高产多糖香菇和灵芝的品种筛选

郭 兴，邢振楠，任广明，高智涛

（黑龙江省伊春林业科学院，黑龙江伊春 153000）

食用菌产业是一项集经济效益、生态效益和社会效益于一体的短平快农村经济发展项目，专家们普遍认为，进入21世纪，随着人们生活水平的不断提高，危害人类健康的问题不是饥饿和营养不良，而是由于经济提高，食物富裕，体力活动减少而带来的慢性疾病，如心血管、高血压、糖尿病以等，而具有真核的菌类食品，以其能产生抗细菌、抗病毒作用，并对人体有保健功能而广泛受到重视，受到越来越多人的青睐。目前国际市场对食用菌的需求正不断上升，近几年食用菌每年的产值达250～280亿。食用菌产业被认为是21世纪的朝阳产业。食用菌又是一类有机、营养和保健的绿色食品，发展食用菌产业，符合人们消费增长和农业可持续发展的需要是农民快速致富的有效途径。

真菌多糖可以制成抗肿瘤、抗病毒药品口服或者进行注射，还可以作为保健品中的添加物能起到延缓衰老调节免疫力的作用，也是新药开发的重要途径之一。现在多糖体也被广泛应用于食品行业，例如多糖饮料，多糖面包等等，并且市场需求量较大。在保健品行业多糖应用更为广泛，配合蛋白质、核酸等微量元素制成的多糖胶囊其抗衰老、抗疲劳免疫调节作用发挥的淋漓尽致。

1 材料

1.1 供试菌株

供试菌种见表1，由伊春林业科学院原生态食用菌研究所保藏。

1.2 试剂

实验用试剂见表2。

1.3 仪器与设备

实验用仪器、设备见表3。

表1 15个香菇品种和8个灵芝品种Tab.1 15 mushrooms and 8 ganoderma lucidum varieties

表2 所用试剂Tab.2 Reagents used

表3 所用仪器Tab.3 Instruments used

2 方法

2.1 食用菌多糖的提取工艺流程

预处理→浸提→过滤→浓缩→醇析→去蛋白→食用菌多糖。

2.2 培养基的配制

CYM培养基含葡萄糖20 g、蛋白胨2 g、酵母膏2 g、硫酸镁0.5 g、磷酸氢二钾1 g、磷酸二氢钾 0.46 g 和 1 000 mL 水。［1］

2.3 实验方法

（1）CYM培养基摇瓶培养，培养温度28℃，150 r/min，CYM培养基摇瓶培养扩繁菌丝体，过滤，60℃干燥菌丝体，称干重。

（2）按照水:干菌丝=30∶1沸煮菌丝5 h，过滤取上清浓缩，加入95%酒精至酒精终浓度达75%。－4℃过夜醇沉食用菌多糖。

（3）4 000 r/min离心15min沉淀食用菌多糖，30∶1水稀释沉淀，按照体积比3∶1加入sevag试剂（氯仿:异戊醇 =24∶1），涡旋震荡充分混匀，4 000 r/min离心15 min去除蛋白及杂质，取上清，3倍体积的95%乙醇沉淀多糖，4 000 r/min离心15 min后，沉淀物60℃烘干，所得即为食用菌多糖。

2.4 食用菌多糖标准曲线的建立

以葡萄糖制作标准液，采用硫酸蒽酮比色法，取7支大试管，按表4数据配制一系列不同浓度的葡萄糖标准液。

表4 葡萄糖标准液制作表Tab.4 The production table glucose standard solution

在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0 mL，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口封好，以防蒸发。自水浴重新煮沸起，准确煮沸10 min取出，用流水冷却，室温放置10 min，在620 nm波长下比色。以标准葡萄糖含量作横坐标，以吸光值作纵坐标，作出标准曲线，如图1 所示［2］。

2.5 食用菌多糖的提取率、多糖产量的测定

提取率计算如下:

图1 葡萄糖标准曲线Fig.1 The glucose standard curve

式中:m1为紫外分光光度计检测的多糖含量，g;m2为食用菌菌丝体的干重，g［3］。

因为培养液体积不同会导致食用菌菌丝体产量不同，所以多糖产量为每100 mL培养液培养菌种所产生出来的。

3 结果

3.1 食用菌多糖标准曲线的建立

经紫外可见光分光光度计检测，将所得的数据进行回归处理，得到回归方程Y=0.006 2X+0.1426（R2=0.996 1）

3.2 食用菌多糖的提取率、纯度、多糖产量的测定

由表5可知，香菇15个品种中多糖产量最多的是品种9 608，单个三角烧瓶 （液体培养基300 mL）可产生干菌丝体2.04 g，去蛋白后多糖干重产量为0.36 g，提取率为7.2%，该品种多糖产量为48.96 mg/100 mL。

由表6可知，灵芝8个品种中多糖产量最多的是品种G9，单个三角烧瓶 （液体培养基300 mL）可产生干菌丝体3.55 g，去蛋白后多糖干重产量为0.49 g，提取率为4.7%，该品种多糖产量为55.62 mg/100 mL。

4 结论

通过选取15个香菇品种和8个灵芝品种进行多糖含量检测，得出其中香菇、灵芝多糖产量最高的品种是9 608和G9，多糖产量分别为48.96 mg/100 mL和55.62 mg/100 mL。

表5 香菇15个品种多糖提取数据表Tab.5 Polysaccharide extract data of 15 species of mushrooms

表6 灵芝8个品种多糖提取数据表Tab.6 Polysaccharide extraction data of 8 species of ganoderma lucidum

香菇和灵芝多糖含量差异在于相同培养条件下，灵芝液体培养产生菌丝稠密、量多，而香菇液体培养菌丝成球，量较灵芝少。以香菇9 608和灵芝G9为例，可以看出灵芝菌丝产量高于香菇，是香菇的1.74倍，而提取率却为香菇的0.65倍，多糖产量是香菇的1.14倍，说明灵芝多糖产量高于香菇，而香菇多糖的纯度较灵芝多糖的高。

】

［1］乐 涛，陈凤曾，姬松山.六个香菇菌株液体菌种代料栽培的比较试验［J］.食用菌，2006，8（2）:34 －37.

［2］郭晓蕾，朱思潮，翟旭峰，等.硫酸蒽酮法与硫酸苯酚法测定灵芝多糖含量比较［J］.中华中医药学刊，2010（9）:22－25.

［3］张素霞.香菇多糖提取工艺的比较研究［J］.长江蔬菜，2009（14）:52－55.