粮成模率最高。

［1］张超，曹克光，杨崇青，等.高尿酸血症及尿酸性肾病动物模型的建立及应用［J］.实验动物科学与管理.1999，16（4）：18－21.

［2］刘小青，张冰.鹌鹑高尿酸血症模型建立初探［J］.中国病理生理杂志，2001，17（10）：1038－1040.

［3］王圣瑾.鸡高尿酸血症模型的建立和复方中草药对模型鸡疗效观察［D］.合肥：安徽农业大学，2010.

［4］苏友新，陈伟宏，王和鸣，等.痛风宁颗粒对实验性鸡痛风性关节炎的影响［J］.中国骨伤，2003，16（5）：275－277.

［5］邱许，黄有才，蒋建兵.对蛋鸡痛风症的病因调查研究［J］.禽业科技，1997，13（7）：29－30.