眩晕定方对后循环缺血性眩晕家兔血脂水平及椎动脉粥样硬化的影响1）

刘春华，颜 旭，邓浩庆，王净净，彭逢春，冯 娜

后循环缺血性眩晕（posterior circulation ischemia vertigo，PCIV）的主要病因是动脉粥样硬化，椎动脉起始段是后循环动脉发生粥样硬化狭窄最常见的部位，是造成后循环缺血的主要原因之一［1］。长期的临床实践中总结了眩晕定方治疗PCIV，取得了满意疗效［2，3］。为了进一步阐明眩晕定方可能的作用机制，复制了符合病证结合特征的家兔模型，观察该方对家兔血脂水平及椎动脉粥样硬化的影响。

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．1．1 动物及饲料 健康成年新西兰白兔60只，由湖南中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（湘）2009－0012。雌雄各半，清洁级，体重为（2．0±0．3）kg，兔龄在（3～4）个月，饲养环境室温（10～20）℃，湿度65%～70%。高脂饲料（每100g高脂饲料含普通饲料79g）和普通饲料，由湖南中医药大学实验动物中心提供；胆固醇，购自长沙丽欣生物（CAS号：57－88－5）；蛋黄粉，中国粮油食品厂（漯河）生产（批号：20120914）；猪油，自行购买猪板油炼制。

1．1．2 药物与试剂 眩晕定方由黄芪、当归、党参、川芎、丹皮、地龙、葛根、丹参等药组成，所有中药饮片均购自湖南振兴中药饮片实业有限公司（GMP认证号：湘 M0415），由湖南中医药大学附属中西医结合医院制剂室制备成浓缩液，无菌分装（为方便实验操作，分别制成浓度相当于原生药1．0g／mL和2．0g／mL两个规格）。养血清脑颗粒，由天津天士力制药股份有限公司生产（批号：120923），每袋4g，15袋／盒。血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）和三酰甘油（TG）测定试剂盒，日本积水医疗科技有限公司产品。

1．1．3 仪器 C800全自动生化仪，美国雅培公司生产；DMLB型双目显微镜，德国LEICA公司产；325型石蜡切片机，英国Shandon公司生产；LBY－N6B血液流变仪，北京普利生产品。

1．2 动物分组及处理 将60只兔子分笼安静适应性喂养1周后，按体重由小到大编号，随机选取8只为空白对照组，其余采用文献方法造模［4，5］。空白组予自由饮水，进食普通家兔饲料；造模动物自由进水、限量普通饲料＋限量高脂饲料喂食。造模过程中，随机选取8只为眩晕定预防组，于造模第4周末给予灌胃眩晕定方中剂量7．66g／（kg·d），以预防性干预直至实验结束，且第4周末以后改为普通饲料喂养；其余44只造模至第6周结束时，实际成功32只，随机分为模型对照组、养血清脑颗粒组0．575g／（kg·d）及眩晕定高剂量组15．32g／（kg·d）、眩晕定中剂量组7．66g／（kg·d），每组各8只，分别予以灌胃相应药物干预，共给药2周，给药期间均以普通饲料喂养。

1．3 检测项目与方法

1．3．1 血脂检测 家兔空腹禁食、禁水8h后，抽取耳缘静脉血（不加抗凝剂）2mL～3mL，由湖南中医药大学附属中西医结合医院生化室采用酶联分光光度法测定血清TC、TG、LDL－C。1．3．2 血液流变学指标的测定 动物空腹禁食、禁水8h后，抽取耳缘静脉血2mL（加1．25×104U／mL，肝素0．2mL），经循环水浴（37℃），通过血液流变仪测定全血黏度，每次样本量为1 mL，每个样本测量2次，取其均值，黏度计转速范围为5／s（低切）、30／s（中切）、200／s（高切）。

1．3．3 椎动脉粥样硬化形态学观察 于实验第8周末，完成以上检测项目后，取实验家兔椎动脉，石蜡切片染色，光学显微镜下观测形态学改变。

2 结 果

2．1 动物存活情况 空白组第7周灌胃过程中死亡1只，实验结束时存活7只；眩晕定预防组第5周、第7周灌胃过程中各死1只，实验结束时存活6只；模型组、眩晕定中剂量组实验结束时均存活；眩晕定高剂量组第7周灌胃过程中死亡1只、养血清脑颗粒组第8周灌胃过程中死亡1只，实验结束时各存活7只。2．2 对家兔血脂水平的影响 与空白组相比，模型组血清TC、TG、LDL－C水平显著增高，差异有统计学意义（P＜0．01）；与模型组相比，眩晕定高剂量组与预防组、养血清脑颗粒组血清TC、TG、LDL－C水平明显下降（P＜0．05或P＜0．01），提示各组药物干预后可以有效改善血脂水平。各药物组间比较，眩晕定高剂量组与预防组无统计学意义（P＞0．05），而眩晕定高剂量组、预防组与眩晕定中剂量组、养血清脑颗粒组有统计学意义（P＜0．05），说明眩晕定方高剂量组及预防组对血脂水平的改善优于眩晕定方中剂量组及养血清脑颗粒组。详见表1。

表1 各组家兔血清TC、TG、LDL－C水平比较（±s） mmol／L

表1 各组家兔血清TC、TG、LDL－C水平比较（±s） mmol／L

与空白组比较，1）P＜0．01；与模型组比较，2）P＜0．05，3）P＜0．01；与养血清脑颗粒组比较，4）P＜0．05，5）P＜0．01

组别 n TC TG LDL－C空白组 7 2．10±0．240．78±0．20 1．05±0．31模型组 8 14．94±0．701） 1．61±0．441） 13．80±0．381）眩晕定高剂量组 7 10．46±1．043）5） 0．84±0．323）4） 9．67±0．533）5）眩晕定中剂量组 8 14．20±0．872） 1．19±0．392） 13．22±0．552）养血清脑颗粒组 7 14．17±0．652） 1．20±0．362） 13．37±0．422）眩晕定预防组 6 10．35±0．963）5） 0．84±0．273）4） 9．16±0．573）5）

2．3 对家兔血液流变学指标的影响 与空白组比较，模型组全血黏度高、中、低切水平显著增高（P＜0．01）；与模型组相比，各药物干预组全血黏度高、中、低切水平均显著降低（P＜0．01），表明均可改善实验家兔血黏度。其中眩晕定方高、中剂量组及预防组间无统计学意义（P＞0．05），而眩晕定各组均低于养血清脑颗粒组（P＜0．05），提示眩晕定方在改善血黏度优于养血清脑颗粒。详见表2。

表2 各组家兔血液流变学全血黏度水平比较（±s） mPa·s

表2 各组家兔血液流变学全血黏度水平比较（±s） mPa·s

与空白组比较，1）P＜0．01；与模型组比较，2）P＜0．01；与养血清脑颗粒组比较，3）P＜0．05

组别 n 高切 中切 低切空白组7 4．03±0．30 4．10±0．44 9．07±0．68模型组 8 4．60±0．271） 5．12±0．291） 12．18±0．641）眩晕定高剂量组 7 3．96±0．262）3） 4．02±0．352）3） 8．99±0．412）3）眩晕定中剂量组 8 3．99±0．262）3） 4．07±0．292）3） 9．06±0．372）3）养血清脑颗粒组 7 4．59±0．27 5．06±0．27 12．21±0．62眩晕定预防组 6 4．00±0．222）3） 4．03±0．302）3） 9．01±0．412）3）

2．4 对家兔椎动脉粥样硬化的影响 光镜下各组家兔椎动脉显微形态学显示，空白组：动脉管腔无狭窄，管壁光滑未增厚，动脉内膜连续，无脱落紊乱；模型组：动脉壁纤维组织增生、变厚，管腔重度狭窄；眩晕定高剂量组：动脉内膜增厚，平滑肌细胞排列紊乱、增生、变性；眩晕定中剂量组：动脉管壁增厚，管腔变窄；眩晕定预防组：平滑肌细胞排列稍紊乱，管壁轻度增生、增厚，管腔轻度狭窄；养血清脑颗粒组：动脉内膜增厚、不光滑、内皮细胞变性，平滑肌细胞排列异常，管壁增厚。结果提示，眩晕定高剂量组及预防组家兔椎动脉粥样硬化的改善程度要优于中剂量组与养血清脑颗粒组。

3 讨 论

脑血管疾病是人类特别是老年人严重致残和死亡的重要原因之一，缺血性脑血管病是最常见的亚型［6，7］，后循环缺血（posterior circulation ischemia，PCI）约占其中的20%［8］。椎－基底动脉系统通过基底动脉和（或）小脑下前动脉的深穿支供应前庭神经核，通过迷路动脉供应半规管。由于前庭神经通路广泛分布于脑干和小脑，前庭终末感受器也由椎－基底动脉系统供血，加之迷路没有侧支血管网供应，对缺血十分敏感。因此，PCI易影响前庭神经系统的血流供应，造成前庭神经核和半规管短暂性缺血发作，出现眩晕症状［9］，称为后循环缺血性眩晕。PCIV的主要病因是动脉粥样硬化，年龄＞55岁、男性、缺血性心脏病、既往脑卒中或短暂性脑缺血发作（TIA）病史、高血压、糖尿病、血脂异常、吸烟、精神压力等均属于PCI性眩晕的危险因素［10］。椎动脉起始段是后循环动脉发生粥样硬化狭窄最常见的部位，是造成后循环缺血的主要原因之一［1］。

眩晕定方是导师王净净教授的经验方，在归纳、总结中医学对“眩晕”病因病机和现代医学对后循环缺血性眩晕病因病理的认识，结合了现代药理学研究，在“补阳还五汤”基础上，创制了该方。以“气虚血瘀，脑失所养，故头晕目眩”作为立论依据，以黄芪、归尾、川芎、丹皮、丹参、地龙、防风、葛根等11味药组成。方中以黄芪、葛根为君药，黄芪培补脾肺之气，令气旺血行，瘀去则络通；川芎活血行气，上行头目，为血中之气药，归尾活血补血，两者性温，丹皮活血散瘀，丹参活血祛瘀、养血安神，两药味辛微寒，四药寒温中和，合而为臣，辅佐君药，共达活血化瘀之效；配以熄风通络之虫类药地龙，善散外风之防风为佐使，共奏益气升清、活血化瘀、熄风定弦之功效。既往实验研究，该方能有效增加血管性眩晕气虚血瘀证模型家兔的脑血流量，降低血液黏度［11］，亦显示该方对后循环缺血性眩晕气虚血瘀证患者有良好的临床疗效［3］。本研究结果表明，眩晕定方有降低PCIV家兔模型血脂水平的趋势（可能因干预时间只有14d，未能显示其明显降脂疗效），降低家兔血黏度，改善椎动脉动脉粥样硬化，这可能是其作用机制之一；而眩晕定方预防组的疗效较之其他各组（甚至是眩晕定高剂量组）均有显著性差异，提示我们在去除高脂饮食危险因素后，尽早预防性给以中等剂量的眩晕定方，可能通过逆转动脉粥样硬化，达到改善后循环缺血、防止后循环缺血性眩晕的发生。

［1］ 朱琳．后循环缺血患者脑主要供血动脉病变及危险因素分析［J］．脑与神经疾病杂志，2011，19（5）：368－371．

［2］ 王净净，潘向军，黄云峰．眩晕定方治疗气虚血瘀型老年性眩晕30例临床研究［J］．中医药导报，2006，12（3）：369－373．

［3］ 田丽君，肖磊，王净净．自拟眩晕定方治疗气虚血瘀型眩晕30例疗效观察［J］．中医药导报，2011，17（3）：21－23．

［4］ 刘春华，王净净，黄云峰．血管性眩晕症气虚血瘀型动物模型的建立［J］．中华现代中西医结合杂志，2006，3（22）：2017－2022．

［5］ 王净净，黄云峰，刘春华．建立实验性眩晕动物模型的方法与体会［J］．湖南中医学院学报，2006，26（1）：50－51．

［6］ Zhang LF，Yang J，Hong Z，et al．Proportion of different subtypes of strokes in china［J］．Stroke，2003，34（4）：2091－2096．

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［8］ Savitz SI，Caplan LR．Vertebrobasilar disease［J］．N Engl J Med，2005，352（26）：18－26．

［9］ 中华医学会神经病学分会中华神经病杂志编辑委员会．眩晕诊治专家共识［J］．中华神经科杂志，2010，43（5）：369－373．

［10］ 中国后循环缺血专家共识组．中国后循环缺血的专家共识［J］．中华内科杂志，2006，45（9）：786－787．

［11］ 王净净，黄云峰，刘春华，等．眩晕定方对兔血管性眩晕气虚血瘀证模型血液流变学和脑血流图的影响［J］．湖南中医药大学学报，2007，27（4）：26－29．