水飞雄黄与粗颗粒雄黄的药效学比较*

★ 任建锋 龚千锋* 钟凌云 易炳学 王丕明 朱龙涛 余香

（江西中医学院 南昌 330004）

雄黄（Realgar）为单斜晶系雄黄的矿石，主要成分为二硫化二砷（As2S2），具有解毒、杀虫、燥湿、祛痰、截疟等功效[1]。因生品含砷的氧化物，毒性较大，临床应用受到限制。为了对雄黄进行系统的品质评价，对雄黄饮片进行改变传统入药形式制成雄黄粗颗粒和水飞雄黄进行药效学比较研究，旨在为雄黄药材的临床应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

昆明小鼠，体重（22±2）g，雌雄各半，由江西中医学院实验动物中心提供（合格证号：SCXK（赣）2011-0001）。

1.2 实验材料

雄黄药材购于江西樟树天齐堂饮片有限公司，产地湖南，经江西中医学院葛菲教授鉴定为硫化物类矿物雄黄族雄黄。

水飞雄黄的制备：取雄黄粉10g样品至研钵中，加水3mL，研磨5 min至糊状，再加水适量搅拌1 min，静置2 min，倾取混悬液，下沉的粗粉继续研磨，如此反复操作数次，除去杂质，共加水3 000mL，合并各次混悬液，静置2 h，倾去上清液，抽滤，烘箱40℃，干燥2 h，研散，即得。

粗颗粒雄黄的制备：取块状雄黄至冰箱中冷藏，取出置研钵研磨粉碎，粉碎成粒径20目左右的颗粒（粗粉），即得。

分别取上2种药品过100目筛以4%的淀粉浆助悬，配置成0.013，0.0065，0.0033 g/mL的混悬液。

吲哚美辛肠溶片（山西云鹏制药有限公司，批号：A110801）；醋酸地塞米松片（浙江仙琚制药股份有限公司，批号：110603）；乌拉坦（国药集团化学试剂有限公司，批号：T20110214）。

酸枣仁水煎液的制作方法：称取干燥的酸枣仁20 g，加10倍量的水浸泡30 min，然后在电热套上煮沸，文火煎煮30 min，把水煎液过滤，再药渣里再加8倍量的水，用同样的方法煎煮，合并两次滤液，最后浓缩溶液的浓度至1g/mL，置4℃冰箱保存。

1.3 仪器与试剂

AB104-N万分之一电子分析天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；6mm打孔器；移液枪（eppendorf Reference 100μL）；冰醋酸；二甲苯；XZ-4小鼠自主活动仪（中国医学科学院药物研究所研制）

1.4 数据的处理

所得数据用SPSS16.0版统计软件统计分析。

1.5 实验方法[3]

1.5.1 镇痛实验

取昆明小鼠64只，雌雄各半，随机分成8组，给药组分别按高、中、低三个剂量组灌胃给药，对照组分别灌胃吲哚美辛和等体积的4%的淀粉浆。连续给药3天，末次给药后30 min，每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2mL，观察每只小鼠腹腔注射醋酸后20 min内出现扭体反应（腹部内凹，伸展后肢，臀部抬高作为观察项）的次数，计算镇痛百分率[2]。结果见表1。

表1 对小鼠醋酸所致扭体反应的影响（±s，n=8）

表1 对小鼠醋酸所致扭体反应的影响（±s，n=8）

注：与空白组比较，**P＜0.01有极显著差异。

镇痛率(%)31.754 13.507 6.398 53.318 41.232 17.536 90.521 0粗颗粒高剂量组粗颗粒中剂量组粗颗粒低剂量组水飞高剂量组水飞中剂量组水飞低剂量组吲哚美辛对照组空白组0.130 0.065 0.033 0.130 0.065 0.033 0.250等体积36.000±5.319**45.625±11.722 49.375±9.927 24.625±5.927**31.000±9.502**43.500±22.672 5.000±5.014**52.750±17.351组别 剂量/g•kg-1扭体数

1.5.2 抗炎实验

取健康昆明小鼠64只，雌雄各半，随机分成8组，给药组分别按高、中、低三个剂量组灌胃给药，对照组分别灌胃醋酸地塞米松和等体积的4%的淀粉浆。给药方法与剂量同1.4.1。末次给药后30 min，于小鼠左耳两面涂二甲苯每只20μL致肿，右耳不涂为正常耳。1 h后脱颈处死，用6mm的打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片，用万分之一电子天平称量，计算肿胀度[2]，结果见表2。

表2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响（±s，n=8）

表2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响（±s，n=8）

注：与空白组比较，*P＜0.05有显著性差异；**P＜0.01有极显著性差异。

组别粗颗粒高剂量组粗颗粒中剂量组粗颗粒低剂量组水飞高剂量组水飞中剂量组水飞低剂量组醋酸地塞米松对照组空白组剂量/g•kg-1 0.130 0.065 0.033 0.130 0.065 0.033 0.0013等体积肿胀度/mg 4.163±2.455*8.775±1.391 8.738±3.421 3.538±3.320**5.325±2.864 7.675±2.520 3.388±3.040**7.738±6.780肿胀率(%)28.222 41.698 41.176 19.391 26.916 39.120 21.332 41.991抑制率(%)47.011-13.409-12.924 54.281 31.179 0.808 56.219

1.5.3 镇静实验

取健康昆明种小鼠64只，雌雄各半，按体重随机分成8组，然后给药组分别灌胃2种药品，对照组分别灌胃酸枣仁水煎液和4%淀粉浆。连续给药5天，给药体积为0.2mL/10g，给药后30 min，将各组小鼠分别放入XZ-4小鼠自主活动仪中使其适应5 min后，测定各组小鼠5 min内的自发活动次数[2]。结果见表3。

表3 对小鼠自主活动的影响（±s，n=8）

表3 对小鼠自主活动的影响（±s，n=8）

注：与空白组比较，*P＜0.05有显著性差异；**P＜0.01有极显著性差异。

自发活动抑制率%0.57 0.50 0.08-4.12-3.05-3.25 43.80 0组别粗颗粒高剂量组粗颗粒中剂量组粗颗粒低剂量组水飞高剂量组水飞中剂量组水飞低剂量组酸枣仁对照组空白组剂量/g•kg-1 0.130 0.065 0.033 0.130 0.065 0.033 10.000等体积活动次数155.035±9.561 155.140±6.250 155.791±5.886 162.361±4.736*160.690±4.781 160.995±6.701 87.625±4.838**159

1.5.4 中枢抑制作用比较

取健康昆明种小鼠64只，雌雄各半，按体重随机分成8组，给药方法同1.5.3，连续给药5天，末次给药后30 min，各鼠分别腹腔注射20%乌拉坦溶液阈下剂量37.8mg/kg，即刻记录给药后15 min内各组小鼠翻正反射消失1 min以上的小鼠只数[2]，结果见表4。

表4 对小鼠入睡个数的影响（±s，n=8）

表4 对小鼠入睡个数的影响（±s，n=8）

注：与空白组比较，*P＜0.05有显著性差异。

睡眠发生率%37.5 25 25 25 25 12.5 62.5*12.5组别粗颗粒高剂量组粗颗粒中剂量组粗颗粒低剂量组水飞高剂量组水飞中剂量组水飞低剂量组酸枣仁对照组空白组剂量/g•kg-1 0.130 0.065 0.033 0.130 0.065 0.033 10.000等体积入睡数3 2 2 2 2 1 5 1

2 讨论

实验均采用灌胃方式给药，发现水飞雄黄高、中剂量组和粗颗粒雄黄高剂量组小鼠扭体次数均比空白对照组少，两者间均有极显著性差异（P＜0.01），说明水飞雄黄高、中剂量组和粗颗粒雄黄高剂量具有很好的镇痛作用，并且水飞雄黄中剂量组和粗颗粒雄黄中剂量组比较有显著性差异（P＜0.05），水飞雄黄中剂量组比粗颗粒雄黄中剂量组镇痛效果好。

粗颗粒雄黄高剂量组与空白对照组比较有显著性差异（P＜0.05），水飞雄黄高剂量组与空白对照组比较有极显著性差异（P＜0.01），均具有抗炎效果，但药效没有明显改变。

水飞雄黄高剂量组与空白组对照组比较，有显著性差异（P＜0.05），有镇静作用，酸枣仁对照组与空白组比较有极显著性差异（P＜0.01）。

中枢抑制作用比较酸枣仁对照组与空白组比较有显著性差异，给药后可使阈下剂量乌拉坦诱导的小鼠入睡率达62.5%，粗颗粒雄黄与水飞雄黄之间相同剂量组之间比较无统计学意义。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：中国医药科技出版社，2010：316.

[2]纪淑芳，张亚敏，谢福全，等.雄黄生品与酸奶飞炮制品的药效学比较[J].长春中医学院学报，2000，（16）1：3.

[3]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海：上海科学技术出版社，2006.10.