厄贝沙坦和罗格列酮对胰岛素抵抗SD大鼠脂蛋白脂酶的影响

诸葛铭宁 蔡玉琴 斯重阳 马淑平

高血压和胰岛素抵抗(IR)密切相关［1］，脂蛋白脂酶(LPL)是调节体内三酰甘油(TG)和血浆脂蛋白代谢的重要因子，其活性降低与IR关系密切。本实验用SD大鼠经果糖饲料喂养造成IR后，分别给予厄贝沙坦与罗格列酮，比较二种药物对其血压和血清LPL含量的影响。

1 材料与方法

1．1 动物来源与分组 由河北医科大学动物室提供6周龄雄性SD大鼠30只，食物中能量的70%由果糖提供，25%由蛋白质提供，5%由脂肪提供，喂养4周造成IR。之后将大鼠随机分为果糖喂养组(FG组)、厄贝沙坦治疗组(IFG组)和罗格列酮治疗组(RFG组)，每组10只。IFG组于果糖喂养同时给予厄贝沙坦片(赛诺菲公司产品)，按3 mg·kg－1·d－1溶于饮水中灌胃;RFG组于果糖喂养同时给予罗格列酮片(葛兰素史克公司产品)，按50 mg·kg－1·d－1溶于饮水中灌胃。8周后宰杀动物，采血并观察结果。

1．2 实验方法 试验期间，每周二8∶00～10∶00将30只大鼠在38℃箱中预热10 min后，用尾袖法测量大鼠尾动脉血压，主要仪器为RBP-1B型大鼠血压计(中日友好临床医学研究所生产)。在采血前1 d 18∶00后禁食水，于晨8∶00给予戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉，采鼠尾静脉血 0．5 ml，不抗凝，2 000～3 000 r/min离心10 min，取血清0．1 ml，采用葡萄糖氧化酶法检验空腹血糖(FPG)，试剂盒从北京中山生物技术开发公司购买(批间变异＜10%，批内变异＜5%)，仪器为Vitalab Micro半自动生化分析仪(荷兰);用胰岛素放射免疫分析药盒测定血清中FINS含量;按照李光伟等［2］的方法计算胰岛素敏感指数(ISI)，ISI=1n［I/(FPG × FINS)］。空腹血清胆固醇(TC)、TG、极低密度脂蛋白(VLDL)和游离脂肪酸(FFA)的测定用酶学方法;血清LPL含量采用敏感的双抗体夹心酶联免疫(ELISA)方法测定。

表13组大鼠SBP、FPG、FINS、ISI和TG、TC、VLDL、FFA、LPL比较n=10，±s

表13组大鼠SBP、FPG、FINS、ISI和TG、TC、VLDL、FFA、LPL比较n=10，±s

注:与 FG 组比较，*P ＜0．05，#P ＜0．01;与 IFG 组比较，△P ＜0．05，☆P ＜0．01

组别 SBP(mm Hg)FPG(mmol/L)FINS(mU/L) ISI TG(mmol/L) TC(mmol/L)VLDL(mmol/L)FFA(mmol/L) LPL(ng/ml)FG 组 148±18 5．9±0．6 71±19 －3．39±0．36 0．62±0．17 1．43 ±0．21 0．32 ±0．12 0．71 ±0．12 1．12 ±0．14 IFG 组 113 ±20# 6．1 ±0．4 60 ±17# －2．93 ±0．21# 0．52 ±0．19# 1．36 ±0．21 0．23 ±0．09* 0．50 ±0．07# 1．37 ±0．26#RFG 组 128 ±17#△ 5．7 ±0．6 43 ±13#☆ －2．48 ±0．31#☆ 0．41 ±0．24#☆ 1．13 ±0．36# 0．25 ±0．11* 0．42 ±0．11#☆ 1．53 ±0．23#☆

1．3统计学分析应用SPSS 11．5统计软件，计量资料以±s表示，在进行方差齐性检验后，组间比较用单因素方差分析(ANOVA)，两两之间比较使用q检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

收缩压(SBP)比较，FG组较其他2组高(P ＜0．01)，RFG组高于IFG组(P＜0．05);FPG在3组间差异无统计学意义(P＞0．05);FINS比较，FG组高于其他2组(P ＜0．01)，IFG 组高于RFG组(P ＜0．01);ISI比较，FG组低于其他2组(P ＜0．01)，IFG组低于RFG组(P ＜0．01)。TG 比较，FG 组高于其他2组(P＜0．01)，IFG组高于RFG组;TC比较，RFG组低于其他2组(P＜0．01)，FG组和IFG组间差异无统计学意义(P ＞ 0．05);VLDL比较，FG 组高于其他2组(P ＜0．05)，IFG组和RFG组间差异无统计学意义(P＞0．05);FFA比较，FG组高于其他2组(P ＜0．01)，IFG组高于RFG组(P ＜0．01);LPL含量比较，FG组低于其他2组(P＜0．01)，IFG组高于FG组(P ＜0．01)。见表1。

3 讨论

IR是代谢综合征的中心环节，高血压又是该综合征的主要组成部分［3］;IR、高胰岛素血症和高血压密切相关。胰岛素是脂肪代谢的重要调节因素，它的作用包括抑制激素敏感脂肪酶和增强LPL活性。LPL是水解循环载脂蛋白中TG分子的主要反应酶，除了水解作用外，LPL还作为脂蛋白受体的配体，促进细胞摄取脂蛋白颗粒。随着高脂血症患者的增多和对脂毒性认识的深入，对LPL的研究得到了重视［4］。我们应用果糖饮食复制了IR动物模型，其血清TC、TG、VLDL和FFA均造成了不同程度增高，ISI明显降低，血清LPL含量降低，血压升高，并在FPG水平保持正常的情况下出现了高胰岛素血症。

厄贝沙坦是ARB类抗高血压药物，大规模临床试验如LIFE，VALUE证实ARB类药物可增强2型糖尿病患者的胰岛素敏感性［5，6］，研究表明厄贝沙坦可抑制转基因小鼠代谢综合征模型的高胰岛素血症、高血压和肥胖的发生［7］。厄贝沙坦的降脂机制可能为:(1)厄贝沙坦对AT1的阻断促进了脂肪细胞分化及其对FFA的摄取［8］;(2)通过抑制交感神经兴奋和增加胰腺胰岛素释放使脂肪组织LPL含量增量调节［9］。应用厄贝沙坦处理后的IR大鼠模型血压明显下降，ISI升高，血清TG、LDL、FFA降低，血清LPL含量升高。

罗格列酮是噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂，其作用是与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)结合并使其激活，调节与胰岛素作用相关的多种基因的表达;通过PPAR-γ的作用使LPL表达增加，加速TG分解，减少血清中TG水平［10］;罗格列酮还能够增加骨骼肌对FFA和TG的摄取，降低IR动物血糖、血浆胰岛素和TC水平［11］。高血压与胰岛素敏感性密切相关，罗格列酮可降低血浆FFA的浓度，改善胰岛素敏感性，降低血压［12］。Gaikwad等［13］研究发现罗格列酮能降低IR大鼠血糖、血浆胰岛素及TC水平，减弱血管紧张素Ⅱ的反应。大规模的临床试验PROactive证明，噻唑烷二酮类药物有一定的降血压作用［14］，其降压机制可能与该类药物影响肾素-血管紧张素调节系统有关。我们应用罗格列酮干预IRSD大鼠后，ISI升高，血清LPL含量增加，血清TC、TG、VLDL和FFA降低，且有轻度降低血压的作用。

综上所述，厄贝沙坦和罗格列酮均有不同程度的增加胰岛素敏感性、改善IR、降低血脂及血压的作用。厄贝沙坦比罗格列酮降压作用显著，而罗格列酮在改善IR和脂代谢方面的作用优于厄贝沙坦。

1 Eckel RH，Grundy SM，Zimmet PZ．The metabolic syndrome．Lancet，2005，365:1415-1428．

2 李光伟，Bennett PH．关于空腹血糖、空腹胰岛素乘积的倒数在流行病学研究中应用的补充说明．中华糖尿病杂志，2005，4:247-249．

3 何雾云，陈晓平．PPAR-γ激动剂的降压作用．心血管病学进展杂志，2008，29:313-316．

4 张小英，李圣贤，胡耀敏，等．野生型人LPL及联合突变体原核表达载体构建及抗体制备．上海交通大学学报(医学版)，2008，28:125-129．

5 Dahlof B，Devereux RB，Kjeldsen SE，et al．Cardiovascular morbidity and mortality in the losartan intervention for endpoint reduction in hypertension study(LIFE):a randomised trial against atenolol．Lancet，2002，359:995-1003．

6 Julius S，Kjeldsen SE，Weber M，et al．Outcomes in hypertensive patients at high cardiovascular risk treated with regimens based on valsartan or amlodipine:the VALUE randomised trial．Lancet，2004，363:2022-2031．

7 Ortlepp JR，Breuer J，Eitner F，et al．Inhibition of the renin-angiotensin system ameliorates genetically determined hyperinsulinemia．Eur J Pharmacol，2002，436:145-150．

8 刘强，佘强．伊贝沙坦与氨氯地平降压疗效比较及对血清游离脂肪酸的影响．中国药房，2010，21:3381-3383．

9 Saranteas T，Lolis E，Mourouzis C，et al．Effect of Losartan on insulin plasma concentrations and LPL activity in adipose tissue of hypertensive rats．Horm metab Res，2003，35:164-168．

10 况锦，赵春辉，陈健健．罗格列酮对2型糖尿病患者心血管系统的影响．医学综述，2009，15:2175-2178．

11 Askari B，Kanter JE，Sherrid AM，et al．Rosiglitazone inhibits acyl-CoA synthetase activity and fatty acid partitioning to diacylglycerol and triacylglycerol via a peroxisome proliferator-activated receptor-gamma-independent mechanism in human arterial smooth muscle cells and macrophages．Diabetes，2007，56:1143-1152．

12 Panunti B，Kunhiraman B，Fonseca V．The impact of antidiabetic thera-pies on cardiovascular disease．Curr Atheroscler Rep，2005，7:50-57．

13 Gaikwad AB，Viswanad B，Ramarao P．PPAR gamma agonists partially restores hyperglycemia induced aggravation of vascular dysfunction to angiotensin II in thoracic aorta isolated from rats with insulin resistance．Pharmacological Research，2007，55:444-447．

14 Dormandy JA，Charbonnel B，Eckland DJ，et al．Secondary prevention of macrovascular events in patients with type 2 diabetes in the PROactive Study(PROspective pioglitAzone Clinical Trial In macroVascular E-vents):a randomised controlled trial．Lancet，2005，366:1279-1289．