西藏藏猪戊型肝炎病毒的血清流行病学调查

时新春，张晓轩，丛 伟，丹巴次仁，朱兴全，周恩民，穆 杨＊

（1.西北农林科技大学动物医学院 陕西杨凌712100；2.中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室，甘肃兰州730046；3.西藏大学农牧学院动物科学学院，西藏林芝860000）

戊型肝炎（Hepatitis E，HE）是由戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus，HEV）引起的一种重要的急性传染病，在许多发展中国家广泛流行，严重危害人类健康［1］。HEV是一种重要的经口－粪途径传播的病原，该病通常是自限性的，预后良好，但在孕妇中造成的死亡率高达20%～25%［2－3］。HEV 也能感染多种其他哺乳动物，如猪、鸡、鼠和猫等。HEV主要有5个基因型，Ⅰ和Ⅱ型感染多见于发展中国家，仅感染人；Ⅲ和Ⅳ型流行于全球，人畜均可感染；Ⅴ型仅见于禽类［4－5］。目前，仍没有能有效预防 HE的疫苗，尽管试验性的疫苗有一定的效果［6］。

藏猪生活于我国高寒山区，具有适应高海拔恶劣气候环境、抗病、耐粗等特点，并且具有极强的适应能力和抗逆性，具备其他猪种不具备的独特种质特性，是我国特有的能适应高海拔地区的一个重要品种资源［7］。猪和人的HEV在基因结构上十分相似，人可以通过直接食入被HEV污染的食物而感染，与猪密切接触的人群明显比其他对照人群HEV抗体阳性率更高［8－9］，猪传播的戊型肝炎已成为一个重要的公共卫生问题。尽管国内许多学者从血清学等方面对不同地区的猪HEV感染情况进行了调查［10－13］，然而，还没有西藏地区藏猪 HEV 感染情况的报道。本研究通过血清学试验对西藏自治区林芝地区林芝县和米林县藏猪群中HEV的流行状况进行检测，为西藏自治区HEV防控提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 2010年4月～12月间由西藏当地专业兽医工作人员采自西藏自治区林芝地区米林县和林芝县的藏猪血清。

1.1.2 主要试剂 戊型肝炎病毒IgG抗体（HEVAb）酶联免疫诊断试剂盒（双抗原夹心法）为北京万泰生物有限公司产品。

1.2 方法

1.2.1 样品采集 根据猪的大小每头前腔静脉或耳缘静脉采血5mL，血液凝固后离心分离血清并标记，置－20℃保存，后低温送回实验室于－70℃保存备检。共421份血清样品。

1.2.2 抗体检测 按照戊型肝炎病毒抗体（HEVAb）酶联免疫诊断试剂盒（双抗原夹心法）说明书检测血清样品中的戊型肝炎病毒抗体。结果判定以空白孔调零，当阳性对照孔平均OD值≥0.80，阴性对照平均OD值≤0.1时试验成立。临界值＝阴性对照孔平均OD值（NC）＋0.12，若样品OD值≥临界值，判定为HEV抗体阳性，若样品OD值＜临界值则判定为HEV抗体阴性。

1.2.3 数据统计分析 检测结果用SPSS 19.0统计不同生长阶段、性别和采样地戊型肝炎病毒抗体阳性率的差异。

2 结果

2.1 不同生长阶段抗体阳性率分布情况

对2010年4月～12月间采自西藏自治区林芝地区藏猪的421份血清样品，应用ELISA试剂盒进行检测后，根据藏猪生长阶段分组统计戊型肝炎病毒抗体阳性率，结果见表1。从表1可以看出，藏猪的 HEV抗体平均阳性率为48.46% （204／421），其中种公猪的阳性率最高（75%），其次是育肥猪（60.58%），断奶仔猪的阳性率最低（31.88%），不同生长阶段藏猪的戊型肝炎病毒抗体阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。表明HEV在西藏自治区林芝地区的藏猪中普遍流行。

表1 不同生长阶段藏猪血清HEV抗体阳性率Table 1 Positive rates of HEV－Ab in different growth stages of Tibetan pigs

2.2 不同性别与地区间抗体阳性率对比

根据性别和采样地区统计血清样品HEV抗体阳性率，结果见表2。有108份样品没有性别信息，剩余的313份样品中公猪和母猪血清抗体阳性率分别为52.63%和47.89%，经统计差异不显著（P＞0.05）。而林芝县的226份样品和米林县的195分样品的阳性率分别为53.10%和43.08%。统计分析表明，林芝县血清样品HEV抗体阳性率显著高于米林县样品的阳性率（P＜0.05）。

表2 不同性别和不同地区的藏猪血清HEV抗体的阳性率Table 2 Positive rates of HEV－Ab in Tibetan pigs grouped by gender and location

3 讨论

猪戊型肝炎病毒在世界各地猪群中普遍流行。各个国家报道的抗体阳性率差异较大，法国31%［14］，丹 麦 73.2%［15］，意 大 利 87%［16］，英 国85.5%［17］。国内葛胜祥等［18］检测了中国不同地区的8 626头商品猪血清样品，结果HEV抗体总阳性率达83.4% （7191／8 626）；广西77.53%［19］，湖南84.3%［20］，昆明59.15%［21］，福建66.7%［22］，北京62.1%［23］，表明中国猪群 HEV感染率较高。本研究结果表明，藏猪HEV抗体平均阳性率为48.46%（204／421），低于国内其他地区的抗体阳性率，这些与藏猪的高原生活习性和种特异性有关，也说明藏猪作为我国的特有猪种很值得更深入研究。而林芝县（53.10%）和米林县（43.08%）两个采样地的血清抗体阳性率也存在显著差异，两个县HEV血清阳性率不同很可能与地域和饲养条件有关。

根据不同年龄段统计西藏藏猪HEV的抗体阳性率（表1），结果显示西藏自治区林芝地区的藏猪中种公猪HEV抗体阳性率最高，这与在北京和台湾所做的调查结果有差异［24－25］。这应该与藏猪的生活环境和生活习性与北京和台湾地区的猪不同有关。更重要的是，本研究显示断奶仔猪的阳性率最低（31.88%），从这个结果可以推测猪群HEV的感染是在猪的生长过程中发生，随着仔猪的生长，其体内母源抗体浓度越来越低也是导致生长猪、育肥猪和待宰猪感染率上升的一个原因。虽然具体原因还有待进一步研究确定，但断奶仔猪的感染仍然不可忽视。

猪源HEV与人源HEV在基因序列上具有高度的同源性，而且与猪密切接触的职业人群血清HEV抗体明显高于其他人群［9－10］，提示戊型肝炎是一种重要的人兽共患病。中国人喜食猪肉及其内脏，因此，猪源HEV可能是引起人类HEV感染的一个重要来源。目前，猪HEV的感染虽然没有给猪业生产带来明显经济损失，但猪作为HEV主要的传播宿主之一，始终是公共卫生安全的隐患，尤其是藏猪多为散养［7］，HEV在藏猪中的流行更应该引起注意。在世界多个国家及中国猪HEV抗体阳性率较高的背景下，本研究对了解西藏自治区的藏猪HEV感染情况，以及西藏居民HE的防控具有重要的公共卫生学意义。

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