反相高效液相色谱法测定升麻药材中升麻苷H-1的含量

郭英

反相高效液相色谱法测定升麻药材中升麻苷H-1的含量

郭英

目的 探讨采取反相高效液相色谱法测定升麻药材中升麻苷H-1的准确性和临床意义。方法 采取反相高效液相色谱法进行测定升麻药材中升麻苷H-1的含量, 色谱柱：HE XP ODS-A色谱柱(4.6mm×250.0mm, 5.0 μm)；流动相：乙腈-水-磷酸(35：65：0.4)；流速：1.0 ml/min；柱温：26℃；波长：203nm。结果 升麻药材中升麻苷H-1的线性回顾方程为Y=781023X-16783.3, r=0.9999,在0.99～28.6 μg/ml范围内与峰面积积分值呈现良好的线性关系。结论 采取反相高效液相色谱法进行测定升麻药材中升麻苷H-1含量具有较高的应用效果, 操作比较简单, 而且准确性较高, 是控制升麻药材质量的重要方法。

升麻；升麻苷H-1；反相高效液相色谱法升麻是临床中常见的中药, 而且升麻药材的化学成主要是酚酸类化合物与三萜皂昔类化合物。如何进行有效的控制升麻药材质量是临床中常见的一个问题［1］。本文采取反相高效液相色谱法进行测定升麻中升麻苷H-1含量, 具有一定的效果, 具体的分析如下。

1 材料与方法

1.1 研究材料 仪器：Water高效液相色谱仪、KQ5200B型超声清洗仪、HAN-GPING FA1104型电子天平、VV2000型旋转蒸发仪。试剂：乙腈作为色谱纯, 而其他试剂均为分析纯。升麻苷H-1对照品(由中国药品生物制品检定所而提供), 升麻药材均购于四川和云南以及安徽与河北等地, 且均鉴定为升麻。

1.2 方法 此次研究对于升麻中的升麻苷H-1的含量主要采取反相高效液相色谱法进行测定, 其反应条件为色谱柱：HE XP ODS-A色谱柱(4.6 mm×250.0 mm, 5.0 μm)；流动相：乙腈-水-磷酸(35：65：0.4)；流速：1.0 ml/min；柱温：26℃；波长：203 nm。

2 结果

2.1 系统适用性试验 在上述条件下选取供试品溶液和对照品溶液以及阴性空白样品溶液均为20 μl, 而且采集时间为60 min。而且色谱图中升麻苷H-1的保留时间主要为26 min,且被测峰与其他峰分离较好, 理论塔板数=17000。具体的图像显示如下图1。

图1 对照品与供试品反相高效液相色谱图

2.2 线性关系考察 精密称取升麻苷H-1对照品溶液0.5 μl、1.0 μl、2.0 μl、5.0 μl、10.0 μl, 并将其置入25 ml的量瓶中,并注入液相色谱仪, 并以峰面积对进样量浓度进行回归性分析, 回归方程为Y=781023X-16783.3, r=0.9999,在0.99～28.6 μg/ ml范围内与峰面积积分值呈现良好的线性关系。

3 讨论

升麻的质量控制一直是药品检测中的一个难点, 也是重点。而且临床中有资料显示, 不同的升麻品种中所含的升麻苷H-1含量也不相同［2］。

本次研究显示, 在测定升麻药材中的升麻苷H-1含量采取反相高效液相色谱法进行测定具有较好的应用效果。而且这种方法的测定重复性比较好, 而且可靠性比较强［3］。并且本次研究中测定升麻苷H-1在203 nm内具有较好的吸收效果。因此, 本次研究波长选取为203 nm, 有效的提高试验的准确性。本次研究中对于溶液的制备依据《中国药典》升麻药材含量的测定方法而制备。并采取乙腈-水-磷酸(35：65：0.4)的流动相, 而且这种方法也比较方便, 重现性也比较好, 有效的提高试验准确性。

综上所述, 临床中采取反相高效液相色谱法进行测定升麻药材中的升麻苷H-1含量均具有较好的应用效果。而且这种操作方法也比较简单, 结果的准确性也比较高, 重现性与回收率均比较高。是控制升麻药材质量的重要方法, 值得应用。

［1］ 姚梅芬,王岳峰,李展,等.升麻饮片质量标准研究.科技导报, 2009, 22(17):223-224.

［2］ 潘瑞乐,陈迪华,斯建勇,等.反相高效液相色谱法测定不同品种升麻中27-脱氧升麻亭的含量.中南药学, 2007, 14(3): 202-203.

［3］ 郭珉,李珠华,张志勤,等.RP-HPLC法同时测定复方升麻颗粒中异阿魏酸、葛根素和芍药苷.中成药, 2012,21(6):455-456.

473400 河南省南阳市唐河县人民医院检验科