葡菊胶囊对老龄鼠抗氧化能力的影响

周丹英 余 琪 姜 艳 林红梅 沈晓霞 陈石生

浙江省中药研究所有限公司，浙江杭州 310023

葡萄籽和菊花具有很强的抗氧化活性[1-4]，是很好的氧自由基清除剂和脂质过氧化抑制剂，可对氧化损伤起到保护作用[5-6]。菊花是浙江的道地药材，是“浙八味”之一。浙产菊花品质优良，本单位利用菊花等原料开发一个具有抗氧化功效的保健食品。葡菊胶囊是公司自行研发的保健食品，主要原料为葡萄籽和菊花，经过粉碎、渗漉、减压浓缩、喷雾干燥等工艺，制成胶囊剂，该产品的标志性成份为原花青素和总黄酮。

本文就葡菊胶囊对老龄大鼠血清丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）活力的影响进行研究，为进一步开发利用葡萄籽、菊花资源提供实验依据，证实葡菊胶囊的抗氧化功效。

1 材料与方法

1.1 实验材料

葡菊胶囊由本公司提供，是以葡萄籽、菊花为原料的复方制剂。利用粉碎、渗漉、减压浓缩、喷雾干燥等工艺，将其制成胶囊剂。规格0.35 g/粒，人体推荐剂量为每日2.7 g/60 kg体重，取胶囊内容物进行实验。

1.2 仪器与试剂

722分光光度计，MDA、SOD和GSH-Px试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 实验动物

SD 大白鼠，12 月龄，雄性，体重 559-724 g，40 只；青年SD大鼠，雄性，体重209～226 g，10只。由中国科学院上海实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK（沪）2007-0005。 饲养室温度 20～26°C，相对湿度：40%～70%，实验动物使用许可证号：SYXK（沪）2007-0008。大鼠饲料由苏州双狮实验动物饲料科技服务有限公司提供，登记证号：苏E 饲生字（2002）006。

1.4 实验方法

12月龄大鼠随机分组：按血清中MDA水平分组，随机分为1个老龄对照组和3个受试样品剂量组。另设1个青年对照组。样品的配制：取样品0.225 g/kg、0.45 g/kg、1.35 g/kg，分别加蒸馏水至10 mL，即为低、中、高三个剂量组的供试液。3个剂量组给予相应剂量的受试样品灌胃，两个对照组给予蒸馏水灌胃，连续4周。每周对动物称重一次。第31天各组动物去眼球采血，离心后取血清；测定血清SOD（羟胺比色法）和GSH-Px活力，测定方法按试剂盒操作要求进行。

1.5 统计学方法

用SPSS 13.0软件进行方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 葡菊胶囊对老龄大鼠体重的影响

样品各剂量组的动物体重与老年对照组的动物体重相比，均差异无统计学意义（均P>0.05）。见表1。

表1 样品对动物体重的影响（±s，g）

表1 样品对动物体重的影响（±s，g）

注：低、中、高剂量组样品浓度分别为0.225、0.45、1.35 g/kg

组别 动物数（n） 初始体重 中期体重 终期体重老年对照低剂量组中剂量组高剂量组青年对照组10 10 10 10 10 638.70±58.59 617.10±45.46 609.40±37.39 642.30±29.41 215.70±5.01 646.40±68.02 626.60±39.39 623.60±42.44 654.20±29.18 332.10±9.30 654.40±66.63 639.70±45.81 634.90±41.37 661.20±29.28 408.10±16.29

2.2 葡菊胶囊对老龄大鼠血清过氧化脂质的影响

实验前，老年对照组的MDA明显大于青年对照组；实验末，样品的0.45 g/kg、1.35 g/kg剂量组的MDA含量与老年对照组相比，均明显降低；实验末与实验前比较，样品0.45 g/kg、1.35 g/kg剂量组实验末的MDA含量均明显降低。见表2。

表2 血中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量（±s，nmol/mL）

表2 血中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）含量（±s，nmol/mL）

注：与老年对照组相比，*P<0.05；与实验前相比，△P<0.05

组别 动物数 实验前 实验末老年对照组低剂量组中剂量组高剂量组青年对照组10 10 10 10 10 4.11±0.25 4.10±0.23 4.10±0.18 4.14±0.16 1.95±0.85*4.19±0.35 4.01±0.30 3.45±0.34*△3.25±0.36*△1.97±0.27*

2.3 葡菊胶囊对老龄大鼠血清SOD活力的影响

样品0.45 g/kg、1.35 g/kg剂量组的SOD活性与老年对照组的SOD活性相比，显著升高。见表3。

2.4 葡菊胶囊对老龄大鼠血清GSH-Px活力的影响

样品0.45g/kg、1.35g/kg剂量组的GSH-Px活性与老年对照组的GSH-Px活性相比，显著升高。见表4。按《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）进行结果判定：样品葡菊胶囊对老龄大鼠具有抗氧化功能。

3 讨论

本产品是以葡萄籽、菊花为原料的复方制剂，利用粉碎、渗漉、减压浓缩、喷雾干燥等工艺，将其制成胶囊剂，具有抗氧化的保健功能。我国的葡萄籽、菊花资源非常丰富，国外以葡萄籽提取物中的低聚原花青素作为主要活性成分的药品或食品营养补充剂已深入人们日常生活，国内对该类产品的开发才刚刚起步，近年来在人们越来越注重绿色、健康的情况下。菊花黄酮资源丰富，安全性高，具有消炎、抗菌、抗氧化等药理作用。葡萄籽和菊花自身独特的保健功能也在逐渐得到认可。研究和开发葡萄籽、菊花资源，使其成为合成抗氧化剂的替代品是很有意义的。

表3 实验末血中超氧化物岐化酶（SOD）活性（±s，U/mL）

表3 实验末血中超氧化物岐化酶（SOD）活性（±s，U/mL）

注：与老年对照组相比，*P<0.05

组别 动物数 超氧化岐化酶活性老年对照组低剂量组中剂量组高剂量组青年对照组10 10 10 10 10 118.43±9.83 127.53±10.90 146.19±10.81*155.01±13.09*206.21±14.30*

表4 实验末血中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性（±s，U/mL）

表4 实验末血中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性（±s，U/mL）

注：组与老年对照组相比，*P<0.05

组别 动物数 谷胱甘肽过氧化物酶活性老年对照组低剂量组中剂量组高剂量组青年对照组10 10 10 10 10 1016.53±250.82 1180.82±332.49 1454.69±215.98*1732.04±277.22*2078.98±259.29*

葡萄籽提取物中有大量的活性酚羟基，是氢的供体，能有效地清除多种活性氧自由基，影响某些酶的生物活性，具有极强的抗氧化活性[7]。葡萄籽提取物中的原花青素是一种良好的氧游离基清除剂和脂质过氧化抑制剂，可有效清除超氧阴离子自由基和羟基自由基，也参与磷脂、花生四烯酸的新陈代谢和蛋白质磷酸化，保护脂质不发生过氧化损伤[8]。 Bagchi D等[9]研究了原花青素（Pc）对超氧阴离子的清除能力，发现Pc对氧自由基有浓度依赖性的抑制作用，是比VC和VE是更有效的自由基清除剂。葡萄籽提取物中的原花青素含有多个酚性羟基，在体内被氧化后释放出H，竞争性地与自由基及氧化物结合，从而保护脂质不被氧化，阻断自由基链式反应。葡萄籽提取物清除体内的氧自由基与增强机体抗氧化酶活力的过程同时进行，在初始阶段葡萄籽提取物以清除体内氧自由基为主，达到一定程度之后，则以增强机体抗氧化酶活性为主[10-11]。MDA是自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸而引发的脂质过氧化作用的最终分解产物。杭白菊是产于我国浙江的一种药食两用的菊科草本植物，其中也含有黄酮类、多酚类等物质。在早期的研究中，已经研究了杭白菊清除活性氧自由基 、保护人红细胞膜、抗疲劳和降血脂等方面的作用[12-14]。秦卫东[15]进行了杭白菊提取物抗氧化性能的研究，结果说明杭白菊的乙醇提取物具有较大的抗氧化活性。葡萄胶囊通过清除体内的氧自由基，使血清中MDA含量显著减少，同时通过有效清除多种活性氧自由基，淬灭单线态氧，恢复并增强SOD活性，通过抑制过量H2O2的产生，使谷胱甘肽恢复到正常水平，恢复并增强了GSH-Px的活性，从而强化机体的抗氧化系统。

本实验从动物实验的角度证明了葡菊胶囊能显著降低老龄大鼠血清MDA含量，同时提高SOD活力，证明了葡菊胶囊的抗氧化作用。葡菊胶囊能有效提高体内抗氧化酶活性，清除自由基，降低体内脂质过氧化发生水平。因此，服用葡菊胶囊对于提高人体抗氧化能力，增进身体健康水平有重要意义。我国有着丰富的葡萄资源，选用葡萄籽为原料，对这类抗氧化活性成分进行提取开发，无论是鉴于葡萄籽的利用，还是天然抗氧化剂市场的需求，都具有巨大的经济效益和社会效益。

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