夏季养生颗粒对高温条件下心脏的保护作用

王桐生， 龙子江， 黄金玲， 吴德玲， 谢 鸣

(1．安徽中医学院药理教研室，安徽合肥230038;2．北京中医药大学方剂学学科，北京100029)

高温应激对机体可造成广泛的多脏器损伤，也是诱发心脑血管疾病的常见因素之一。夏季养生颗粒是根据中医四季养生经验设计出的适用于夏季养生的中药保健饮料，该方具有益气养阴、清热生津的功效，对高温环境中的机体具有一定的保护作用。本实验观察了夏季养生颗粒对高温环境下动物生存及心、肝等脏器的保护作用。

1 材料

1.1 动物 SD大鼠，雄性，体质量 (200±20)g;昆明种小鼠，雌雄各半，体质量 (20±2)g，由安徽省实验动物中心提供，动物合格证号为SCXK(皖)2005-001号。

1.2 药物与试剂 夏季养生颗粒由人参、麦冬、葛根、银花、茶叶组成，按常规水提法提取制成颗粒，8.5 g/袋(相当于生药18 g)，由北京中医药大学国家重点方剂学科实验室提供。复方丹参滴丸，天津天士力集团生产，批号为:20080722，使用前取滴丸轻研磨，加适量蒸馏水配制备用。Ca2+-Mg2+-ATP酶测定试剂盒、Na+-K+-ATP酶测定试剂盒，由南京建成生物科技有限公司生产，批号均为20100730。天冬氨酸转移酶 (AST)、丙氨酸转移酶(ALT)、磷酸肌酸激酶 (CK)、乳酸脱氢酶 (LDH)均为Olympus公司原装试剂，批号分别为 8756、8723、8178、8149。

1.3 仪器 GNP—9080型隔水式恒温箱，上海三发科学仪器有限公司生产;754-分光光度计，上海科学仪器公司生产;奥林帕斯—400型全自动生化分析仪，日本Olympus公司生产。

2 方法

2.1 对小鼠的耐高温作用 体质量为18～22 g小鼠100只，雌雄各半，随机分成空白对照组、阳性药组 (复方丹参滴丸组，0.32 g/kg)、夏季养生颗粒小、中、大剂量组(分别为1.11、3.32、9.95 g/kg，按体表面积计算，相当于人用量8.5 g/d的1、3、9倍)共5组，每组20只。各组按剂量灌胃给药，连续7 d，正常组给予等容积蒸馏水，末次给药后30 min，将小鼠放入 (45±1)℃的恒温箱中，记录小鼠的存活时间 (50 min未死按50 min计算)，计算50 min的各组存活数。

2.2 对高温条件下大鼠血清和心肌组织相关酶的影响［1-2］取体质量为180～220 g雄性大鼠60只，随机分成正常组、模型组、阳性药组 (复方丹参滴丸组，0.14 g/kg)、夏季养生颗粒小、中、大剂量组 (分别为0.70、1.40、2.80 g/kg，按kg体质量计算，相当于人用量8.5 g/d的5、10、20倍)，各组动物按剂量灌胃给药，连续7 d，正常组、模型组给予等容量蒸馏水，末次给药后30 min，除正常组外，其余各组动物放入 (45±1)℃恒温箱中，30 min后取出，迅速麻醉，腹主动脉采血，分离血清，按速率法测定血清中AST、ALT、CK、LDH量。于冰盘上迅速摘取心脏，用冷生理盐水洗尽，精确称取一定量心肌组织，用冷生理盐水制成10%的匀浆，按试剂盒说明书测定心肌Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力。

3 结果

3.1 对小鼠的耐高温作用 结果见表1。

表1 对高温条件下小鼠存活时间及存活数影响 ± s，n=20)

表1 对高温条件下小鼠存活时间及存活数影响 ± s，n=20)

注:与空白对照组比较，*P＜0.05。

组 别 剂量/(g·kg－1)存活时间/min存活数/只存活率/%空白对照组 － 24.75±12.18 1 5丹参滴丸组 0.32 31.40±14.16 6 30*养生颗粒组 (小剂量) 1.11 25.35±11.46 1 5养生颗粒组 (中剂量) 3.32 27.00±12.68 3 15养生颗粒组 (大剂量) 9.95 31.60±11.09 6 30*

由表1可见，连续给药7 d，丹参滴丸组和夏季养生颗粒中、大剂量组小鼠高温条件下的存活时间和动物存活数均有不同程度的延长和增加 (P＞0.05)，其中丹参滴丸组、夏季养生颗粒大剂量组动物存活率明显增加，与空白对照组的差异有显著性意义 (P＜0.05)。

3.2 对高温应激大鼠血清酶及心肌酶的影响 结果见表2和表3。

由表2可见，与正常组比较，造模各组大鼠血清中AST、ALT、CK、LDH的量均明显增高，差异均有显著性意义 (P＜0.05)，说明在高温条件下大鼠脏器受到损伤。与模型组比较，夏季养生颗粒大剂量组大鼠血清中ALT和CK量均明显降低 (P＜0.05)，其他各组血清AST和LDH量呈不同程度降低，但差异无显著性意义 (P＞0.05)。结果显示夏季养生颗粒对高温环境下大鼠内脏损伤有一定的保护作用。

表2 夏季养生颗粒对高温应激大鼠血清酶的影响 (±s，n=10)

表2 夏季养生颗粒对高温应激大鼠血清酶的影响 (±s，n=10)

注:与正常组比较，*P＜0.05;与模型组比较，#P＜0.05。

组 别 剂量/(g·kg－1)AST/(U·L－1)ALT/(U·L－1)CK/(U·L－1)LDH/(U·L－1)正常组 － 153．17 ±19．79# 33．33 ±12．40# 210．80 ±80．30#436．60 ±216．15模型组 － 218．64 ±48．67* 54．03 ±18．47* 379．30 ±151．52* 644．50 ±288．44丹参滴丸组 0．14 192．45 ±35．45 40．47 ±6．45 351．40 ±193．75 591．70 ±310．06养生颗粒组 (小剂量) 0．70 203．24 ±31．02 46．19 ±6．76 370．00 ±131．37 602．30 ±351．07养生颗粒组 (中剂量) 1．40 194．81 ±47．85 48．71 ±16．85 307．60 ±140．35 624．40 ±418．55养生颗粒组 (大剂量) 2．80 200．40 ±22．22 34．16 ±12．67# 175．00 ±80．66#532．80 ±272．17

表3 对高温应激大鼠心肌酶的影响 (±s，n=10)

表3 对高温应激大鼠心肌酶的影响 (±s，n=10)

注:与正常组比，*P＜0.05;与模型组比，#P＜0.05。

组 别 剂量/(g·kg－1) Na+-K+-ATP 酶/(U·mgprot－1) Ca2+-Mg2+-ATP 酶/(U·mgprot－1)正常组 －21.59±5.71 16.27±3.81模型组 － 12.22±4.44* 12.77±3.55*丹参滴丸组 0.14 19.93±7.58# 13.37±5.51养生颗粒组 (小剂量) 0.70 13.85±4.36* 13.52±3.71养生颗粒组 (中剂量) 1.40 15.77±5.67* 13.98±5.15养生颗粒组 (大剂量) 2.80 19.89±6.62#13.79±2.93

由表3可见，高温条件下模型组大鼠心肌Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均呈明显下降 (P＜0.05)。与模型组比较，丹参滴丸组和夏季养生颗粒不同剂量组组大鼠心肌Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力均呈不同程度升高，其中丹参滴丸组和夏季养生颗粒大剂量组的Na+-K+-ATP酶活力提高明显 (P＜0.05)。

4 讨论

环境温度与人体的健康密切相关。在高温情况下工作生活，机体体温调节功能发生紊乱，导致大量热蓄积，表现为体温升高、肌肉痉挛、晕厥等。临床研究表明［3］，高温中暑时血清 CK、AST、LDH和ALT均明显升高，CK、LDH、AST和ALT活性可作为对中暑病情判断及预后的重要参考指标。实验研究显示，热应激所致的线粒体损伤及其生物学效应是热应激心肌细胞损伤的重要机制，在高温条件下大鼠心肌线粒体氧化代谢能力降低，Ca2+-ATP酶活性显著下降，心肌细胞内钙超载，而且随温度的升高而加重，提示对线粒体结构与功能的保护可能是防治热应激机体心功能损伤的重要途径［4-6］。

夏季养生颗粒是由人参、麦冬、葛根、银花、茶叶所组成，方中药味均为中医用于夏季保健所常用。人参大补元气，养阴生津;麦冬养阴清热，生津止渴;葛根清热解暑，舒利经脉;银花清热解毒，疏散风热;茶叶清热利尿，明目醒神。全方合之有清热解暑，益气养阴之功。现代研究表明，人参具有抗应激作用［6-7］对心、肝损伤具有保护作用［8］;麦冬、葛根具有显著的抗心肌缺血、改善心脑功能作用［9-10］;金银花所含绿原酸、黄酮等成分有利胆、保肝、抗氧化的作用［11］。清茶富含多酚、多糖及黄酮类等成分，具有抗氧化、降血糖、抗辐射等作用［12-13］，对心血管系统有明显的保护作用。本研究发现，夏季养生颗粒能增加或提高小鼠高温下的生存时间和存活率，降低热应激条件下大鼠血清ALT和CK量和显著增加大鼠心肌Na+-K+-ATP酶的活力。结果表明，夏季养生颗粒有一定的提高机体耐高温的作用，对高温条件下的心、肝等脏器具有一定的保护作用，其机制可能与清除自由基，抗氧化损伤有关。

实验中的阳性对照药复方丹参滴丸为治疗心肌缺血的常用中成药，由丹参、三七、冰片所组成，具有活血行气止痛功能，与夏季养生颗粒在组成和功用 (益气养阴，清热祛暑)上有明显不同。前期研究表明，丹参滴丸和夏季养生颗粒对冠脉结扎心肌缺血均有显著的保护作用。本实验中观察到，实验剂量下的丹参滴丸和夏季养生颗粒在提高高温下的动物生存率和心肌酶活力方面具有类似的作用，但在对高温条件下大鼠血清酶学的影响方面却有所不同，如前者无明显作用，后者则能显著降低大鼠异常升高的血清ALT和CK量。结果提示，二方的药理作用有所不同，抗心肌缺血在机体耐高温中可能具有重要作用，但夏季养生颗粒则可能具有更广泛的多脏器保护作用。

［1］姚 欣，冯子坛，刘 卫，等．结肠途径治疗对中暑犬降温作用及血清酶、炎症因子的影响［J］．解放军医学杂志，2007，32(9):982-985．

［2］李继红，朱国标，陈 莉，等．高热应激对机体持续损伤的实验研究［J］．四川医学，2011，31(12):1747-1750．

［3］张 斌．中暑患者血清中酶的变化及其对病情的诊断价值［J］．井冈山医专学报，2003，10(6):70-71．

［4］马根山，曹汉忠，卞振东，等．高温对大鼠离体心脏结构和功能的影响［J］．交通医学，2008，22(1):9-11．

［5］赵 远，和占龙，吴海兴，等．两种抗应激剂对恒河猴抗热应激作用的试验研究［J］．实验动物科学，2008，25(3):30-33．

［6］纪 筠，宋 青，岳 慧，等．血必净注射液对热射病大鼠保护机制的研究［J］．解放军医学杂志，2011，36(6):578-581．

［7］张海英，薛 洁，史玉柱，等．人参对脾虚及正常小鼠抗应激能力的影响［J］．中国现代药物应用，2009，3(11):42-43．

［8］袁文学，伍湘瑾，杨福新，等．人参根皂甙对热应激鼠脑单胺递质和血清皮质酮影响［J］．中国药理学报，1989，10(6):492-496．

［9］韩明向，史东岩，倪恩荣，等．人参增加家兔缺血性心肌组织血流量的实验研究［J］．中国中西医结合杂志，1992，12(7):427-428．

［10］徐德生，冯 怡，周跃华，等．麦冬多糖中抗急性心肌缺血活性部位研究［J］．中成药，2004，26(10):832-837．

［11］范礼理，曾贵云．葛根的药理研究-Ⅱ葛根黄酮对冠状循环心脏血流动力学和心肌代谢作用［J］．中华医学杂志，1995，55(10):724．

［12］Yao H W，Li J，Jin Y，et al．Effect of leflunanide on immunological liver injury in mice［J］．World J Gastroenterol，2003，9(2):320-323．

［13］刘冬英，王 茵．茶叶多酚心血管保护作用的分子机制研究进展［J］．食品科学，2010，31(21):464-468．

［14］沈生荣，赵玉芳，凌备备，等．儿茶素对羟自由基诱发SOD基因序列改变的影响［J］．浙江大学学报:农业与生命科学版，2000，26(1):25-29．