唾液及牙龈中的血链球菌与老年患者不稳定性心绞痛严重程度的相关性

马海霞 高景顺 (义马煤业集团公司总医院检验科，河南 义马 472300)

不稳定性心绞痛与冠状动脉粥样硬化密切相关。以老年患者较为多见，而老年患者往往伴随其他多种慢性疾病，如高血压、糖尿病等，其对疾病的抵抗能力明显降低。目前临床研究显示血链球菌感染是除血脂异常外另一项可诱发冠状动脉粥样硬化形成的危险因素〔1〕。本文通过对老年不稳定性心绞痛患者口腔内的血链球菌进行检测，以期总结出血链球菌与不稳定性心绞痛严重程度的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 于2011年1月至2012年1月在我院心内科住院行冠状动脉造影后明确诊断为冠心病的不稳定性心绞痛患者中随机选择50例，组成不稳定性心绞痛组，同时从我院体检中心随机选取年龄段匹配的体检者30例，组成对照组。不稳定性心绞痛组中，年龄62～84(平均67.23)岁，其中冠状动脉单支狭窄者19例，两支狭窄者18例，三支狭窄者13例。对照组年龄65～83(平均68.15)岁。两组在性别、年龄、吸烟等基础因素比较，未见显著差异。见表1。

1.2 标本采集 受检者知情同意。不稳定性心绞痛组行冠状动脉造影术后，于术后第2天下午3:00左右，留取非刺激状态下的口腔唾液0.5 ml。同时在患者应用清水清洁口腔后，留取患者牙龈下方的菌斑。健康体检者在体检当日下午3:00左右，引用同样方法留取口腔唾液和牙龈下菌斑。并立即送入实验室进行接种。

表1 两组基础因素分析(n)

1.3 标本培养 所有放置标本的标本瓶均予充分震荡混匀，后应用林格液稀释，唾液稀释至10-4倍，牙龈下菌斑稀释至10－2倍，并将稀释后的标本接种至NAYS-B培养基。随后将培养皿置于混合有90%N2和10%CO2的环境中，37℃恒温培养24 h。培养皿恒温培养24 h后，从培养皿中提取已嵌入培养基中的菌落转种至血培养基中，再次放入混合有90%N2和10%CO2的37℃恒温环境中，再次培养48 h。

1.4 标本鉴定 在于NAYS-B培养基培养24 h后计算血链球菌的总菌数;在血培养基培养72 h后，从培养皿中挑取菌落，应用随机引物聚合酶链反应进行菌种鉴定。对照菌种均购自上海第二医科大学口腔医学研究所。

1.5 观察指标 首先对血链球菌总菌数与不稳定性心绞痛发生的相关性进行分析。随后分析不稳定性心绞痛严重程度与各菌种间的相关性。

1.6 统计学方法 采用SPSS19.0软件，计量数据以±s表示，计数数据以百分率表示，应用 t检验、χ2检验及相关性分析。

2 结果

2.1 两组血链球菌数比较 两组唾液及牙龈菌斑中培养出的菌数未见明显差异(P＞0.05)。见表2。

2.2 两组各型血链球菌比较 两组在唾液及牙龈菌斑中缓症链球菌和口腔链球菌均无明显差异(P＞0.05)。而在不稳定性心绞痛组唾液和牙龈菌斑中血链球菌和高氏链球菌检出率明显高于对照组(P＜0.05)。见表3。

2.3 血链球菌数与不稳定性心绞痛严重程度 经相关性分析后发现，无论是在唾液中还是在牙龈菌斑中，其菌群数量与不稳定性心绞痛均呈直线相关关系(P＜0.05)。见表4。

表2 两组血链球菌数比较(CFU/L，±s)

表2 两组血链球菌数比较(CFU/L，±s)

组别 n 唾液中总菌数 牙龈下菌斑菌数不稳定性心绞痛组50 4 552.88±965.90 414.14±117.99对照 30 4 361.27±970.65 377.10±118.75 t/P值 0.857/0.3951)0.179/0.793

表3 两组唾液、牙龈菌斑中链球菌阳性比较(n)

表4 不稳定性心绞痛患者不同严重程度比较(CFU/L，±s)

表4 不稳定性心绞痛患者不同严重程度比较(CFU/L，±s)

组别 n 唾液中总菌数 牙龈下菌斑菌数单支狭窄19 3 593.89±367.94 318.00±101.90两支狭窄 18 4 651.00±395.15 436.38±68.52三支狭窄 13 5 818.61±423.31 523.84±78.81 r/P值0.828/0.000 0.704/0.000

3 讨论

血链球菌属机会致病菌，其定植于口腔内，是维持口腔内生态平衡的主要的细菌之一〔2，3〕。血链球菌主要分为血链球菌与高氏链球菌，口腔链球菌与缓症链球菌两大类。目前无论在动物实验中还是在临床观察中均已证实血链球菌可诱发血液中血小板的聚集〔4，5〕。老年患者由于其对疾病的抵抗力明显降低，其感染链球菌的可能性更大，因此，及时监测老年患者的血链球菌水平对改善老年患者的预后具有十分重要的意义。通过血液培养的方式来检测血链球菌感染的检出率并不高，所以本研究采取提取口腔唾液及牙龈菌斑部位的血链球菌的方式来分析血链球菌与不稳定性心绞痛患者的相关性。

本研究提示老年患者不稳定性心绞痛的发生与唾液及牙龈菌斑中的总菌数方面未见明显相关性，但是与血链球菌和高氏链球菌存在显著的相关性。其原因可能为在所见测的总菌数中包含了与不稳定性心绞痛发生无关的缓症链球菌和口腔链球菌的菌数，所以导致在总菌数方面为体现出明显的相关性。由此可以看出，血链球菌影响着不稳定性心绞痛的发生，而此种影响主要集中在血链球菌与高氏链球菌上。目前对于血链球菌对不稳定性心绞痛的影响机制尚未完全明确，但是目前最主要的观点为促血小板聚集学说及炎性介质学说〔6〕。促血小板聚集学说认为，在血链球菌的表面存在血小板抗原，而体内的肾上腺素等激素可促进血小板与血链球菌表面的抗原相结合，诱发血小板聚集的产生。而炎性介质学说则认为，在血链球菌感染时，机体可释放大量的炎性介质，同时位于细菌细胞壁上的脂多糖，也随细菌感染入血，两者同时作用于血管内皮，均促进血管平滑肌的增殖和脂肪的变性，同时还对机体的凝血功能及血小板的聚集起到一定的刺激作用。而血小板聚集及炎性介质均为不稳定性心绞痛患者的重要危险因素〔7，8〕，最终可导致血栓的形成而诱发不稳定性心绞痛的产生。

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3 邓淑丽，陈 晖，张卫东.口腔血链球菌和冠心病相关性探讨〔J〕.中华口腔医学杂志，2002;3(37):222-4.

4 陈 晖，赵孟辉，李菊花，等.血链球菌对兔血细胞血压及心电图的影响〔J〕.中华口腔医学杂志，2001;36(5):354-6.

5 Haraszthy VI，Zambon JJ，Trevisan M，et al.Identification of periodontal pathogens in atheromatous plaques〔J〕.J Periodontol，2000;71(10):1554-60.

6 屠彦，陈 晖.口腔感染引发心血管疾病的机制〔J〕.国际口腔医学杂志，2010;2(37):182-5.

7 齐 新，刘克强，王 敏，等.冠心病患者血小板聚集功能与炎症因子关系的研究〔J〕.中国循环杂志，2009;3(24):178-81.

8 张嘉莹，张菲斐，翟亚萍，等.不稳定性心绞痛炎性细胞因子水平与冠状动脉狭窄的对比分析〔J〕.中国循环杂志，2000;2(15):81-2.