乔虎平,王金亮,江庆红,云月利,王维,彭宇
(1.湖北大学生命科学学院,湖北 武汉430062;2.湖南武冈县农业综合开发办,湖南 武冈422400;3.河南省商城县植保站,河南 商城465300)
柑桔红蜘蛛Panonychuscitri是我国柑桔产区普遍发生且为害最严重的有害螨类之一.柑桔红蜘蛛繁殖能力强,世代交替现象严重,其成螨、若螨、幼螨以口针刺吸叶、嫩枝、果实的汁液,破坏植物的叶绿素,使光合作用减弱,被害叶面出现灰白色斑点,严重时全叶失去绿色,变成灰白色,造成大量落叶、落花和落果,影响柑桔树的树势、产量和品质[1-2].
“绿满园”是一种新型环保杀螨剂,由湖北大学、湖南武冈市海达水果专业合作社和武汉信风作物科学有限公司共同研究与开发.我们前期的研究表明,“绿满园”水剂在室内对红蜘蛛具有较强的生物活性,对三突花蛛Ebrechtellatricuspidata和斜纹猫蛛Oxyopessertatus没有毒性,但对拟环纹豹蛛Pardosapseudoannulata的毒性较大[3].本研究报道“绿满园”水剂对柑桔红蜘蛛的田间防治效果及对非靶标生物金鱼Carassiusauratus的室内急性毒性.该研究将有助于 “绿满园”的进一步研究与开发.
1.1 供试药剂及对照药剂 64%“绿满园”水剂,由湖南省武冈市海达水果专业合作社提供.15%扫螨净乳油(上海泰和化工厂)、57%炔螨特乳油(山东麒麟农化有限公司)和15%阿维菌素乳液(河北农药化学公司),均从武汉市舵落口农资市场购买.
1.2 供试金鱼 金鱼从武汉市武胜路花鸟市场购买,体长(5.00±0.30)cm.在实验室内用经存放并曝气处理3d以上的脱氯自来水(pH值为6.5~7.0,水温18~20℃)驯养1周后用于实验.驯养过程中每天定时喂食1次,实验前1d和实验期间不喂食.驯养开始48h后记录金鱼的死亡率,死亡率小于5%方可用于实验[4-5].
1.3 “绿满园”水剂对柑桔红蜘蛛的田间防治效果测定 用水将“绿满园”水剂稀释成800倍、1 000倍和1 600倍.试验在湖南省武冈市邓元泰镇天心村大有作为脐橙(纽荷尔脐橙)生产基地进行,试验地为6年生果园,脐橙处于膨大期,施药当天为晴天.小区随机区组排列,小区面积80m2(9株),重复次数3次.于2008-2009年的6月20日,柑桔红蜘蛛高发期施药.用3.5马力柴油机喷雾机械均匀喷雾,每株用药液量为2.5kg.试验期间不施用其他药剂防治病虫害.施药前随机取样,每株按东、南、西和北4个方向取5片脐橙叶片调查柑桔红蜘蛛虫口基数,每处理调查5株.于施药后7d和15d按同样方法取样,调查柑桔红蜘蛛虫口数量变化,共调查3次.对照杀螨剂为15%扑螨净乳油和57%炔螨特乳油,均用水稀释2 000倍,采用同样的方法喷雾和调查柑桔红蜘蛛虫口数量变化.
1.4 “绿满园”水剂对金鱼的急性毒性测定 根据预实验结果,将64%“绿满园”水剂配制成如下浓度:0(对照)、7.95、9.02、10.23、11.64和13.21mg/L共6个浓度梯度.对照药剂为阿维菌素乳液,将其配制成浓度为15mg/L的水溶液.每处理放入随机选择的20尾金鱼,采用半静水式方式,每24h更换实验溶液一次,实验周期为96h.每天定期记录金鱼的死亡情况.及时取出死亡个体、金鱼的排泄物,并且保持通氧气[6-8].
1.5 药效计算方法及数据统计分析
虫口减退率/%=(施药前红蜘蛛数-施药后红蜘蛛)/施药前红蜘蛛数×100.
防治效果/%=(处理区虫口减退率-对照区虫口减退率)/处理区虫口减退率×100.
在不同处理杀虫剂对金鱼的急性毒性测定中,用Probit软件计算毒力回归方程、致死中浓度(LC50)、95%的置信区间和χ2.
所有数据计算均利用SPSS 13.0统计分析软件完成.各处理之间防治效果的差异采用单因素方差分析,平均数的差异显著性采用Duncan氏新复极差法进行比较.
2.1 “绿满园”水剂对柑桔红蜘蛛的田间防治效果 施药后第7天,“绿满园”水剂800倍液、1 000倍液和1 600倍稀释液柑桔红蜘蛛的虫口减退率分别为90.64%、84.63%和82.90%,而空白对照区的虫口数量上升了9.96%,3个处理的防效分别为91.45%、86.01%和84.40%.对照处理15%扫螨净2 000倍液的柑桔红蜘蛛虫口减退率和防效分别为85.51%和86.80%;另一对照药剂57%炔螨特2 000倍液处理的柑桔红蜘蛛虫口减退率和防效分别为85.01%和86.34%.
施药后第15天,“绿满园”水剂3个浓度处理的虫口减退率分别为96.81%、95.55%和83.29%,防效分别为97.21%、96.84%和85.54%;对照15%扫螨净2 000倍液药剂处理的虫口减退率和防效分别为83.04%和85.30%;57%炔螨特2 000倍液处理虫口减退率和防效分别为76.35%和79.57%.空白对照区柑桔红蜘蛛的数量增长了15.5%(表1).
表1 “绿满园”水剂防治柑桔红蜘蛛田间药效试验结果
数据统计分析表明,“绿满园”水剂800倍液和1 000倍稀释液在施药后7d和15d对柑桔红蜘蛛的防治效果均极显著地高于对照杀螨剂15%扫螨净和57%炔螨特,其中以800倍稀释防治效果最好,15d的防效达97.21%(表1).“绿满园”水剂1 000倍稀释液对柑桔红蜘蛛的田间防治效果与800倍稀释差异不明显.因此,该杀螨剂在大面积推广应用时,建议使用浓度为1 000倍稀释液.
整个试验过程中,作物生长正常,未见有药害现象.同时,“绿满园”对潜叶蛾有一定的防治作用,对其他非靶标生物无影响.
2.2 “绿满园”对金鱼的急性毒性 金鱼的死亡症状以鳃盖是否停止活动和对轻微刺激有无反应作为判断依据.实验金鱼在中毒后鳃盖停止活动,用玻璃棒或小镊子轻轻刺激尾柄部位,仍无反应即可确定为个体死亡[9-10].由表2可知,不同浓度的“绿满园”水剂处理金鱼时,随药液浓度的升高和染毒时间的延长,金鱼的死亡率均增加.“绿满园”水剂对金鱼的急性毒性小于对照药剂阿维菌素.用15mg/L的阿维菌素水溶液处理金鱼,48h后的死亡率为100%.
表2 不同杀虫剂处理下金鱼的死亡率/%
“绿满园”水剂对金鱼24、48、72和96h的致死中浓度LC50分别为13.22、11.53、10.52和9.62 mg/L(表3).化学物质对鱼的急性毒性致死中浓度LC50值,数值越小,表明化学物质的毒性越大.“绿满园”对金鱼的LC50值随时间的延长而下降,表明“绿满园”水剂对金鱼的毒性随药剂处理处理时间的延长而增强.
利用Turubell公式[11]计算安全质量浓度SC[SC=48hLC50×0.3/(24hLC50/48hLC50)2].“绿满园”水剂对金鱼的安全质量浓度SC值为2.63mg/L.根据国家环保局有毒化学物质对鱼的急性毒性分级标准(表4)[12],“绿满园”水剂对鱼类为高毒.因此,在使用“绿满园”防治红蜘蛛时,要考虑其对鱼的毒性等副作用.
表3 不同处理时间“绿满园”对金鱼的毒力回归方程及致死中浓度
表4 有毒化学物质对鱼的急性毒性分级
本试验结果表明,“绿满园”对柑桔红蜘蛛有较好的防治效果.64%“绿满园”水剂800倍和1 000倍稀释液在施药后7d和15d对柑桔红蜘蛛的防治效果均极显著地高于对照杀螨剂15%扫螨净和57%炔螨特,其中以800倍稀释液防治效果最好,15d的防效达97.21%.在整个试验过程中,脐橙生长正常,未见有药害现象产生.因此,可以利用“绿满园”防治柑橘红蜘蛛.同时,由于800倍与1 000倍稀释液对柑桔红蜘蛛的防效差异不明显,从节省成本出发,在大面积推广应用“绿满园”防治柑桔红蜘蛛时以1 000倍稀释液为佳.但绿满园”对金鱼为高毒,在使用时,严禁将剩余的“绿满园”直接倒入水塘中,以减少对鱼类的危害.本研究将为“绿满园”水剂的进一步研究与开发提供参考,为其安全使用提供科学依据.
[1]中国农业科学院郑州果树研究所.柑橘红蜘蛛和蚜虫的防治[J].果农之友,2011,8:50.
[2]刘旭,黄宁远,雷应华.有效控制柑橘树红蜘蛛的发生和危害[J].四川农业科技,2011,5:44.
[3]张梦蕾,李亚东,谢良善,等.“绿满园”对红蜘蛛的生物活性及对三种蜘蛛的毒性测定[J].湖北大学学报:自然科学版,2011,12(4):418-420.
[4]黄周英,谢进金,陈琳钦,等.敌敌畏对金鱼的急性毒性研究[J].毒理学杂志,2005,19(4):311-312.
[5]张娜.鱼类急性毒性实验及其条件选择[J].水利渔业,1999,19:6.
[6]Pistekova V,Voslarova E,Svobodova Z.Nitrite toxicity toDaniorerio:effects of chloride concentrations during acclimatization and in toxicity tests[J].Acta Veterinaria Brno,2005,74:435-440.
[7]崔静,陆光华.有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂对鲫鱼的急性毒性研究[C]//中国环境科学学会.中国环境科学学会学术年会论文集,2009:978-982.
[8]熊治延.环境生物学[M].武汉:武汉大学出版社,2000:134-137.
[9]周杜挺,何可佳.氟虫腈等7种杀虫剂对鲫鱼的毒性及安全性试验研究[J].农药科学与管理,2006,25(9):18-20.
[10]陈怀宇,谢进金,尤晓霞.汞对金鱼的急性毒性研究[J].泉州师范学院学报,2007,25(6):107-109.
[11]梁华芳,杜国平,罗开练.3种消毒剂对中国对虾的急性毒性试验[J].水产养殖,2011,32(7):1-4.
[12]国家环境保护局《水和废水监测分析方法》编委会.水和废水监测分析方法[M].4版.北京:中国环境科学出版社,2002:727-729.