血清DcR3浓度水平与胃癌的相关性研究

林尤恩 刘祖宏 徐国栋 袁阳春 罗育青 林东洋 钟碧华

（揭阳市人民医院肿瘤科 广东 揭阳 522000）

胃癌在我国的发病率和死亡率居各种恶性肿瘤的首位，组织结构、病理分型和生物学行为较为复杂，且胃癌的早期诊断缺乏灵敏性和特异性较高的肿瘤标记物，就诊时75%病人已为播散性疾病。诱骗受体3（decoy receptor 3，DcR3），即 TR6或M68，是一种无明显跨膜序列的分泌型蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族的成员。在人体许多恶性肿瘤均出现过度表达，而在正常组织表达较少或不表达。本研究通过对胃癌患者及正常人血清DcR3浓度水平进行比较，并分析DcR3与胃癌临床病理参数之间的关系，探讨DcR3在胃癌发生发展过程中的作用。

1 资料及方法

1.1 一般资料：选择2009年1月至2010年12月我院收治的28例胃癌患者。入选标准：所有患者均为首次活组织病检并经两名病理师独立判断一致确诊为胃癌，近期无发热，均未接受放疗、化疗及生物治疗等，排除手术禁忌后接受手术治疗。其中，男性17例，女性11例，年龄26-74岁，平均（51.34±6.4）岁。≥60岁18例，＜60岁10例。肿瘤最大经线≥5cm者15例，＜5cm者13例。胃癌分类：低分化腺癌5例，印戒细胞癌3例，黏液腺癌11例定义为低分化组，管状腺癌9例定义为高分化组。存在淋巴结局部转移者11例，无淋巴结转移者17例。按照2002年美国肿瘤联合会（AJCC）制定的TNM分期法［1］：I期4例，II期11例，III期10例，IV期3例。选择同期28例正常健康体检人群作为对照组，其中，男性16例，女性12例，年龄25-73岁，平均（50.74±7.1）岁。两组在年龄、性别等一般资料上对比差异无统计学意义（P＞0.05），具可比性。

1.2 方法：检测两组人群的血清DcR3。检测的方法：28例胃癌患者均于入院后的次日，采集5ml空腹外周静脉血，放于室温中，静置取上层血清，于冻存管分装后放于-80℃低温冰箱冷冻备用。酶联免疫法的操作步骤严格按Human DcR3ELISA试剂盒（购自上海研鑫生物科技有限公司）的说明书进行。按说明书中所示比例配制试剂稀释液、洗涤缓冲液等，并在操作过程适当调整。按顺序将稀释好的血清样本及各浓度的标准蛋白分别加入96孔板对应孔中，滴入相应的生物素-结合物，放置室温孵育2h，洗板后将抗生物素蛋白链菌素-辣根过氧化物酶滴入，放置室温孵育1h，再次洗板后加入四甲基联苯胺，放置于室温避光10～20min后，滴入终止液，设定波长为450nm和630nm，以酶标仪测定吸光值，根据绘制的标准曲线，得出各孔样本浓度值，乘以样本的稀释倍数，测定出血清DcR3水平［2］。

1.3 统计学方法：采用SPSS17.0统计学软件。计量资料以表示，采用t检验；计数资料采用卡方检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清DcR3在胃癌患者中及正常人群中的表达：胃癌患者血清 DcR3［（179.34±69.35）pg／ml］的水平明显高于正常人［（108.56±76.78）pg／ml］，两组对比差异具统计学意义（P＜0.05）。

2.2 血清DcR3与胃癌的肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴转移情况和TNM分期等因素的相关性。

DcR3的表达与胃癌患者的分化程度、淋巴转移和TNM分期相关（P＜0.05），与肿瘤大小及年龄不相关（P＞0.05）。见表1。

表1 胃癌中DcR3的表达与各项病理因素间的关系

3 讨论

目前，胃癌的根治性切除手术是一种重要的能够达到胃癌治愈目的方法，为保证残段根治性切除手术的成功及胃癌术后的预后，关键是足够范围的胃癌淋巴结清扫，此外，根治性切除手术的成功与否还取决于对淋巴结以及临近脏器的转移作出较为准确的判断。现临床上术前主要依靠X线钡餐、CT、腹部超声等影像学检查以及纤维胃镜等检查方式判断肿瘤的浸润深度、临近脏器和淋巴结转移情况，但其准确率并不高，很多只能通过术后病理学检查验证。在我们的研究中发现，DcR3mRNA在胃癌组织中高表达，出现此种现象可能由于DcR3作为一种可以和Fas等配体特异性结合的诱捕受体蛋白分子，能竞争性地抑制死亡受体与配体的结合，使肿瘤逃避免疫细胞毒攻击，从而阻断了配体诱导产生的细胞凋亡，这一机制可能是胃癌产生和发展的一个重要环节。

因此，通过对DcR3的研究逐渐深入，除了通过检测血清DcR3有助于胃癌的诊断和分析外，随着针对DcR3的药物的问世，也会进一步推动胃癌治疗和预防的发展。

［1］杨梅松竹，廖芝玲，陈罡，等.血清DeR3水平与胃癌TNM分期的关系［J］.中国癌症防治杂志，2009；1（1）：24-6

［2］赵毅，邓鑫，马瑀，等.PTEN、Fas／FasL和 DCR3在胃癌组织中的表达及其临床意义［J］.现代肿瘤医学，2009；17（6）：1124-9