非酒精性脂肪性肝炎患者血清L－FABP和TNF－α水平测定及其意义

唐 彬，姚树坤

（北京协和医学院研究生院／卫生部中日友好医院，北京100730）

非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）为非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）较严重的病理类型，目前理论认为“二次打击”学说是其重要发病机制之一［1－2］。“二次打击”主要是多种原因引起的氧化应激或脂质过氧化损伤［3］。肿瘤坏死因子－α（tumor necrosis factor－alpha，TNF－α）是导致胰岛素抵抗（IR）的主要炎症因子之一［4］，肝型脂肪酸结合蛋白（liver type fatty acid binding protein，L－FABP）是一种脂肪酸转运蛋白，其作为有效的内源性抗氧化物，有减轻氧化应激损伤的功能［5］，本研究通过检测NASH患者血清中L－FABP、TNF－α的水平，探讨二者在NASH发生发展中的相关性及意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年1月至2012年6月来本院门诊就诊的NASH患者50例（NASH组），其中男40例，女10例；年龄23～66岁，平均（35.20±11.17）岁。入选标准：根据中华医学会肝病学分会2010年《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》临床诊断标准，收集肝功能异常，其中丙氨酸氨基转移酶（ALT）为40～200IU／L；B超检查符合弥漫性脂肪肝的诊断标准，并排除酒精性肝病、病毒性肝炎、自身免疫性肝病等。选择本院同期健康体检者32例为对照组，男23例，女9例，年龄23～60岁，平均（37.19±10.38）岁。

1.2 方法 测量所有受试者身高、体质量、腰围及臀围，并计算体质量指数（BMI）和腰臀比（WHR），并于晨起空腹采集静脉血标本，检测空腹血糖（FPG）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、血尿酸（UA）、高敏C反应蛋白（hs－CRP）水平，并采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清中L－FABP和TNF－α水平，ELISA检测试剂盒购自美国Rapidbio（RB）公司，实验操作按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学处理 所有数据采用SPSS17.0统计软件进行分析，所有资料进行正态性检验，计量资料用±s表示，组间比较采用t检验；双变量相关性采用Spearman相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组间各临床及生化指标的对比分析 NASH组50例的患者中TC升高者23例（46.00%），LDL－C升高者29例（58.00%），TG升高者31例（62.00%），HDL－C降低者26例（52.00%），UA升高者30例你（60.00%），BMI升高者38例（76.00%）。NASH 组患者中 ALT、AST、TC、LDL－C、TG、BMI、WHR、TNF－α、L－FABP和hs－CRP水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1、2。

表1 两组受试者TC、LDL－C、TG等指标比较（±s，mmol／L）

表1 两组受试者TC、LDL－C、TG等指标比较（±s，mmol／L）

＊：P＜0.05，与对照组比较。

组别 n 42.60±84.37 5.76±0.32 1.68±0.42 NASH组 50 5.04±0.91＊ 3.25±0.83＊ 3.01±1.58＊ 0.99±0.22 432.70±74.14＊ 5.91±1.24 3.96±0.98 TC LDL－C TG HDL－C UA FBG hs－CRP对照组 32 3.26±0.57 1.02±0.37 1.07±0.55 1.41±0.41 3＊

表2 两组受试者BMI、ALT、AST等指标比较（±s）

表2 两组受试者BMI、ALT、AST等指标比较（±s）

＊：P＜0.05，与对照组比较。

组别 n BMI（kg／m2） ALT（IU／L） AST（IU／L） WHR L－FABP（ng／mL） TNF－α（pg／mL）06 46.48±11.78 2.48±1.19 NASH组 50 30.43±3.92＊ 80.25±37.50＊ 42.93±17.52＊ 0.92±0.07＊ 63.49±13.44＊ 4.34±1.06对照组 32 24.26±2.71 17.56±4.61 18.39±3.50 0.85±0.＊

表3 NASH组血清L－FABP与TNF－α及其各临床指标的相关性分析

表4 TNF－α与各临床指标的相关性分析

2.2 NASH组血清L－FABP水平与各指标的相关性分析NASH组血清 L－FABP水平与 TNF－α、CHO、LDL－C、ALT、UA、hs－CRP显著正相关 （P＜0.05），而与 TG、WHR、BMI、FBG、TG无显著相关性（P＞0.05），见表3。血清TNF－α水平与 ALT、UA、hs－CRP显著正相关 （P＜0.05），而与 TC、LDLC、TG、FBG无显著相关性（P＞0.05），见表4。

3 讨 论

NAFLD是一种与IR和遗传易感密切相关的代谢应激性肝脏损伤，疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝（nonalcoholic simple fatty liver，NAFL）、NASH及其相关肝硬化和肝细胞癌。NAFLD是21世纪全球重要的公共健康问题之一，亦是中国愈来愈重视的慢性肝病问题［1－2］，NAFLD病因机制复杂，“多重打击”学说认为：“初次打击”主要是IR和脂质代谢紊乱所导致的肝细胞内脂质沉积；“二次打击”主要是多种原因引起的氧化应激或脂质过氧化损伤［3］。

NAFLD被认为是与IR和氧化应激相关的代谢综合征，NASH作为NAFLD较严重的病理类型，可进展为肝纤维化，肝硬化，甚至肝癌。目前理论认为，氧化应激可能是NASH发生和进展的重要“二次打击”因素。肝脏是人体新陈代谢的总枢纽，是氧化应激损伤的核心靶器官［6］。NASH患者的肝细胞以线粒体异常为特征，线粒体损伤是肝细胞损伤的重要原因之一，而线粒体中过量游离脂肪酸（FFA）的氧化是导致线粒体损伤的重要原因［7］。

脂肪酸结合蛋白（fatty acid binding protein，FABP）是一组运输长链脂肪酸的低分子量胞浆蛋白超家族，L－FABP是FABP家族成员之一，基本功能包括参与小肠脂肪酸的吸收及转运、细胞内长链脂肪酸的转运及细胞器内再分布利用、胆汁酸、胆固醇等物质的代谢等。近年发现L－FABP可以结合长链脂肪酸的氧化产物，成为有效的内源性的抗氧化物［8－9］。本研究发 现，NASH 患 者 血 清 L－FABP 水 平 与 CHO、hs－CRP、TNF－α、ALT等呈显著正相关，提示其与脂代谢、肝脏炎症反应和肝功能损伤的发生发展有着密切联系。TNF－α是由单核－巨噬细胞分泌的一种关键致炎因子，与NASH的发生发展密切相关。TNF－α通过活化神经鞘磷脂酸，抑制线粒体呼吸链电子传递，使线粒体活性氧（ROS）升高，产生脂质过氧化，导致肝细胞坏死。另一方面，过量的ROS又可促使TNF－α合成增加，引起 NASH致病过程中的“二次打击”［10－11］。本研究显示，NASH组TNF－α的水平显著高于正常组，提示肝脏的氧化应激损伤导致TNF－α的生成增加。

本研究结果还显示，L－FABP与TNF－α水平呈显著正相关。已有研究证明，过量的ROS容易导致氧化应激状态，细胞微环境氧自由基浓度可以升高L－FABP水平，影响细胞内LFABP蛋白水平。肝脏含有丰富的线粒体，是ROS攻击的主要器官，L－FABP与TNF－α水平的正相关的结果提示，TNF－α可能通过提高线粒体内ROS而上调L－FABP表达水平。LFABP可否成为NAFLD发生、发展的预测因子尚有待于深入研究。可为NAFLD的诊断和治疗提供新的研究方向。

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