脑出血患者急性期血清HMGB1、ENA－78和S100β蛋白水平的变化及依达拉奉的干预作用

詹利英 凌 芳 华 梅

脑出血是目前威胁中老年健康的常见病和多发病，其致残率和致死率均较高，其病理生理改变主要为血肿的占位效应和周边水肿带的形成，其发病机制复杂，在脑出血后的继发性损害中涉及自由基损伤、炎症反应、细胞凋亡等多个途径，这一系列的级联反应形成的瀑布效应加重了神经元细胞损伤。临床上对于轻中度脑出血往往采取内科保守治疗，但如何有效地实施脑保护和促进神经功能恢复是目前研究的热点和难题。依达拉奉（Edaravone）是一种新型的自由基清除剂，目前已广泛应用于缺血性脑卒中患者，且已证实对脑缺血时神经元细胞具有保护作用，可有效地减少细胞毒性反应后自由基的产生，但在出血性脑卒中患者中应用尚不广泛。为了研究依达拉奉是否对脑出血具有保护治疗作用，本研究对160例高血压性脑出血患者采取随机对照研究，通过检测血清高迁移率族蛋白－1（High mobility group box－1，HMGB1）、中性粒细胞激活肽－78（Epithelial neutrophil activating peptide－78，ENA－78）和S－100β蛋白（S－100βprotein）水平和观察神经功能缺损评分的变化来探讨依达拉奉对脑出血的可能保护作用机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取武汉市第五人民医院神经内科卒中单元2008年1月～2013年1月间高血压性脑出血住院患者共160例，发病在24h以内，NIHSS评分在4～22分，全部病例符合1995 年中华医学会第四次全国脑血管病学术会议修订的脑出血诊断标准，并且入院经头颅CT 确诊为基底节区出血，出血量10～30 ml。严格遵循随机、对照、单盲的原则，分为依达拉奉组和常规治疗组。依达拉奉组80例，平均年龄（61.58±7.74）岁，其中男42例，女38例。常规治疗组80 例，平均年龄（59.40±8.18）岁，其中男39例，女41例。

对照组：系同期我院体检健康者100例，各项体检均正常，其中男55 例，女45 例，平均年龄（55.13±14.29）岁。

排除标准：（1）出血量大于30 ml，脑出血破人脑室或蛛网膜下腔；（2）既往有脑出血史、脑外伤后出血、肿瘤出血、多灶性出血；（3）患糖尿病、严重心肝肾功能不全，并发感染。

退出标准：（1）用药过程中出现严重毒副反应；（2）出现心脑血管病复发事件；（3）患者突发意外死亡。

所有研究对象用药均征得患者本人和家属同意，符合武汉市第五医院伦理委员会制定的伦理学标准，签署治疗同意书。

1.2 方法

1.2.1 治疗 常规治疗组和依达拉奉组均使用甘露醇、甘油果糖和速尿脱水、降颅内压、调控血压（施慧达）和补液治疗，脱水剂使用一般不超过14 d；依达拉奉组在上述基础上加用依达拉奉注射液（其商品名为必存，每支10 mg针剂，南京先声药业生产）30 mg加入100 ml生理盐水，每日2次，疗程为14 d。常规治疗组使用等容积安慰剂生理盐水。两组治疗期间均不再使用其他氧自由基清除剂及脑保护剂如尼莫地平等。

1.2.2 临床神经功能缺损评分 神经功能缺损评分采用1989年的美国国立卫生院卒中量表（NIHSS），日常生活能力评分（ADL）标准采用Barthel指数（BI）和斯堪的纳维亚卒中量表（SSS）评定。均由卒中单元中经过培训的神经内科专职人员负责评分并录入。在患者入院治疗前、治疗后第1周、第2周和第3周分别评分1次。

1.2.3 生化检测

对照组于体检日清晨抽取空腹静脉血3 ml。脑出血患者入院后第1 d（治疗前）、第3 d、第7 d和第14 d晨起空腹抽取静脉血5 ml，尽快分离血清，－70 ℃低温保存待测。检测前冻融，采用双抗体夹心ELISA 法测定血清HMGB1、ENA－78 和S100β水平，试剂盒均由武汉博士德公司提供，仪器为意大利产AZXM11－Alisei全自动酶标仪。操作严格按说明书进行，结果由酶标分析仪分析所得。此外，常规治疗组和依达拉奉组入院后第1 d、第7 d和第14 d均抽血检测血常规、尿规及肝肾功能、血脂、心肌酶学等。

1.2.4 统计学处理

应用SPSS17.0统计软件，所有计量资料以均值±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析、治疗前后指标比较采用配对t检验，计数资料采用χ2检验，相关性分析采用直线相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 常规治疗组和依达拉奉组一般临床资料比较

两组患者一般资料（性别、年龄、血压、血糖、体质量指数、血脂、入院时NIHSS评分、吸烟史、饮酒史、出血量、WBC 计数）均无明显差异，具有可比性（P均＞0.05）（表1）。

表1 2组患者的一般临床资料比较（±s）

表1 2组患者的一般临床资料比较（±s）

项目 常规治疗组（n＝80）依达拉奉组（n＝80）男／女（例／例） 39／41 42／38年龄（岁） 59.40±8.18 61.58±7.74收缩压（mmHg） 153.90±5.63 154.56±7.29舒张压（mmHg） 90.59±4.92 91.44±8.11空腹血糖（mmol／L） 5.99±0.78 6.13±0.72体质量指数（kg／m2） 23.24±2.45 22.63±2.28总胆固醇（mmol／L） 5.81±0.55 5.99±0.61甘油三酯（mmol／L） 2.34±0.55 2.38±0.59低密度脂蛋白胆固醇（mmol／L） 4.12±0.37 4.07±0.68高密度脂蛋白胆固醇（mmol／L） 1.32±0.18 1.29±0.21吸烟史（例） 39 36饮酒史（例） 39 41 NIHSS评分 14.54±4.99 13.86±4.70出血量（ml） 15.98±4.92 15.53±4.38 WBC（×109／L） 7.83±1.14 7.64±1.41

2.2 治疗前后3组患者血清HMGB1、ENA－78和S100β水平的比较

在发病后第1 d，依达拉奉组和常规治疗组患者血清HMGB1、ENA－78 和S100β水平均明显升高（P均＜0.01），且达峰值，继之出现缓慢下降。在发病后第14 d依达拉奉组和常规治疗组三项指标仍高于对照组（P均＜0.01），但在发病后第3 d、第7 d、第14 d 依 达 拉 奉 组 血 清HMGB1、ENA－78 和S100β水平均明显低于常规治疗组（P＜0.01）（表2～4）。

2.3 治疗前后2组SSS和ADL评分的比较

治疗前两组（常规治疗组和依达拉奉组）患者SSS评分和ADL评分差异无显著性（P均＞0.05）。在治疗后第1周两组患者SSS评分和ADL 评分较入院时降低，但在治疗后第2周和第3周常规治疗组和依达拉奉组患者SSS评分和ADL 评分逐渐上升。在治疗后第2周和第3周依达拉奉组患者SSS和ADL评分明显高于常规治疗组（P均＜0.01）（表5、6）。

表2 3组血清HMGB1水平比较（±s，mg／L）

表2 3组血清HMGB1水平比较（±s，mg／L）

注：与同组治疗前比较，＊P＜0.01；与对照组比较，△P＜0.01；与常规治疗组比较，▲P＜0.01

组别 例数 治疗前（第1天） 第3天 第7天 第14天对照组 100 0.92±0.23常规治疗组 80 13.41±3.17＊ 10.22±2.50＊△ 7.49±1.77＊△ 4.02±1.04＊△依达拉奉组 80 12.55±2.93△ 9.17±2.11＊△▲ 5.18±1.23＊△▲ 2.38±0.56＊△▲

表3 3组血清ENA－78水平比较（±s，ng／L）

表3 3组血清ENA－78水平比较（±s，ng／L）

注：与同组治疗前比较，＊P＜0.01；与对照组比较，△P＜0.01；与常规治疗组比较，▲P＜0.01

组别 例数 治疗前（第1天） 第3天 第7天 第14天对照组 100 30.48±10.79常规治疗组 80 279.14±28.16△ 222.33±22.14＊△ 150.39±15.55＊△ 86.09±8.92＊△依达拉奉组 80 276.51±30.20△ 209.06±19.30＊△▲ 103.13±9.52＊△▲ 50.17±4.63＊△▲

表4 3组血清S100β水平比较（±s，ng／L）

表4 3组血清S100β水平比较（±s，ng／L）

注：与同组治疗前比较，＊P＜0.01；与对照组比较，△P＜0.01；与常规治疗组比较，▲P＜0.01

组别 例数 治疗前（第1天） 第3天 第7天 第14天对照组 100 0.97±0.43常规治疗组 80 5.76±0.56△ 4.83±0.92＊△ 3.06±0.31＊△ 1.68±0.17＊△依达拉奉组 80 5.86±0.61△ 4.37±0.44＊△▲ 2.07±0.21＊△▲ 1.15±0.12＊△▲

表5 常规治疗组和依达拉奉组SSS评分的比较（±s，分）

表5 常规治疗组和依达拉奉组SSS评分的比较（±s，分）

注：与同组治疗前比较，＊P＜0.01；与常规治疗组比较，△P＜0.01

组别 例数 治疗前 治疗后第1周 治疗后第2周 治疗后第3周常规治疗组 80 31.44±6.70 22.64±4.82＊ 26.44±5.63＊ 36.47±7.77＊依达拉奉组 80 32.24±6.15 22.89±4.37＊ 31.24±5.97△ 40.30±7.6 9＊△

表6 常规治疗组和依达拉奉组ADL评分的比较（±s，分）

表6 常规治疗组和依达拉奉组ADL评分的比较（±s，分）

注：与同组治疗前比较，＊P＜0.01；与常规治疗组比较，△P＜0.01

组别 例数 治疗前 治疗后第1周 治疗后第2周 治疗后第3周常规治疗组 80 32.21±6.33 27.06±5.32＊ 29.31±5.76＊ 35.11±6.90＊依达拉奉组 80 33.76±6.26 28.36±5.26＊ 32.75±6.07△ 41.53±7.70＊△

2.4 相关性分析 直线相关分析显示治疗前脑出血患者（依达拉奉组和常规组）血清S－100β蛋白水平与SSS、ADL评分均呈负相关（分别r＝－0.968，r＝－0.959，P均＜0.01），血清HMGB1 水平与ENA－78水平呈显著正相关（r＝0.788，P＜0.01）。

3 讨 论

出血性脑损伤是一个多因素、多机制、多环节的恶性级联反应过程，已研究证实炎性反应参与了急性脑出血后继发性脑损伤的整个过程［1，2］。S－100β蛋白是中枢神经系统的一种特异性酸性钙结合蛋白，主要由神经胶质细胞合成和分泌。在生理状态下S100β蛋白以低浓度形式存在，它参与神经细胞的再生与修复，可促进神经生长，调节细胞内外能量代谢，并参与细胞内信号通路传导，具有神经营养作用；但在病理状态下高浓度存在的S100β蛋白能够刺激神经胶质细胞产生大量致炎因子和一氧化氮，并通过一氧化氮依赖途径导致神经元功能障碍或神经元细胞程序性死亡，具有直接的神经毒性作用［3－5］。脑出血后神经胶质细胞大量坏死、部分细胞活化，S100β蛋白释放和合成增多，从而出现外周血或脑脊液中S100β蛋白水平升高，而继之出现的脑水肿、血脑屏障破坏则进一步加重了神经组织损伤，最终诱导了细胞死亡或凋亡［6］。本研究治疗前、常规治疗组和依达拉奉组患者血清S100β水平均明显高于对照组，且于发病第1d达高峰，继之出现缓慢下降，与国外研究结果基本一致［1，7］。治疗前脑出血患者（依达拉奉组和常规组）血清S－100β蛋白水平与SSS、ADL 评分均呈负相关，提示血清S－100β蛋白可作为判断急性脑出血神经功能缺损程度的有效血清学指标［8］。

高迁移率族蛋白－1（HMGB1）是一种DNA 结合蛋白，它广泛分布于多种组织器官细胞（如淋巴组织、脑、肝、肺等）的胞核和胞浆中，是判断某些细胞凋亡或坏死的一个关键信号，也是迄今为止所发现的惟一的能在细胞外诱导细胞因子分泌和活化炎症细胞的核内蛋白［9－11］。HMGB1作为一种重要的晚期炎症介质和致炎细胞因子［12］，参与了组织损伤后修复及多种炎性疾病的病理生理过程［13－16］，它作为启动和维持炎症瀑布式反应的中心分子，在致炎因子TNF－α或IL－1等的刺激下单核－巨噬细胞释放HMGB1，反过来HMGB1也可刺激单核－巨噬细胞分泌TNF－α，L－6，IL－8 等炎症介质，这样就形成了一个正反馈环路［17－20］。此外，HMGB1还可以刺激中性粒细胞产生趋化现象，增加上皮细胞的通透性，从而加重局部渗出和水肿，它还可能参与炎症过程中免疫和内分泌反应的调节［21］。因而，HMGB1可作为感染、损伤后炎性反应药物治疗作用的靶点［22］。

本研究入院后第1 d，依达拉奉组和常规治疗组血清HMGB1水平均明显高于对照组，且达高峰，继之出现缓慢下降。分析其可能机制为脑出血后血肿周边脑组织存在缺血和缺氧，导致细胞功能受损、坏死后，炎性细胞大量被激活，炎症介质释放入血，产生全身性的瀑布样炎症反应［23］，继而诱发了星形胶质细胞或神经元细胞释放HMGB1，而后者可刺激星形胶质细胞或神经元细胞释放MMP－9，IL－1和TNF－α等多种炎性因子［24］。如此反复，形成一个正反馈环路，进而导致血清中HMGB－1可在短时间内迅速增加，随着炎性反应的逐渐减弱，血清HMGB－1水平缓慢下降。有学者研究表明，血清HMGB－1水平可作为预测动脉瘤所致蛛网膜下腔出血患者临床神经功能预后和病死率的有利的补充工具［25］。本研究表明，HMGB1在脑出血急性期神经血管单元中担当起调节炎性反应的早期致炎因子作用［26］。最近一项研究表明，在脑出血的恢复期HMGB1可促进血肿周围新生血管形成和神经再生［27］。可见，在脑出血不同时期HMGB1具有双刃剑的作用。

中性粒细胞激活肽－78（ENA－78）由78 个氨基酸组成［28］，结构上与IL－8相似，同属于C－X－C亚族的趋化因子，在各种炎性介质如脂多糖（LPS）、IL－1、TNF－α等的诱导下均可表达，可由单核细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等合成和释放，但其主要来源为活化的巨噬细胞［29］。ENA－78 具有趋化和激活中性粒细胞作用，它既是炎症反应的重要介质，又是重要的血管增生因子［30］。ENA－78和IL－8均可与细胞表面特异性受体CXCR－2结合，上调粘附分子E选择蛋白和CD11b／CD18（Mac 1）的表达，促进白细胞附壁以及从毛细血管及微静脉渗出，延迟中性粒细胞的凋亡，并刺激白细胞分泌一些生长因子与细胞因子［31］。已有研究证实，ENA－78活性的增加与微血管通透性、炎性细胞侵入和水肿明显相关［32］。

本研究发病后第1 d，依达拉奉组和常规治疗组血清ENA－78水平均明显高于对照组，且达高峰，继之出现缓慢下降。经直线相关分析提示，血清HMGB1水平与ENA－78水平呈显著正相关，分析其可能机制为脑出血后血肿周边脑组织缺血缺氧后导致细胞损伤、坏死，大量炎性细胞浸润，后者合成和释放ENA－78；与此同时，星形胶质细胞或神经元细胞释放HMGB1增加［33］，HMGB1反过来刺激星形胶质细胞或神经元细胞释放多种炎性因子如TNF－α等，并可特征性的上调白细胞粘附分子（ICAM－1和VCAM－1），分泌中性粒细胞和内皮细胞化学趋化素（IL－8 和MCP－1）等［34］，而TNF－α是关键的早期炎症介质，具有调节和放大炎症反应的作用，随着血清TNF－α水平的升高，炎性细胞浸润亦增加，炎性反应进一步增强。因而，ENA－78 和HMGB1二者互为因果关系。本研究结果显示，血清ENA－78 和HMGB1 均可能参与了脑出血急性期继发性炎性反应过程［35］。

脑出血后继发的病理生理变化是复杂多样的，早期血肿占位效应造成的周边脑组织缺血、缺氧以及病灶部位白细胞浸润可产生大量自由基，其后红细胞大量降解生成的血红蛋白、活性铁也产生大量自由基，后者可造成血管内皮细胞功能受损，从而使脑血管通透性增加，脑水肿加重，并在此过程中产生新的自由基形成连锁反应，造成更严重的脑损害。已有研究证实自由基的产生在脑出血后细胞凋亡中发挥着重要作用，自由基的水平上升可促进神经元细胞和神经胶质细胞凋亡［36］。依达拉奉是一种相对分子质量小的自由基清除剂，具有亲脂基团，对血－脑屏障的通透率较高，静脉给药后可以很容易地到达作用部位，清除脑内的毒性自由基，并且通过打断脂质过氧化反应链来抑制脑细胞（血管内皮细胞、神经细胞、神经胶质细胞）膜的过氧化反应，保持了脑细胞膜结构和功能的完整性，从而有效地抑制了迟发性神经元死亡。在一项动物实验的研究中发现，采用依达拉奉干预治疗可有效地减轻脑出血模型大鼠血肿周边水肿带面积，降低神经功能缺失评分，促进神经功能恢复［37］。

本研究治疗后第2周和第3周依达拉奉组患者SSS和ADL评分明显高于常规治疗组患者，提示依达拉奉作为新型自由基清除剂能明显改善脑卒中所致的神经功能障碍，而且在发病后第3d、第7d和第14d依达拉奉组血清HMGB1、ENA－78和S100β水平均明显低于常规治疗组，提示依达拉奉可通过有效地降低脑出血患者急性期血清HMGB1、ENA－78和S100β水平来减轻脑出血后继发炎性反应。本研究推测其可能作用机制为依达拉奉可能是通过清除自由基和抑制脂质过氧化，稳定神经元细胞膜，减少S－100β蛋白漏出，与此同时由于脑细胞膜结构和功能的完整性得以保持，有效地抑制了迟发性神经元死亡，星形胶质细胞或神经元细胞释放HMGB1的含量降低，从而减轻了神经元死亡后继发的炎性反应，炎性反应介质如TNF－α等释放减少，从而减少了对ENA－78的诱导产生。当然，其具体作用机制十分复杂，后期研究中将更深入一步进行探讨。

有关脑出血的脑保护治疗仍然是临床工作中的重点和难点，如何利用药物减轻继发性的炎性反应和促进神经功能的恢复仍然是核心和关键问题。综上所述，血清S－100β浓度可作为评估脑出血后脑损伤严重程度的血清学指标，血清HMGB1和ENA－78可能参与了脑出血后继发炎性反应过程。依达拉奉作为一种强有效的脑保护剂，具有减轻脑出血后炎症反应、保护脑细胞和提高患者神经功能的作用。因此，依达拉奉不失为脑出血患者急性期治疗中的一种良好的可选药物，由于脑出血后继发炎性反应的病理生理机制相当复杂，因此在后期的研究中，将进一步推广和扩大样本量研究，并深入探讨依达拉奉对脑出血的可能脑保护作用机制。

1 Hu YY，Dong XQ，Yu WH，et al.Change in plasma S100B level after acute spontaneous basal ganglia hemorrhage.Shock，2010，33（2）：134－140.

2 Huang M，Hu YY，Dong XQ.High concentrations of procoagulant microparticles in the cerebrospinal fluid and peripheral blood of patients with acute basal ganglia hemorrhage are associated with poor outcome.Surg Neurol，2009，72（5）：481－489.

3 Donato R，Sorci G，Riuzzi F，et al.S100B＇s double life：intracellular regulator and extracellular signal.Biochim Biophys Acta，2009，1793（6）：1008－1022.

4 Sorci G，Bianchi R，Riuzzi F，et al.S100B Protein，A Damage－Associated Molecular Pattern Protein in the Brain and Heart，and Beyond.Cardiovasc Psychiatry Neurol，2010，20（10）：1－13.

5 Donato R，Cannon BR，Sorci G，et al.Functions of s100 proteins.Curr Mol Med，2013，13（1）：24－57.

6 Tanaka Y，Marumo T，Shibuta H，et al.Serum S100B，brain edema，and hematoma formation in a rat model of collagenase－induced hemorrhagic stroke.Brain Res Bull，2009，78（4－5）：158－163.

7 Brea D，Sobrino T，Blanco M，et al.Temporal profile and clinical significance of serum neuron－specific enolase and S100in ischemic and hemorrhagic stroke.Clin Chem Lab Med，2009；47（12）：1513－1518.

8 Sanchez－Pe a P，Pereira AR，Sourour NA，et al.S100B as an additional prognostic marker in subarachnoid aneurysmal hemorrhage.Crit Care Med，2008，36（8）：2267－2273.

9 Harris HE，Andersson U，Pisetsky DS.HMGB1：a multifunctional alarmin driving autoimmune and inflammatory disease.Nat Rev Rheumatol，2012，8（4）：195－202.

10 Huang W，Tang Y，Li L.HMGB1，apotent proinflammatory cytokine in sepsis.Cytokine，2010，51（2）：119－126.

11 Huang W，Liu Y，Li L，et al.HMGB1increases permeability of the endothelial cell monolayer via RAGE and Src family tyrosine kinase pathways.Inflammation，2012，35（1）：350－362.

12 Hreggvidsd ttir HS，Lundberg AM，Aveberger AC，et al.High mobility group box protein 1（HMGB1）－partner molecule complexes enhance cytokine production by signaling through the partner molecule receptor.Mol Med，2012，18：224－230.

13 Andersson U，Harris HE.The role of HMGB1in the pathogenesis of rheumatic disease.Biochim Biophys Acta，2010，1799（1－2）：141－148.

14 Xie K，Yu Y，Pei Y，et al.Protective effects of hydrogen gas on murine polymicrobial sepsis via reducing oxidative stress and HMGB1 release.Shock，2010，34（1）：90－97.

15 Gao HM，Zhou H，Zhang F，et al.HMGB1 acts on microglia Mac1 to mediate chronic neuroinflammation that drives progressive neurodegeneration.J Neurosci，2011，31（3）：1081－1092.

16 Hagiwara S，Iwasaka H，Shingu C，et al.The effect of experimental diabetes on high mobility group box 1 protein expression in endotoxin－induced acute lung injury.J Surg Res，2011，168（1）：111－118.

17 Sundberg E，Grundtman C，Af Klint E，et al.Systemic TNF blockade does not modulate synovial expression of the pro－in－flammatory mediator HMGB1 in rheumatoid arthritis patients－a prospective clinical study.Arthritis Res Ther，2008，10（2）：1－8.

18 W h maa H，Schierbeck H，Hreggvidsdottir HS，et al.High mobility group box protein 1 in complex with lipopolysaccharide or IL－1 promotes an increased inflammatory phenotype in synovial fibroblasts.Arthritis Res Ther，2011，13（4）：1－12.

19 Chen XL，Sun L，Guo F，et al.High－mobility group box－1 induces proinflammatory cytokines production of Kupffer cells through TLRs－dependent signaling pathway after burn injury.PLoS One，2012，7（11）：1－9.

20 Li J，Xie H，Wen T，et al.Expression of high mobility group box chromosomal protein 1 and its modulating effects on downstream cytokines in systemic lupus erythematosus.J Rheumatol，2010，37（4）：766－775.

21 Hagiwara S，Iwasaka H，Hasegawa A，et al.Effects of hyperglycemia and insulin therapy on high mobility group box 1in endotoxin－induced acute lung injury in a rat model.Crit Care Med，2008，36（8）：2407－2413.

22 Zhu S，Li W，Ward MF，et al.High mobility group box1 protein as a potential drug target for infection－and injury－elicited inflammation.Inflamm Allergy Drug Targets，2010，9（1）：60－72.

23 El Gazzar M，Yoza BK，Chen X，et al.Chromatin－specific remodeling by HMGB1 and linker histone H1 silences proinflammatory genes during endotoxin tolerance.Mol Cell Biol，2009，29（7）：1959－1971.

24 Qiu J，Nishimura M，Wang Y，et al.Early release of HMGB－1 from neurons after the onset of brain ischemia.J Cereb Blood Flow Metab，2008，28（5）：927－938.

25 Zhu XD，Chen JS，Zhou F，et al.Relationship between plasma high mobility group box－1 protein levels and clinical outcomes of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.J Neuroinflammation，2012，9（194）：1－12.

26 Lei C，Lin S，Zhang C，et al.High－mobility group box1 protein promotes neuroinflammation after intracerebral hemorrhage in rats.Neuroscience，2013，228：190－199.

27 Lei C，Lin S，Zhang C，et al.Effects of high－mobility group box1 on cerebral angiogenesis and neurogenesis after intracerebral hemorrhage.Neuroscience，2013，229：12－19.

28 Liu GN，Shi HZ，Xie ZH，et al.Epithelial neutrophil－activating peptide－78 recruits neutrophils into pleural effusion.Eur Respir J，2009，34（1）：184－190.

29 Vasakova M，Sterclova M，Kolesar L，et al.Cytokine gene polymorphisms and BALF cytokine levels in interstitial lung diseases.Respir Med，2009，103（5）：773－779.

30 Frick VO，Rubie C，Wagner M，et al.Enhanced ENA－78 and IL－8 expression in patients with malignant pancreatic diseases.Pancreatology，2008，8（4－5）：488－497.

31 Bersinger NA，Frischknecht F，Taylor RN，et al.Basal and cytokine－stimulated production of epithelial neutrophil activating peptide－78（ENA－78）and interleukin－8（IL－8）by cultured human endometrial epithelial and stromal cells.Fertil Steril，2008，89（5Suppl）：1530－1536.

32 Antoniou KM，Tzanakis N，Tzortzaki EG，et al.Different angiogenic CXC chemokine levels in bronchoalveolar lavage fluid after interferon gamma－1b therapy in idiopathic pulmonary fibrosis patients.Pulm Pharmacol Ther，2008，21（6）：840－844.

33 Murakami K，Koide M，Dumont TM，et al.Subarachnoid Hemorrhage Induces Gliosis and Increased Expression of the Pro－inflammatory Cytokine High Mobility Group Box1 Protein.Transl Stroke Res，2011，2（1）：72－79.

34 Hagiwara S，Iwasaka H，Togo K，et al.A neutrophil elastase inhibitor，sivelestat，reduces lung injury following endotoxin－induced shock in rats by inhibiting HMGB1.Inflammation，2008，31（4）：227－234.

35 Zhou Y，Xiong KL，Lin S，et al.Elevation of high－mobility group protein box－1in serum correlates with severity of acute intracerebral hemorrhage.Mediators Inflamm，2010，20（10）：1－6.

36 Han N，Ding SJ，Wu T，et al.Correlation of free radical level and apoptosis after intracerebral hemorrhage in rats.Neurosci Bull，2008，24（6）：351－358.

37 Zhou F，Chen G，Zhang J.Edaravone reduces brain oedema and attenuates cell death after intracerebral haemorrhage in mice.Brain Inj，2009，23（4）：353－357.