甲酯化植物油基烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂高效液相色谱分析

苏旺苍， 吴仁海， 王恒亮， 孙兰兰， 宋文岩， 孙晓敏， 高新菊， 张永超

(河南省农业科学院植物保护研究所/河南省农作物病虫害防治重点实验室/农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室，河南郑州 450002)

甲酯化植物油基烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂高效液相色谱分析

苏旺苍， 吴仁海， 王恒亮， 孙兰兰， 宋文岩， 孙晓敏， 高新菊， 张永超

(河南省农业科学院植物保护研究所/河南省农作物病虫害防治重点实验室/农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室，河南郑州 450002)

采用高效液相色谱法分析甲酯化植物油基烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂，使用C18反相柱和紫外可变波长检测器，以乙腈、水和乙酸为流动相，用外标法对有效成分进行分析和定量。烟嘧磺隆、乙草胺标准差分别为0.031 1、0.042 1，变异系数分别为0.31%、0.11%，平均回收率分别为99.83%、99.81%。

烟嘧磺隆；乙草胺；高效液相色谱；分析

玉米是重要的粮食和饲料作物，由于便于机械化耕种与收获，管理简便，已发展成我国第一大作物。玉米生长于高温多雨的季节，杂草防治一直是玉米田间管理的重要难题，尤其是近年来广泛采用贴茬直播等简易种植技术，杂草出苗期不集中，草龄差异较大，使得玉米田除草剂要具备优良的杀草效果与封闭效果。河南省农业科学院植物保护研究所将烟嘧磺隆与乙草胺进行混配，兼备苗前除草和苗后封闭的双重功效，同时以甲酯化植物油为载体，大大提升了产品的除草效果、稳定性及环境的友好性，具有较好的市场前景。

烟嘧磺隆与乙草胺是大宗型除草剂[1-3]，单剂的分析方法已有报道[4-5]，但其混配制剂的分析方法尚未见介绍，尤其是加入甲酯化植物油之后对乙草胺的干扰较大[6]。本研究采用高效液相色谱法，通过分析烟嘧磺隆和乙草胺的理化性质，建立了在同一色谱条件下定量分析试样中烟嘧磺隆、乙草胺甲酯化植物油剂的分析方法，具有较高的准确度和精密度，该方法操作简单、快速、重复性好。

1 材料与方法

1.1 试剂和溶液

乙腈，为色谱级；水，为超纯水；冰乙酸，为分析纯；烟嘧磺隆标样(97.0%原药，德国Dr. Ehrenstorfer公司)；乙草胺标样(97.7%原药，美国Accustandard公司)；试样：50%烟嘧磺隆·乙草胺油悬浮剂(河南省农业科学院植物保护研究所农药实验厂)。

1.2 仪器

Agilent1200高效液相色谱仪；紫外检测器；ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm，Agilent)；微量进样器(25 μL)；天津奥特赛恩斯AS3120型超声波清洗器；梅特勒-托利多AB104-S分析天平。

1.3 色谱条件

流动相：V(乙腈) ∶V(pH值4.0的乙酸水溶液)=55 ∶45；流速0.8 mL/min；检测波长220 nm；柱温30 ℃；进样体积10 μL；保留时间：烟嘧磺隆约4.1 min，乙草胺约18.8 min。烟嘧磺隆和乙草胺的高效液相色谱图见图1。

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制 分别称取烟嘧磺隆标样0.12 g、乙草胺标样0.03 g(均精确至0.000 2 g)，置于同一50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超声溶解，冷却至室温后用乙腈稀释至刻度，摇匀，静止，备用。

1.4.2 试样溶液的配制 称取试样0.24 g (精确至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超声溶解，冷却至室温后用乙腈稀释至刻度，摇匀，静止，备用。用 0.45 μm孔径滤膜过滤。

1.4.3 测定 在上述色谱操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各相对响应值，待相邻2针的相对响应值变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样测定。

1.4.4 计算 将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液的峰面积分别进行平均，按式(1)计算试样中烟嘧磺隆和乙草胺的质量分数X(%)：

(1)

式中：A1为标样溶液色谱图上烟嘧磺隆(或乙草胺)峰面积平均值，A2为试样溶液色谱图上烟嘧磺隆(或乙草胺)峰面积的平均值，m1为标样的质量(g)，m2为试样的质量(g)，P为标样中烟嘧磺隆(或乙草胺)的质量分数(%)。

2 结果与分析

2.1 流动相的确定

为了能够有效分离烟嘧磺隆和乙草胺，根据二者化合物的结构特点，选择ZORBAX SB-C18不锈钢柱，先后以甲醇-水和乙腈-水为流动相进行试验。在甲醇-水系统时，乙草胺的峰形很宽并拖尾，同时甲醇的比例低于60%，乙草胺的紫外吸收受溶剂的影响较大，而在乙腈-水流动相中对紫外吸收影响不明显。考虑到乙草胺的拖尾问题，选用乙酸作为减尾剂，可得到理想的峰形。因此，最终确立乙腈-酸化水(乙酸调节pH值4.0，体积比55 ∶45)为流动相，流速为0.8 mL/min。

2.2 检测波长的选择

吸收峰面积直接受波长的影响，利用可变紫外波长检测器在210～290 nm波长范围内进行选择，发现220 nm作为检测波长时，烟嘧磺隆和乙草胺均有较好的吸收，2种有效成分在220 nm处的色谱图分离、峰形均很好，且无杂质干扰，因此最终选定220 nm作为检测波长。

2.3 方法的线性关系测定

用移液管移取0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00 mL含烟嘧磺隆100 μg/mL、乙草胺100 μg/mL的标准溶液，分别置于10 mL容量瓶中，用流动相加至刻度，超声溶解。在上述色谱条件下进行测定，分别以烟嘧磺隆和乙草胺溶液的浓度(μg/mL)为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，求其回归方程。烟嘧磺隆的线性方程为y1=33 547x-17 352，线性相关系数为0.998 1；乙草胺的线性方程为y2=53 533x-32 669，相关系数为0.997 9(图2)。

2.4 分析方法精密度测定

选取有代表性的烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂试样1个，在上述色谱操作条件下进行5次重复测定，烟嘧磺隆、乙草胺的标准差分别为0.031 1、0.042 1，变异系数分别为0.31%、0.11%(表1)。

表1 分析方法精密度试验结果Table 1 The precision test results of analysis methods

2.5 分析方法准确度测定

在已知质量分数的样品中加入一定量的烟嘧磺隆和乙草胺标准品，在上述测定条件下测得烟嘧磺隆、乙草胺的平均回收率分别为99.83%、99.81%(表2)。

表2 分析方法添加回收率试验结果Table 2 The recovery test results of analysis methods

3 结论

本试验采用的方法可同时测定甲酯化植物油基烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂中的2种有效成分，具有定量准确、重复性好、分析速度快、分离效果好、操作简便等特点，符合定量分析的要求，能够满足对产品的常规分析和质控研究的要求。

[1]张 琳，胡 永，王伟民，等. 6%烟嘧磺隆sc防除玉米田杂草的效果[J]. 杂草科学，2012，30(2)：58-60.

[2]潘 浪，徐洪乐，罗小娟. 烟嘧·莠去津不同剂型对后茬作物幼苗的影响[J]. 杂草科学，2012，30(2)：29-33.

[3]朱海霞，魏有海，郭良芝，等. 81. 5%乙草胺乳油防除春油菜田野燕麦效果[J]. 杂草科学，2012，30(3)：53-54.

[4]刘利云. 4%烟嘧磺隆悬浮剂的高效液相色谱分析[J]. 现代农药，2006，5(3)： 33-34.

[5]戴 权，秦 岭，易秀成. 50%乙草胺水乳剂的气相色谱分析研究[J]. 安徽化工，2004，30(5)：53-54.

[6]王成菊，张文吉，李学锋，等. 油类助剂在除草剂中应用及开发前景[J]. 精细化工，2002，19(B08)：91-93，105.

AnalysisofAMethylatedSeedOil-basedSynergisticMixtureofNicosulfuron·AcetochlorbyHPLC

SU Wang-cang， WU Ren-hai， WANG Heng-liang， SUN Lan-lan， SONG Wen-yan， SUN Xiao-min， GAO Xin-ju， ZHANG Yong-chao

(Institute of Plant Protection，Henan Academy of Agricultural Science/Henan Key Laboratory for Control of Crop Diseases and Insect Pests/IPM Key Laboratory in Southern part of North China for Ministry of Agriculture，Zhengzhou 450002，China)

An HPLC method was developed for the quantitative determination of a methylated seed oil-based synergistic mixture of nicosulfuron·acetochlor using an C18column with a variable wavelength UV detector，and a mobile phase of acetonitrile and water，and an external standard. Standard deviations，coefficients of variation，and average recovery were 0.0311，0.31%，and 99.83% for nicosulfuron，and 0.0421，0.11%，and 99.81% for acetochlor，respectively.

nicosulfuron；acetochlor；HPLC；analysis

A

1003-935X(2013)03-0048-03

苏旺苍，吴仁海，王恒亮，等. 甲酯化植物油基烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂高效液相色谱分析[J]. 杂草科学，2013，31(3)：48-50.

2013-05-02

公益性行业(农业)科研专项经费(编号：201203098)。

苏旺苍 (1981—)，男，河南内黄人，博士，助理研究员，从事农药残留、合成研究。E-mail：suwangcang@126.com。

吴仁海，博士，副研究员，从事农药剂型和除草剂应用研究。E-mail：laohaige@163.com。