谢丽曲 詹湉湉 陈婉如 王长康 林丽花 曾兴有
(1.福建农林大学动物科学学院 福州 350002;2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福州 350013;3.福建省华龙集团饲料有限公司 福州 350003)
饲用抗生素由于其具有防病促生长作用,在畜禽生产中得到了广泛应用,但若滥用将对环境和食品安全带来危害。因此,寻找抗生素替代品,减少或取消抗生素在畜禽生产中的应用已成为迫在眉睫的问题。益生素具备无耐药性、无残留、无毒副作用和抗逆性强等特点在众多饲料添加剂中脱颖而出,成为较为理想的抗生素代替品,它的发现与应用在一定程度上解决了抗生素残留和动物耐药性等问题。
凝结芽孢杆菌作为有孢子性乳酸菌,具有调节动物肠道功能紊乱、维持肠道的菌群平衡、提高动物生长性能和机体免疫力等作用,因此,凝结芽孢杆菌作为饲料添加剂受到广泛关注。前人研究,凝结芽孢杆菌能够抑制大肠埃希氏菌、沙门氏菌等常见肠道致病菌[1],促进尖吻鲈生长[2],提高广西黄鸡的饲料转化率、日增重和存活率,且改善其肉质[3]。目前凝结芽孢杆菌在肉鸭上的应用研究报道较少,本研究通过在樱桃谷肉鸭饲粮中添加不同水平的凝结芽孢杆菌制剂,以探讨其对樱桃谷肉鸭生长性能、血清抗氧化指标、免疫器官指数的影响,为凝结芽孢杆菌在樱桃谷肉鸭配合饲料中的应用提供科学依据。
1.1 试验材料与动物 试验用凝结芽孢杆菌制剂(活菌含量为1×109cfu/g)由福建洛东生物技术有限公司提供。试验用1日龄樱桃谷公鸭,由漳州昌龙农牧有限公司提供。
1.2 试验设计 选取体质健康、体重中等的1日龄樱桃谷公鸭750 羽,随机分为5 组,每组5个重复,每重复30 羽。Ⅰ组为空白对照组,饲喂基础饲粮;Ⅱ组为抗生素对照组,在基础饲粮中添加30 mg/kg 杆菌肽锌;Ⅲ~Ⅴ组为试验组,在基础饲粮中分别添加100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg的凝结芽孢杆菌制剂,试验期21 d。基础饲粮组成及营养水平见表1。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
1.3 饲养管理 试验在漳州昌龙农牧有限公司进行。采用网上平养,24 h 光照,第1 周控温30 ℃,以后每周下降2 ℃,直至与环境温度一致。每天喂料1 次,自由采食和饮水,每3 d 刮粪1 次,每周进行1 次带鸭消毒。鸭群按常规免疫程序免疫。
1.4 测定指标及方法
1.4.1 生长性能指标测定 饲养期间记录每日采食量,于1日龄和21日龄以重复为单位空腹称重,计算平均日采食量、平均日增重和料重比(日采食量/日增重);每天记录鸭存栏数及死淘数,计算成活率(成活率/%=鸭存栏数/饲养鸭数×100)。
1.4.2 血清抗氧化指标测定 于21日龄,每重复组随机抽取2 羽体质健康、体重中等的樱桃谷肉鸭,用真空采血管翅静脉采血10 mL,转移到离心管中,静置3 min 后,3 000 r/min 离心10 min 分离血清,做好标记并于-20 ℃保存备用。
选用谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)作为血清抗氧化指标,用Microlab300 半自动生化分析仪测定,试剂盒均购自上海荣盛生物技术有限公司。
1.4.3 免疫器官指数测定 对采血后的鸭只进行屠宰(采血前称活体重),摘取胸腺、脾脏和法氏囊,用滤纸吸去其表面血液,用手术刀片剥离脂肪,称重,测定免疫器官指数。免疫器官(胸腺、脾脏、法氏囊)指数=免疫器官重(mg)/活体重(g)。
1.5 数据处理 数据采用spss13.0 统计软件进行单因素方差分析,差异显著后进行LSD 多重比较,以P<0.01(差异极显著),P<0.05(差异显著)作为差异显著性判断标准,结果用平均数±标准差(Mean±SD)表示。
2.1 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭生长性能的影响 由表2 可知,与Ⅰ组相比,试验组樱桃谷肉鸭平均日采食量均有所降低,而平均日增重分别提高了0.39%(P>0.05)、0.39%(P>0.05)和1.18%(P>0.05),与Ⅱ组相比差异均不显著;料重比,试验组较Ⅰ组分别显著(P<0.05) 降低了1.25%、1.88%和2.5%,其他各组之间差异均不显著(P>0.05);各组之间的成活率没有显著性差异(P>0.05)。
表2 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭生长性能的影响
2.2 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭血清抗氧化指标的影响 由表3 可知,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组与Ⅰ组相比,樱桃谷肉鸭血清谷胱甘肽过氧化物酶分别提高了1.96%(P>0.05)、1.64%(P>0.05)和6.53%(P<0.05);其他各组间差异不显著(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组的血清总超氧化物歧化酶较Ⅰ组有不同程度的提高,其中Ⅴ组提高了3.62%,但差异均不显著(P>0.05)。各组间血清丙二醛含量差异不显著,但试验组均低于对照组。
表3 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭血清抗氧化指标的影响
2.3 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭免疫器官指数的影响 由表4 可知,与Ⅰ组相比,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组胸腺指数均有所提高,其中Ⅴ组较Ⅰ组显著提高26.67%(P<0.05)、较Ⅲ组显著提高26.02%(P<0.05),其他各组间差异不显著(P>0.05)。试验组脾脏指数较空白对照组呈上升趋势。Ⅴ组法氏囊指数较Ⅰ组和Ⅱ均显著提高6.37%(P<0.05)。
表4 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭免疫器官指数的影响
3.1 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭生长性能的影响 众多研究表明凝结芽孢杆菌能产生多种营养物质供动物机体吸收利用,如维生素、短链脂肪酸、氨基酸、促生长因子等,它们不仅可参与动物机体的新陈代谢,还能促进小肠蠕动,改善肠道功能,从而促进机体对营养物质的消化与吸收[4-5]。试验表明,在樱桃谷肉鸭饲粮中添加凝结芽孢杆菌制剂能有效提高肉鸭的生长性能,降低其料重比,提高经济效益。MARK等[6]通过研究证明,凝结芽孢杆菌在50 ℃、pH为5.0的条件下能利用戊糖-磷酸盐途径有效地发酵分解木质素等。李国建等[7]研究表明,生长肥育猪饲料中添加凝结芽孢杆菌制剂可显著提高猪的平均日增重,降低饲料成本。霍军等[8]研究也表明,在生长育肥猪饲料中添加凝结芽孢杆菌制剂可以显著提高平均日增重,降低饲料成本和沙门氏菌阳性率,饲养效果与喹乙醇没有差异。王彦波等[9]在罗非鱼中的研究也证明了这一观点。ALEX等[10]为评估凝结芽孢杆菌ATCC7050 对肉用仔鸡生产性能、肠道组织结构及微生物菌群的影响,采用600 羽1日龄肉用仔鸡随机分成5个处理组,每个处理四个重复,试验期42 d,结果表明,凝结芽孢杆菌ATCC7050 能提高肉用仔鸡的饲料转化率。这些研究结果与本研究结果一致。
3.2 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭血清抗氧化指标的影响 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是一种重要的催化过氧化氢分解的酶,广泛存在于机体内,它能特异催化还原型谷胱甘肽(GSH)与过氧化氢反应,清除体内有毒有害物质,起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。超氧化物歧化酶(SOD)是机体内重要的氧化还原酶,是清除体内有毒氧自由基(O2-)的关键性酶,起到保护细胞免受损伤的作用。丙二醛(MDA)是多不饱和脂肪酸过氧化的终末代谢产物,其含量反映氧自由基介导的脂质过氧化程度。本试验中,与空白对照组相比,试验组通过饲喂凝结芽孢杆菌能明显提高血清中谷胱甘肽过氧化物酶和总超氧化物歧化酶的活性,降低血清中丙二醛的含量,从而提高机体的抗氧化能力和免疫能力。
3.3 凝结芽孢杆菌对1~21日龄樱桃谷肉鸭免疫器官指数的影响 胸腺、脾脏和法氏囊是动物重要的免疫器官,是血液T 细胞和B 细胞的来源,参与细胞免疫、体液免疫及对抗原刺激进行免疫反应等。免疫器官指数的提高在一定程度上反映机体免疫功能的增强。众多研究表明,益生菌有提高机体免疫功能的作用[11-13]。本试验在樱桃谷肉鸭饲粮中添加凝结芽孢杆菌制剂,与空白对照组相比,试验组胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数均有不同程度的提高,可能是凝结芽孢杆菌在消化道的识别抗原部位发挥免疫佐剂的功能,使得相关淋巴组织处于较高免疫准备状态,从而加快免疫器官发育和免疫系统成熟[14]。与别的芽孢杆菌相似,凝结芽孢杆菌能够分泌凝结素等抗菌物质,穿透细胞膜,对链球菌、金黄色葡萄球菌等致病菌有拮抗作用,从而改善机体客观生活环境,提高机体的抗病力,减少动物疾病的发生[15]。
在1~21日龄樱桃谷肉鸭饲料中添加凝结芽孢杆菌制剂,可以提高其生长性能、抗氧化能力和免疫功能,三个不同梯度添加量中以300 mg/kg 效果最佳。
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