HPLC法对小米辣中辣椒素含量测定的研究

王海英 孙 楠 孙跃宁

(青海阿如拉藏医药研究开发有限公司，青海 西宁 810003)

小米辣，藏名子扎嘎，为茄科植物小米辣Capsicum frutescens L.的干燥成熟果实。圆锥形或纺锤形，常带有宿萼及果柄，长1 ～3.8cm，粗径0.4 ～0.9cm。表面红色或橙红色，稍嫩者黄绿色至青绿色，有光泽，具不同程度的皱缩。气特异，具催嚏性，味极辛辣。秋季果熟时采收，晒干。具有祛寒化痞，消食，调肝益肾。用于食积不化，胃肠肝区疼痛，肾病，肠病，中毒，风寒引起的痞瘤等功效。［1］

小米辣作为藏药中单方或复方制剂的开发应用，已有久远的历史。为更好的控制小米辣的质量，本实验拟建立小米辣中有效成分辣椒素的含量测定方法。现另有研究表明，小米辣还可以补充人体必需的 Fe、Zn、Cu、Co、Cr、Ni等微量元素。［2］

1 仪器与试药

1.1 仪器:KQ－250型超声波清洗器;岛津LC－20AT高效液相色谱仪;电子分析天平。

1.2 试药:小米辣(购于青海九康药材公司);辣椒素对照品(批号:110839－200403，供含量测定用，中国药品生物制品检定所);甲醇为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件:用迪马 C18柱(250mm ×4.6mm，5.0μm);甲醇－水(65:35)为流动相;检测波长为280nm。理论板数按辣椒素峰计算应不低于2000。在此色谱条件下，辣椒素对照品及样品的色谱图见图1。

图1 小米辣HPLC图

2.2 溶液的制备［3、4］

2.2.1 对照品溶液的制备:精密称取辣椒素对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备:取本品粉末1g，精密称定，置25mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理10min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。

2.2.3 提取方法考察:对样品采取不同的制备方法进行处理、结果以超声处理效果最好，可消除对所有待测组分的干扰并且含量较高。结果见表1。［5］

表1 提取方法考察试验结果(n=6)

2.2.4 标准曲线与线性范围:精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10μL 注入液相色谱仪测定，按2.2.1 项下的色谱条件测定峰面积，以进样量为横坐标(X)，以峰面积的积分值为纵坐标(Y)绘制标准曲线。得辣椒素的回归方程为Y=59406.6X+30297.4，r=0.9996。结果表明，在上述色谱条件下，辣椒素在0.22～1.1μg范围内呈良好的线性关系。

2.2.5 精密度试验:精密吸取辣椒素10μL，在上述色谱条件下分别连续进样5次，测定峰面积，结果辣椒素RSD为0.85%，说明仪器性能良好。

2.2.6 稳定性试验:精密吸取辣椒素10μL，分别于0、2、4、6、8h进样，测定峰面积，结果辣椒素的RSD分别为0.59%，说明测定时间内供试品稳定。

2.2.7 重现性试验:取同一批号样品5份，分别按样品溶液制备法制备，测定辣椒素峰面积值，其结果样品中辣椒素平均含量为 0.063mg/g－1，RSD 为 0.62%(n=5)，表明分析方法精密度良好。

2.2.8 加样回收率试验［6］:取已知含量的样品6份，分别精密加入辣椒素对照品溶液，按含量测定方法操作制备供试品溶液，并按上述色谱条件测定，计算回收率。结果见下表2。

表2 加样回收率试验结果(n=5)

表3 样品的含量测定结果(n=3)

3 讨论

3.1 小米辣［7］，不仅作为药品用来为我们治疗疾病［8］，而且还被用作调味品，出现在我们的日常生活中;研究还发现它还可以补充人体必需的微量元素［9－10］。本实验表明，此方法线性关系、精密度、稳定性和重现性均良好，该方法适用于小米辣中辣椒素的含量测定。

3.2 本实验中，对样品的制备方法进行研究，发现超声处理的提取方法提取率较高，且方法简便、快捷，故采用该方法处理样品;并用甲醇－水(65:35)为流动相时，色谱峰对称性好，干扰小。本实验建立了高效液相色谱法测定小米辣中辣椒素的含量，该法简便、灵敏、准确，可有效地控制小米辣的产品质量。

［1］青海省藏药标准［S］.1992.

［2］王宝森，白红丽，等.云南金平小米辣微量元素含量分析［J］.食品科技，2010.

［3］潘永峰，卢玉斌，等.HPLC法测定辣椒中辣椒碱的含量［J］.中国药品标准，2006，7(5):47 －48.

［4］陆文瑾，华新农，等.辣椒风湿膏质量标准研究［J］.国际中医中药杂志，2006，7(2):214 －216.

［5］魏永锋，闫宏涛.反相高效液相色支测定卡斯舒中桂皮酸及辣椒素含量［J］.药物分析杂志.

［6］朱亦赤，刘志敏.辣椒素类物质的测定、提取及应用研究进展［J］.辣椒杂志;2007，1

［7］昆明植物研究所.小米辣.中国高等植物数据库全库.中国科学院微生物研究所.［2009－02－26］

［8］陈龙.云南十种辣椒抗氧化及抑菌活性的研究［J］.昆明理工大学，2010，12 －01.

［9］王宝森，等.云南食品拿刀辣与小米辣矿质元素含量分析［J］.安徽农业科学，2010，6

［10］白红丽，郭俊明，张虹，等.红河州小米辣中矿物元素比较［J］.江苏农业科学，2010，5