Th17细胞相关因子与寻常型银屑病的相关性研究＊

叶 萍，黄伟林，郑 力

（深圳市罗湖区人民医院：1.皮肤科；2.药剂科，广东深圳518001）

根据产生细胞因子和生物功能的不同，传统上将CD4＋T细胞分为Th1和Th2细胞亚群。Th1细胞介导细胞免疫，Th2细胞介导体液免疫。最近的研究发现一类不同于Th1和Th2的新型的CD4＋T细胞亚群，此亚群细胞产生白细胞介素（IL）－17、IL－6和肿瘤坏死因子－α（tumor necrosis factor－alpha，TNF－α），被称为 Th17细胞［1－2］。近年来，Th17细胞及其相关的细胞因子的作用越来越受到人们的关注。本研究中，采用双抗体夹心亲和素－生物素过氧化物酶复合物酶联免疫吸附试验（ABC－ELISA）对不同病情严重程度的银屑病患者血清中Th17细 胞 相 关 因 子IL－17、IL－23、IL－6 和 转 化 生 长 因 子－β（transforming growth factor beta，TGF－β）的水平进行检测，以探讨Th17细胞相关因子在银屑病发病中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2009年10月至2010年3月在本院及协作医院皮肤科门诊就诊的寻常性银屑病患者30例（银屑病组），其中男20例，女10例，年龄16～65岁，病程2周至20年，按病情分为两组：静止期组11例，进行期组19例。入选标准：（1）临床确诊为寻常性银屑病；（2）2个月内未使用维A酸类药物、糖皮质激素及免疫抑制剂等系统治疗，2周内无外用药物治疗；（3）入选病例签署知情同意书。排除标准：（1）合并严重心、肝、肾疾患；（2）合并严重感染、恶性肿瘤和其他自身免疫性疾病；（3）关节型、脓疱型和红皮病型银屑病。所有银屑病

表1 各组受检者4种Th17细胞相关因子水平比较（±s，ng／L）

表1 各组受检者4种Th17细胞相关因子水平比较（±s，ng／L）

＊：P＜0.05，＊＊：P＜0.01，与对照组比较。

组别 n IL－17 IL－23 IL－6 TGF－β进行期组 19 13.62±2.43 3 246.39±480.34＊ 7.40±1.25＊＊ 2 682.25±415.41＊静止期组 11 13.82±2.49 3 111.61±737.20＊ 7.55±1.22＊＊ 2 463.34±653.95对照组 10 14.19±2.11 2 572.32±351.12 5.61±1.02 2 071.17±358.20

患者均行银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）评分。对照组10例，男4例，女6例；年龄23～35岁，均为来本院体检的健康成年人。3组受检者年龄、性别差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 主 要 试 剂 IL－17、IL－23、IL－6 和 TGF－β 的 ABCELISA检测试剂盒均为美国R＆D Systems生物试剂公司产品。

1.2.2 Th17细胞相关因子的检测 采集所有受检者静脉血4mL，室温血液自然凝固10～20min后，离心20min（3 000r／min），收集上清液（如有沉淀形成，应再次离心），血清样本于－70℃冻存。应用ELISA方法检测外周血血清IL－17、IL－23、IL－6和TGF－β的水平，实验步骤严格按照试剂盒说明书进行。每个样本和标准品均设2个复孔，同时设置空白对照和阴性对照，以保证检测结果的可靠性。采用酶标仪测定450nm处吸光值，根据标准曲线读取样品浓度。

1.3 统计学处理 采用SPSS15.0统计软件进行分析，计量资料以±s表示。两组间均数比较采用t检验；相关性分析采用Sperman相关性检验，均为双侧检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组间4种Th17细胞相关因子水平比较 银屑病患者进行期、静止期组血清IL－23和IL－6水平均明显高于对照组（P＜0.05）；进行期组 TGF－β水平高于对照组（P＜0.05），静止期组TGF－β水平与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；银屑病患者血清IL－17水平与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。银屑病患者组间，血清IL－17、IL－23、IL－6和TGF－β水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.2 银屑病患者4种细胞因子水平与PASI的相关性 银屑病患者血清IL－23水平为（3 196.97±578.77）ng／L，与PASI评分呈正相关（r＝0.424，P＜0.05）；而血清IL－17水平为（13.69±2.41）ng／L、IL－6水平为（7.46±1.22）ng／L、TGF－β水平为（2601.98±515.83）ng／L，与 PASI均无相关性（r＝－0.118、r＝－0.043、r＝－0.203，P＞0.05）。

3 讨 论

银屑病是一种多基因遗传背景下的自身免疫性皮肤病，淋巴细胞和单核细胞浸润，特别是T淋巴细胞真皮浸润为其重要的病理特征，这表明免疫系统在该病的发生、发展中发挥着重要作用，但具体发病机制至今尚不明确。近年来，关于银屑病中Th17细胞及其相关细胞因子的高表达成为了人们的研究热点，提示Th17细胞在银屑病免疫发病机制中可能起关键性作用。

Th17细胞产生的最重要的效应因子是IL－17，其受体在体内广泛表达［3－4］。IL－17的主要生物学功能是促进炎症反应，与银屑病的发生密切相关［5－6］。有研究对银屑病皮损和外周血中Th17细胞及IL－17进行了检测，结果发现：Th17细胞主要出现在银屑病皮损的真皮层，IL－17mRNA水平高表达，且随着疾病严重程度的增加而升高；经环孢素治疗后，IL－17的表达恢复正常［7－8］。从而证实了Th17细胞是银屑病皮肤炎症过程中重要的调节因子，也是值得关注的一个银屑病治疗的靶因子。但在本研究中并未发现银屑病患者（无论进行期组和静止期组）血清IL－17水平的升高，且IL－17水平与PASI之间也无明显相关性，这与目前的文献报道结果不一致，是否与本组资料例数较少、银屑病组PASI评分较低有关，有待进一步的大样本研究证实。

TGF－β和IL－6参与了Th17细胞的早期分化，IL－23则在分化后期维持 Th17稳定分化成熟［5，9］。IL－23、TGF－β和IL－6在完整有效的Th17细胞保护性免疫应答过程中都是必不可少的。有研究显示，银屑病中，角质形成细胞和树突状细胞过度表达IL－23，IL－23刺激Th17细胞在真皮中产生IL－17和IL－22，而针对这些细胞因子的治疗则有利于银屑病症状的改善［10］。陈旭娥等［11］的研究发现，IL－23 和IL－17在银屑病皮损组织中高表达，认为IL－23可能通过诱导幼稚CD4＋T细胞分化为Th17细胞，使其分泌IL－17、IL－6等细胞因子，从而介入银屑病的发病机制和炎症反应过程。本研究中，无论进行期组还是静止期组，IL－23、IL－6和 TGF－β水平均明显高于对照组（P＜0.05），在进行期组和静止期组组间比较，IL－23、IL－6和TGF－β水平差异均无统计学意义（P＞0.05），说明这些Th17细胞相关因子可能参与了银屑病的免疫发病机制，但与银屑病的病情分期似乎无明显相关。另外，本组资料相关性分析发现IL－23水平与PASI之间具有相关性，而IL－17、IL－6、TGF－β水平与PASI评分均无相关性。

综合IL－23、IL－6及TGF－β的变化，说明银屑病患者的免疫细胞功能存在整体异常，由此导致了免疫分子表达水平的整体失衡，反映了银屑病整个复杂免疫反应异常的一个环节，尤其是IL－23水平的失调有可能在银屑病复杂的致病机制中发挥了重要的作用［12－13］，这在本研究中似乎也证实了这一点，最近，有学者在基因水平上的研究也证实了IL－23R与银屑病的相关性［14－15］，可见，IL－23／IL－23R 通路很可能是银屑病一个重要的干预治疗靶向。目前Th17相关因子与银屑病关系的研究尚在起步阶段，很多机制尚不十分清楚，仍需要今后更多的研究和发现。

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