地中海贫血基因诊断对指导优生优育的价值分析

余燕飞

(重庆市永川区妇幼保健院检验科，重庆 402160)

地中海贫血(简称地贫)，是由于血红蛋白的珠蛋白肽链中某一种或几种合成受到抑制而引起的一组遗传性溶血性贫血，其临床表现不一，轻型可无明显症状，重型出生数日即出现贫血、肝脾肿大进行性加重，黄疸，并有发育不良，严重影响患儿健康，常危及患儿生命［1］。据世界卫生组织报告全世界大概有1.5亿人为血红蛋白病的基因携带者，每年出生的各类重症血红蛋白病患儿约30万。由于地中海贫血目前尚无有效的治疗方法，又直接影响我国人口素质，因此，地中海贫血的产前筛查工作显得尤为重要。本文回顾性统计分析我院2012年行地中海贫血产前筛查的孕妇的筛查结果及其基因突变构成比，为我区地贫孕妇开展遗传咨询及产前诊断提供良好的参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年1月至12月到我院产前门诊进行孕期保健孕妇7 996例，均做血常规筛查，其中Hb＜110 g/L，MCV＜80 FL的贫血孕妇，且经铁剂治疗无效者110例。

1.2 方法

1.2.1 MCV的测定 用法国ABX-80全自动血细胞分析仪及其配套的稀释液和溶血素试剂测定，实验前严格按照标准操作规程进行质量控制，标本为EDTA-K2静脉抗凝血2 ml。

1.2.2 地中海贫血的基因诊断 抽取枸橼酸钠静脉抗凝血5 ml送重庆市金域检验医学检验中心检查。α-地贫基因诊断采用 GAP-PCR 法，检测-α3.7、-α4.2、--SEA三种常见α珠蛋白基因缺失型。该医学中心验证过的基因型有(-α3.7/αα)(-α4.2/αα)(--/αα)(-α3.7/--)(-α4.2/--)，灵敏度为 100% ，特异性为100%。β-地贫基因诊断采用PCR结合反向斑点杂交法，检测17个常见突变位点(β0包括 Int、CD41-42、CD31、CD14-15、CD17、CD71-72、IVS-I-1、CD43、CD27/28;β+包括 IVS-Ⅱ-654、-28、-29、-30、-32、CAP、IVS-I-5、βE)。该医学中心验证过的突变位点:CD41-42、CD14-15、IVS-Ⅱ-654、-28、-29、CD71-72、CD17、βE、CAP、Int、CD27/28 等常见位点，灵敏度为100%，特异性为100%。

2 结果

110例地贫基因诊断中，确诊为地贫者79例，检测阳性率为71.82%，占总产检人数7 996例的0.99%，其中α地贫34例，占0.43%，β地贫45例(包括4 例 β-地贫合并 α-地贫)，占0.56%。

在34例α地贫中，α-地贫 1杂合子(--SEA/αα)21 例，占 61.76%;α-地贫 2 杂合子(3.7/4.2 型)12例，占35.29%(包括4例β地贫合并α-地贫2杂合子);α-地贫1和α-地贫2双重杂合子(H病)1例，占 2.94%，见表 1。

表1 α地贫杂合子基因型

在45例 β地贫中，CD41-42杂合子18例，CD17杂合子11例，IVS-Ⅱ-654杂合子9例，CD43杂合子3例，CD71-72杂合子2例，CD27/28杂合子1例，βE杂合子1例，见表2。

表2 β珠蛋白基因突变位点及其构成比

3 讨论

地中海贫血是一组由于珠蛋白肽链中某一种或几种合成受到抑制而引起的溶血性贫血，按其珠蛋白肽链合成受到抑制的类型，主要分为 α-和 β-地贫，按其临床症状的轻重，α-地贫可分为:静止型α-地贫(α-地贫2，缺失1个 α 基因);标准型 α-地贫(α-地贫1，缺失2个α基因);中间型α-地贫(又称HbH病，缺失3个α基因);重型α-地贫(又称Hb Bart’s胎儿水肿综合征，缺失4个α基因)。β-地贫分为:单杂合子地贫及双重杂合子或纯合子地贫及α、β复合型地贫。Hb H病、β0杂合β+是症状比较严重的存活型地贫，虽大部分能适应基本社会生活，但由于长期慢性溶血性贫血，可致患者肝脾肿大，骨骼变形;Hb Bart’s胎儿水肿综合征、β0纯合子或双重杂合子为致死性异常，可致胎儿宫内水肿及死胎，在孕中晚期易合并妊娠期高血压、子痫及产后出血等严重并发症，危及孕妇生命［2］。而产前筛查诊断的目的就是为了避免这些残疾儿的出生，提高新生儿的出生质量，实现优生优育。

在7 996例产检孕妇中，确诊为地贫者79例，占总产检人数的 0.99%，其中 α地贫34例，占0.43%，β地贫45例(包括4例是β-地贫合并α-地贫)，占0.56%，低于包碧惠等［3］报道的重庆地区α地贫阳性率0.61%，β-地贫阳性率2.68%的结果，这是由于本实验室尚未开展血红蛋白电泳分析，仅依靠血常规MCV、Hb及临床治疗效果进行筛查，有很大程度上地漏检。据容永忠等［4］研究发现:经基因确诊的149例患者中，有21例患者MCV大于82 FL，因此，建议有条件的医院，产前筛查最好直接进行血红蛋白电泳分析或基因诊断，结合血常规、红细胞渗透脆性试验等指标，扩大筛查范围，以减少漏诊。

α-地贫的分子基础主要是基因的缺失，而东南亚缺失型(--SEA/αα)是我国最常见的缺失类型，它是HbH病和Hb Bart’s胎儿水肿综合征的分子基础，据报道95%以上的α-地贫缺失类型为--SEA/αα，该缺失型在人群中的携带率为4%［5］。而Hb Bart’s胎儿水肿综合征是由--SEA基因的纯合子构成，如果夫妻双方均为东南亚缺失型地贫时，其子女有25%的几率患此病，而--SEA/αα 与静止型 α-地贫(-α3.7/αα 或-α4.2/αα)组合都会构成缺失型 HbH 病，若夫妻一方为东南亚缺失型α-地贫，另一方为静止型α-地贫时，他们的子女有25%的几率患HbH病。本研究结果统计分析发现，永川地区东南亚缺失型的检出率为61.76%，静止型α-地贫即α-地贫2杂合子的检出率为35.29%，可见 HbH病和 Hb Bart’s胎儿水肿综合征在本地区都有很高的发生风险。因此，为控制HbH病和Hb Bart’s胎儿水肿综合征患儿的出生，当孕产妇被确诊为东南亚缺失型α-地贫时，其配偶也必须同时进行检查，若双方均为地贫阳性患者，其胎儿必须接受产前诊断，以证实胎儿是否属于重型地中海贫血。在统计中我们发现，79例筛查阳性孕妇中，其配偶也同时接受地贫筛查的只有5例，由此可见大家对地中海贫血的认识及其重视程度不够，这也为我们妇幼保健工作的更好开展提出了更高的要求。

绝大多数β-地贫是由于β珠蛋白发生点突变所致，世界范围已发现有170多种引起β-地贫的基因突变，中国人中已发现有29种。本研究共检出7种β-地贫的基因突变类型，其中，CD41/42是最常见的β-地贫基因突变类型，与国内的其他报道［6］相同。但由于实验方法的局限性，不排除其它缺失及突变的发生，α-地贫的余值风险为 3.97%，β-地贫的余值风险为2.02%。

永川每年到沿海的务工人员较多，而沿海地区又是地中海贫血的高发区域，如果婚配生育前未经过相关筛查，那么势必会使地贫患儿的出生阳性率增加。重型地中海贫血严重威胁着患儿的生命，极大影响家庭和儿童的生活质量。由于目前地中海贫血尚无有效的根治方法，因此，加强遗传咨询、婚前及产前筛查可以预先发现重度地中海贫血患儿，从而减少地中海贫血患儿的出生率，提高人口素质，实现优生优育。

［1］卢玖世.2009年某院产前筛查地中海贫血情况分析［J］.中外医疗，2011，09(25):174.

［2］赵祖英.Hb Bart’s胎儿水肿综合征30例临床分析［J］.海南医学，2012，17(23):51-52.

［3］包碧惠，胡 华，姚 宏，等.地中海贫血的产前筛查和基因诊断［J］.第三军医科大学学报，2008，30(5):453-455.

［4］容永忠，李 斌，赖兆新，等.地中海贫血产前筛查及基因诊断研究［J］.中国优生与遗传杂志，2006，14(5):7-9.

［5］XU X M，Zhou Y Q，Luo G X，et al.The prevalence and spectrum of alpha and beta thalassaemia in Guangdong Province:implications for the future health burden and population screening［J］.J Clin Pathol，2004，57(5):517-522.

［6］周玉球，李文典，吴丽蓉，等.婚前地中海贫血的大人群筛查及预测性产前诊断［J］.中国优生优育，1999，10(2):67-69.