丹参饮口服液的质量标准鉴定方法分析

王跃红

长春市双阳区中医院，吉林长春 130600

临床上应用的丹参饮口服液为丹参、砂仁、檀香3味中药材经提取分离、浓缩制成的一种口服液，主要功效为活血祛瘀、行气止痛，主要用于治疗气滞血瘀引起的心胃诸痛。临床效果比较理想[1]。本次研究中出于对丹参饮口服液的质量标准鉴定方法进行分析探讨的目的，分别采取薄层色谱、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法对丹参进行鉴别、对丹参素钠含量进行检测，现汇报实验结果如下。

1 仪器与试药

1.1 实验仪器

实验中所用仪器包括我实验室现有的高效液相色谱仪、紫外分析仪、双光束紫外可见分光光度计；还会用到电子天平、脉动真空压力蒸汽灭菌器等。

1.2 实验药材与试剂

本次实验中所用药材包括丹参、檀香和砂仁药材，丹参饮口服液。所用试剂包括：丹参素钠对照品，甲醇为色谱纯，水为实验室应用的纯化水，其他所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 丹参的薄层鉴别

对照品：丹参素钠加甲醇制成浓度为2 mg/mL溶液；对照药材溶液：1 g丹参药材经水煎煮后，放冷，过滤后经盐酸条pH值至2.0,经20 mL乙酸乙酯提取，蒸干，残渣经1 mL甲醇溶解待用；供试品溶液：20 mL丹参饮口服液，经超声处理后，经盐酸条pH至2.0,过滤，滤液经乙酸乙酯提取，蒸干，残渣中加1 mL甲醇溶液待用。另设阴性对照品，即不含有丹参药材的丹参饮口服溶液[2]。

薄层色谱展开剂为：氯仿-丙酮-甲酸（10:4:2），薄层板为硅胶G板。实验时，吸取10 uL上述所制备的四种溶液，分别点在同一块硅胶G薄层板上，在上述展开剂中展开，而后经氨蒸汽显色，在紫外灯下进行检视。结果发现，供试品与对照品在相同的位置存在同颜色的荧光斑点，并且阴性对照组无明显干扰。详见下图。

2.2 紫外-可见分光光度法对丹参素钠的含量进行检测

对照品：丹参素钠对照品0.0083 g，在25 mL的棕色量瓶中，加甲醇定容，准确吸取2 mL，在25 mL容量瓶中经甲醇定容，摇匀后待用；供试品：精密量取丹参饮口服液5 mL，蒸干后将残渣经甲醇溶解，在50 mL经甲醇定容，摇匀后过滤，吸取滤液5 mL在100 mL容量瓶中加甲醇定容，摇匀后既得供试品溶液[3]。

实验时，采用3 mL的甲醇溶液进行参比，经紫外－可见分光光度计展开基线校准，而后不改变参照池，取对照品3 mL，放置在空置的样品池中，经紫外－可见光谱展开测定；紫外-可见分光光度计的相关参数为：扫描范围在210~300 nm之间，中速采样间隔为1 nm。最终结果发现，在282 nm处，丹参素钠紫外－可见光谱图存在最大吸收峰，阴性样品未出现吸收峰。在282 nm处对3批供试品的吸光度进行了检测，结果分别为0.609,0.613,0,624，RSD为0.8%。这一结果证实，该检测方法准确可靠。最终计算得到该批样品每1 mL中含有丹参素钠吸光度不低于0.6。

2.3 高效液相色谱法对丹参素钠含量进行检测

所用色谱柱为：Inertsil ODS-C18柱，规格为250 mm×4.6 mm，5 um。柱温为40℃，流动相为：甲醇－1%的冰乙酸=13:87，检测时采取二元梯度洗脱法，流速控制在1.0 mL/min，检测波长为280 nm,进样量为10 uL。

表1 加样回收实验检测结果统计

对照品：精称丹参素钠对照品0.0083 g，经甲醇在25 mL棕色量瓶中溶解后定容，所得溶液浓度为0.332 mg/mL，待用；供试品：精密吸取丹参饮口服液适量，经0.45 um的微孔滤膜过滤后待用[4]。

在实验时，分别吸取上述所制备的对照品和供试品溶液10uL,注入到液相色谱仪后，测定结果，在线性实验中所得丹参素钠回归方程为A=105C-649876，（n=5），丹参素钠在0.83~6.64 ug内具有良好的线性关系；精密度实验结果显示，峰面积均值为1448754，RSD为1.15%，证实实验仪器的精密度良好；稳定性实验结果显示，峰面积平均值为1410772，RSD为3.19%，证实供试品溶液具有良好的稳定性；重复性实验结果显示，丹参素钠的平均含量为0.18mg/g，RSD为1.03%，证实分析方法的重复性良好；加样回收实验结果显示，丹参素钠的平均回收率为97.26%，RSD为1.15%。证实分析方法准确可靠。详见表1。

3 讨论

在临床上丹参经常用来对妇科病、缺血性中风、冠心病、动脉粥样硬化等疾病展开治疗，活性成分包括脂溶性、水溶性两类，脂溶性成分包括：隐丹参酮、丹参酮、丹参酮ⅡA等。最近几年，在国内外对丹参的脂溶性成分展开了诸多的实验研究，在丹参中分离得到二萜醌类化合物超过40种，并且存在有不同的药理作用[5]。对于传统中医药临床治疗工作而言，丹参多数采取水煎的方式，也就是说应用的多位水溶性成分，因此对丹参的水溶性成分展开实验研究的意义更大。曾有相关实验证实，丹参的水溶性成分包括丹参素、迷迭香酸、原儿茶醛、紫草酸以及丹酚酸（A、B、C、D、E、F、G）等。近几年研究制成的丹参饮口服液在临床中得到了广泛的应用，其对气滞血瘀引起的心胃诸痛具有良好的临床治疗效果[6]。本次研究中出于对丹参饮口服液的质量标准鉴定方法进行分析探讨的目的，分别采取薄层色谱、紫外－可见光谱以及高效液相色谱法对丹参饮口服液中丹参素钠的含量展开了检测和鉴别，最终发现，本次实验中所建立的丹参素钠高效液相色谱法具有较强的专属性，且其重现性好，操作简单，结果可靠，在丹参饮口服液质量控制中具有重要作用，值得关注。

[1] 蒲清荣,陈玉兰,黄锐,等.丹参饮口服液水提取工艺研究[J].药物评价研究,2012,35(4):270-271.

[2] 朱荣,朱斌.妇女痛经丸质量控制标准鉴定研究[J].临床合理用药,2012,5(2B):27-28.

[3] 刘省存,凡小庆,陈先亮,等.不同产地丹参的紫外光谱[J].光谱实验室,2011,28(2):573-574.

[4] 李化,于艳秋,杨滨.黄酮化合物与Fe（Ⅱ）络合反应的动力学研究[J].中国实验方剂学杂,2010,16(17):99-100.

[5] 李海燕,李振国,宋汉敏,等.HPLC测定冠心生脉口服液中丹参素钠的含量[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(12):78-79.

[6] 周静,李惠芬,王洪志,等.丹参水溶性成分与脂溶性成分抑菌作用的考察[J].时珍国医国药,2008,19(9):2130.