探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断梅毒螺旋体（TP）感染中的临床应用

王娟娟 朱 坤

（1.山东省莱芜中心血站 山东 莱芜 271100；2.山东省莱芜市卫生职工中等专业学校 山东 莱芜 271100）

血清学检测是诊断梅毒的常用实验室检测方法［1］。其特异性较差，常用于大样本的初步筛选。本文采用ELISA方法对我院2010年1月至2012年9月就诊的梅毒患者68例进行检测，，探讨其在TP感染诊断中临床应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：我院2010年1月至2012年9月性病专科经过临床诊断和血清学检测诊断梅毒患者68例，其中Ⅰ期10例、Ⅱ期50例、Ⅲ期6例、潜伏期2例。同期内，我院接收自身免疫性疾病患者30例，均采用临床诊断和自身血清抗体检测，排除了梅毒阳性患者。

1.2 血清样本采集：采集梅毒患者68例和自身免疫性疾病患者30例的静脉血清样本6ml，冷藏备用。

1.3 仪器与试剂：奥地利TECAN生产的全自动酶标仪、美国BIO-RAD洗板机、恒温水浴箱、上海荣盛生物技术有限公司的TRUST试剂盒（批号20100907）、广州中山生物公司的ELISA试剂盒（批号20100713）、日本富士会社TPPA试剂盒（批号20101006）。

1.4 检测方法：采用TRUST和ELISA试剂分别检测研究对象血清样本，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书要求进行检测。

1.5 统计学处理：采用SPSS18.0统计软件进行分析。

2 结果

血清TRUST、ELISA、TPPA检测结果TRUST试验检测阳性50例、阴性48例，其中潜伏期2例、Ⅰ期梅毒2例、Ⅱ期梅毒4例，以及已经治愈的患者10检测结果均是阴性。TRUST假阳性率、假阴性率分别为16.67%（5／30）、26.47%（18／68）。与TPPA检测结果比较，TRUST假阳性率、假阴性率与TPPA有明显差异（χ2＝6.37，P＜0.05）。TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例，TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。TPELISA与TPPA检测结果完全一致，无假阳性和假阴性结果。TP-ELISA方法检测的假阳性率和假阴性率分别显著性低于TRUST（χ2＝7.19，P＜0.05）。见表1、表2。

3 讨论

梅毒是一种受到TP感染的传播性疾病，在临床备血、产前检查时对血清中TP的检测意义很大，提高TP正确诊断率是有效防止疾病传播的主要手段之一。TPPA减少了TPHA出现的假阳性和假阴性现象，检测结果更准确可靠，且特异性强，操作方便，但是价格较昂贵，不适合大样本及疗效观察应用。

表1 TRUST、TP-ELISA方法与TPPA的一致性（例数）

表2 TRUST、TP-ELISA方法的假阳性率和假阴性率

Zrein等在1995年合成了TpN47和TpN15，将其用于梅毒检测，发现ELISA方法的正确诊断率是99.8%，敏感性99.9%［2］。人体受到TP感染后4周～8周在血清中才能检测到一定数量的抗体［3］，特异性抗体较非特异性抗体早出现。本研究中发现，TRUST的假阳性率、假阴性率分别为16.67%（5／30）、26.47%（18／68）。表明 TRUST用于梅毒螺旋体感染的初步筛查也不适用。TP-ELISA方法采用酶联免疫吸附技术检测血清中存在的特异性抗体，可以作为梅毒螺旋体感染的单一筛选方法。本研究中发现，TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例，TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。

有文献报道［4］，在孵育过程中适当振荡可以消除沟状效应。TP-ELISA方法利用了基因重组工程合成抗原，检测血清中特异性抗体，特异性强、灵敏度高，与TPPA检测结果保持一致。TP-ELISA方法检测结果可靠，可以作为筛选和确认梅毒的首选方法，值得临床推广应用。

［1］马聪，王芳，徐武夷.梅毒螺旋体实验室检测技术的研究进展［J］.中华医院感染学杂志，2002，12（12）：958-950

［2］丛宪玲，姜日花 ，朱明姬，等.580例梅毒患者实验室检测结果分析［J］.中国实验诊断学，2003，7（3）：264-265

［3］Castro R，Prieto ES，Santo I，et al.Evaluation of an enzyme immunoassay technique for detection of antibodies against Treponema pallidum［J］.J ClinMicrobiol，2003，41（1）：250-253

［4］杨建兰，郎亦波.不同血清学诊断方法检测梅毒螺旋体的结果分析［J］.临床研究杂志，2009，8（5）：90-91