椰果样品亚硝酸盐的检测

武原霞

（天津市武清区产品质量监督检验所，天津 301700）

椰果样品亚硝酸盐的检测

武原霞

（天津市武清区产品质量监督检验所，天津 301700）

摘 要：通过研究椰果样品低浓度区亚硝酸盐的检测不准确的问题，科学分析造成检测结果不准确的原因，在大量试验积累的基础上，建立新的检测方法。在采用国标检测方法的同时调整样品前处理方法，改变样品的稀释倍数，采用不同精度的分光光度计，并根据被分析样品组分的浓度，减低标准曲线的浓度，得到标准曲线的R2值为0.999 7，曲线线性好。从而得出正确检验结论。并通过不同实验方法进行证实，证明此检测方法灵敏度高，稳定性好，可操作性强。

关键词：椰果；亚硝酸盐；检测

在椰果样品亚硝酸盐指标检测过程中，用GB5009.33-2010《食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》分光光度法[1]进行样品处理，发现721型分光光度计低浓度区标准曲线线性不好，造成检测结果在检出限附近波动，存在合格与不合格的差别。通过对椰果样品的亚硝酸盐值反复检测，认真分析，经过大量的试验积累，建立如下检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料与方法

椰果样品（市售）。

蛋白沉淀剂Ⅰ：亚铁氰化钾溶液（53 g/L），取亚铁氰化钾53.0 g,用水稀释并定容至1 000 mL。

蛋白沉淀剂Ⅱ：乙酸锌溶液（110 g/L），取乙酸锌110.0 g,冰醋酸15 mL用水稀释并定容至1 000 mL。

显色剂Ⅰ：对氨基苯磺酸溶液（2 g/L）：称取对氨基苯磺酸2.0 g，加水800 mL，于水浴上加热溶解后，冷却过滤，滤液徐徐加入盐酸100 mL，并时时搅拌，再加水溶解使成1 000 mL。

显色剂Ⅱ：盐酸萘乙二胺溶液（1 g/L）：称取0.2 g盐酸萘乙二胺，用水稀释并定容至200 mL。本试剂为现配现用，放入棕色瓶中，避光保存。

四硼酸钠饱和液：称取四硼酸钠5 g，加水50 mL，微微加热溶解后，冷却至室温，再加水定容至100 mL。

试验中所用试剂均为分析纯，所用水为去离子水。

1.2 仪器与设备

BS224S电子天平：赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；TU1900紫外分光光度计：北京普析通用仪器有限公司；SJ204-230食品粉碎机：苏泊尔公司；HS3120超声波清洗器：天津恒奥科技有限公司。

1.3 检测方法

1.3.1 椰果样品制备

将待测椰果样品摇匀，将椰果（固液混合物）约200 g放入食品粉碎机中打碎，直至样品呈细腻糊状待用。因椰果样品不含脂肪且含有低于1%蛋白质，因此依次准确称取10 g、5 g、2.5 g、2 g样品放入4个不同编号的100 mL比色管中，加入蛋白沉淀剂Ⅰ和蛋白沉淀剂Ⅱ各2 mL，四硼酸钠饱和液4 mL，超声均质5 min，分别将样品制成 1∶10、1∶20、1∶40、1∶50 4个不同稀释度的样品混合液，并定容到100 mL比色管中。用定量滤纸过滤，弃去最初滤液15 mL，其余滤液待用。

1.3.2 亚硝酸钠标准曲线的制备及样品测定

准确称取经105℃～110℃干燥恒重的亚硝酸钠约0.0100 g，加水溶解并定容至100 mL，其浓度相当于100 mg/mL，作为标准原液，贮存于4℃。临用时，取适量标准原液，分别用水稀释至（0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.75、1.0、1.25 mg）/50 mL，同时取样品滤液 40 mL，加入显色剂Ⅰ4 mL，摇匀后静置3 min～5 min，加入显色剂Ⅱ2 mL，加水摇匀后定容50 mL，静置15 min，于540 nm测定其吸光度。并绘制标准曲线（见图1低浓度区工作曲线）。合理选择标准曲线中标液的浓度，标准曲线的R2值为0.999 7，曲线线性很好。说明紫外分光光度计测亚硝酸盐低浓度区线性好，检测低浓度数值更准确。通过标准样品标准曲线，最后对可疑检测结果进行分析，得出的检测结论是未检出（检出限≤1.0 mg/kg）。

图1 低浓度区工作曲线Fig.1 The working curve of low concentration

2 结果分析

2.1 标准溶液曲线浓度和仪器精度对检测结果的影响

椰果样品的亚硝酸盐含量很低或没有，为保证检测数据的准确性，将标准曲线的中亚硝酸盐标准溶液的浓度降低了10倍。做出了标准曲线（图1低浓度区工作曲线）。同时，我们设置的标准曲线的浓度是按常规标准曲线的浓度的1/10，这样做的主要目的是使检测仪器设备所设置的精度值更接近于样品的浓度，有效地避免了大尺子量小物的情况。从而降低了仪器误差。

同时用常规方法，用721型分光光度计（上海精密科学仪器厂）按GB5009.33-2010《食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》分光光度法,将亚硝酸盐标准溶液0.0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5 μg/50 mL，做出了图 2 所示的标准曲线（图2常规浓度区工作曲线）。

图2 常规浓度区工作曲线Fig.2 Conventional concentration curve

通过两个图的比较分析，不难看出图2的标准曲线的R2值为0.987 7，而图1的标准曲线的R2值为0.999 7，曲线的线性更好。通过认真观察，发现虽然图2的标准溶液的整体曲线呈线性，但在低浓度区线性不好，而椰果样品亚硝酸盐吸光度值主要集中检测低浓度区，用检测仪器线性不好的区域去检测样品，这无疑增加了仪器的系统误差，降低了检测的准确度。而上海生产的721型分光光度计属于简易分光光度计，检测器采用光电管，只适用于可见光区。而北京普析生产的TU1900紫外分光光度计仪器设备的检测精度本身高于721型分光光度计，因此，在建试验方法时，选择了精度高的TU1900紫外分光光度计。

2.2 椰果样品前处理方法的合理选择

1）考虑椰果样品特性，无脂肪、低蛋白（蛋白含量<1%）的情况，将蛋白沉淀剂Ⅰ和蛋白沉淀剂Ⅱ浓度降低，用量减少，少加四硼酸钠溶液。并经5 min超声波匀质，使取样更均匀。这是运用了常规样品处理中，达到样品处理效果的前提下，尽量少加处理剂的原则。一方面可以减少多余试剂对试验的干扰，还可以节省试剂，降低检测成本。

2）因椰果样品特性，其样品本身的亚硝酸盐的值很低，只会出现在标准曲线的低浓度区，按照GB5009.33-2010《食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》分光光度法中11.2将椰果样品稀释了大约100倍[1]，样品稀释后，检测结果大量出现在标准样品的低浓度区检出限临界值范围[2]，造成检测结果不准确。为此，将前处理样液浓度降低为 1∶10，1∶20、1∶40、1∶50 4个浓度。以减少检测误差。

3）检测用吸光度波长540 nm测定其吸光度。

2.3 验证实验

为了证实我们上述检测，用离子色谱法做证实性实验。依GB5009.33-2010《食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》(离子色谱法)测亚硝酸盐，标准曲线的R2值为0.999 0，曲线线性很好，通过标样标准曲线，最后对椰果可疑检测结果进行分析，得出的检测结论是未检出（检出限≤0.2 mg/kg）。

3 结论

对于椰果这种无脂肪、低蛋白的样品，其亚硝酸盐检测值主要集中在标准曲线的低浓度区，不能按常规的样品处理方式。应降低处理液的用量，改变检测吸光度值，降低亚硝酸盐标准曲线的浓度，将样液浓度降低为 1∶10、1∶20、1∶40、1∶50 4 个浓度。通过反复试验，证明该检测方法灵敏度高，稳定性好，可操作性强，得到更精准的检测结果。

对于任何一种检测方法，对于不同产品、不同精度的检测设备，视具体情况具体分析，灵活运用，才能得到准确的检测结果。

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[1]中华人民共和国卫生部.GB5009.33-2010食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定 [S].北京:中国标准出版社,2010:1－9

[2]牟建平,章海平.榨菜中亚硝酸盐测定的不确定度分析[J].职业与健康,2008,24(1):28－30

Detection of Nitrite from Nata de Coco Sample

WU Yuan-xia
（Tianjin Products Quality Supervision and Inspection Institute，Tianjin 301700，China）

Abstract：The reason why the testing of nitrite at low concentrations from Nata de coco is inaccurate will be scientifically analyzed.Based on numerous tests,new detection methods are established.Through using method at national standard as well as adjusting sample preparation method,changing dilution degree of the sample,and adopting spectrophotometers at different precision,standard curve is reduced to a well degree of linearity with R2value of 0.999 7 according to samples and finally the correct conclusions can be drawn.This testing method is proved to have high sensitivity,good stability and strong operability.

Key words：Nata de coco；nitrite；detection

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.14.028

武原霞（1972—），女（汉），工程师，大学本科，研究方向：食品检测和食品安全。

2013-03-03