不同厂家三黄片中盐酸小檗碱溶出度的比较

陈晓兰，石晋枝，张永萍，徐 剑，刘 毅

(贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)

三黄片是由大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱经加工提取制成的糖衣片或薄膜片，可清热解毒、泻火通便，用于三焦热盛所致目赤肿痛、口鼻生疮、咽喉肿痛、牙龈肿痛、心烦口渴、尿黄、便秘，亦用于急性胃肠炎、痢疾[1]。其临床应用广泛，生产厂家众多，但各厂家生产条件和生产工艺的不同，临床疗效也不同。三黄片中盐酸小檗碱是发挥抗菌消炎作用的主要成分，即三黄片中盐酸小檗碱的含量及在体内的释放速度与程度都直接影响临床疗效。而在三黄片的质量标准中没有对盐酸小檗碱等有效成分溶出度的控制指标。本研究中测定了市场上10个厂家的三黄片中盐酸小檗碱的溶出度[2]，计算溶出率且分别绘制累积溶出曲线，并对各溶出曲线进行方程拟合，为三黄片的质量评价提供参考和依据。

1 仪器与试药

RC－80型药物溶出测试仪(天津天光);紫外可见分光光度计(GBC Cintra，澳大利亚照生公司);AE/240型电子天平(上海梅特仪器有限公司);科导SK8210HP型超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);JA2030型全自动天平(上海良平仪器表有限公司)。盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号为110713－200911);甲醇(色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司);盐酸(重庆川东化工有限公司，批号为20101101);水为纯化水。10个厂家样品分别为:A厂家(襄樊隆中药业有限责任公司，批号为100901，50片/袋);B厂家(河南圣光集团三恩药业有限公司，批号为11051501，规格为50片/袋);C厂家(广西恒拓集团仁盛制药有限公司，批号为100902，规格为50片/袋);D厂家(河南济源济世药业有限公司，批号为20110917，规格为24片/盒);E厂家(亚宝药业集团股份有限公司，批号为110507，规格为20片/盒);F厂家(广西金页制药有限公司，批号为100901，规格为50片/袋);G厂家(河南创新药业有限公司，批号为1103211，规格为48片/袋);I厂家(陕西盘龙制药集团有限公司，批号为2011001，规格为24片/盒)。H厂家(安徽华佗国药股份有限公司，批号为20110404，规格为24片/盒);J厂家(湖北仁悦药业有限公司，批号为110803，规格为50片/袋)。前8种均为糖衣片，后两种均为薄膜片。

2 方法与结果

2.1 测定波长选择

取盐酸小檗碱对照品溶液，在200～400 nm波长范围进行紫外扫描，选择具有较大较稳定吸收的波长345 nm为测定波长。

2.2 溶液制备

精密称取盐酸小檗碱对照品9.46 mg，加0.1 mol/L盐酸溶液制成9.46 g/L的贮备液。再精密量取贮备液0.1 mL置10 mL容量瓶中，用 0.1 mol/L盐酸溶液稀释并定容至 9.46 μg/mL，即得对照品溶液。取各厂家的三黄片各两片，分别研细，倒入具塞锥形瓶中，精密加入甲醇－盐酸(500∶1)的混合溶液60 mL，并用溶剂润洗研钵，密塞，称定质量，超声处理30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足失重，滤过，精密量取续滤液1 mL，置25 mL容量瓶中用甲醇－盐酸(500∶1)的混合溶液稀释至刻度线，即得供试品溶液。

2.3 方法学考察

标准曲线绘制:取盐酸小檗碱对照品溶液，分别取盐酸小檗碱的贮备液 0.05，0.10，0.30，0.50，0.70，0.90，1.10，1.30 mL 用0.1 mol/L盐酸溶液稀释并定容至50 mL容量瓶中，以0.1 mol/L盐酸溶液为空白对照，在345 nm波长处测定吸收度。回归方程为Y=45.367 X+0.035(R2=0.999 3)。结果表明，盐酸小檗碱质量浓度在0.946～24.600 μg/mL范围内与吸光度的线性关系良好。

精密度试验:取盐酸小檗碱对照品溶液，重复测定6次。结果的 RSD=1.53%，表明仪器的精密度良好。

重复性试验:取同一批供试品，依法制备6份供试品溶液，测定吸光度。结果的 RSD=2.70%，表明方法重复性良好。

稳定性试验:取同一批供试品溶液，分别于 0，2，4，6，8，12 h时进行测定。结果吸光度无明显变化，RSD=1.27%，表明盐酸小檗碱在甲醇－盐酸(500∶1)的混合溶液中12 h内稳定。

2.4 样品含量测定

按照2010版《中国药典(一部)》，三黄片中盐酸小檗碱的含量测定方法中供试品溶液制备方法处理供试品，在测定波长345 nm处测定吸收度，计算盐酸小檗碱的含量，每个厂家平行测定2片，结果三黄片中盐酸小檗碱平均含量分别为A厂家10.91 mg/片，B 厂家 24.70 mg/片，C 厂家 12.80 mg/片，D 厂家 15.54 mg/片，E 厂家 14.65 mg/片，F 厂家 12.48 mg/片，G厂家 16.30 mg/片，H 厂家 16.55 mg/片，I厂家 18.13 mg/片，J厂家 19.75 mg/片。

2.5 溶出度测定

溶出介质选择:取A厂家的三黄片3片，平行3份，分别放入水、0.1 mol/L盐酸溶液及人工胃液(不含胃蛋白酶)等溶出介质(经超声脱气处理)中，溶出介质体积为1 000 mL(符合漏槽条件)，转速是100 r/min，(37±0.5)℃恒温，将供试品置溶出杯中，开始计时，至规定时间(10，20，30，60，90，120 min)时取样(取样位置固定)，每次取样5 mL(同时补加同温度的上述溶出介质5 mL)，趁热过滤，取续滤液照2010年版《中国药典(一部)》附录ⅤA中紫外－分光光度法，即时测定吸收度。结果以0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质时，盐酸小檗碱的累积溶出量最大。

溶出时间考察:取A厂家的三黄片1片，平行3份，溶出介质为0.1 mol/L盐酸溶液1 000 mL(经超声脱气处理，符合漏槽条件)，转速是100 r/min，(37±0.5)℃恒温，将供试品置溶出杯中，开始计时，至规定时间(10，20，30，60，90，120，180，300 min)时取样(取样位置固定)，每次取样5 mL(同时补加同温度的上述溶出介质5 mL)，趁热过滤，取续滤液照2010年版《中国药典(一部)》附录ⅤA中紫外－分光光度法，即时测定吸收度。结果至120 min时多个厂家三黄片中盐酸小檗碱的累积溶出量达最大值，至180min时盐酸小檗碱的累积溶出量减少或不再增加，故测定溶出度的取样时间为 10，20，30，60，90，120 min。

样品溶出度测定:取各厂家三黄片1片，平行6份，溶出介质为0.1 mol/L盐酸溶液1 000 mL(经超声脱气处理，符合漏槽条件)，转速是100 r/min，(37±0.5)℃恒温，将供试品置溶出杯中，开始计时，至规定时间(10，20，30，60，90，120 min)时取样(取样位置固定)，每次取样5 mL(同时补加同温度的上述溶出介质5 mL)，趁热过滤，取续滤液照2010年版《中国药典(一部)》附录ⅤA中紫外－分光光度法，即时测定吸收度。结果见图1。

溶出方程拟合:通过数学模型对试验中的溶出数据进行拟合，推测溶出机制。在药物释放研究中常用的数学模型有动力学模型，包括零级动力学模型、一级动力学模型、Weibull分布模型、Higuchi模型等[3－4]。结果见表 1。

3 讨论

图1 不同厂家三黄片累积溶出曲线(n=6)

表1 不同厂家三黄片中盐酸小檗碱溶出模型拟合结果

虽然各厂家执行的同一标准，但由于生产条件和生产工艺及辅料的不同，各厂家生产的三黄片中盐酸小檗碱的含量测定结果存在明显的差异。多数厂家的三黄片中盐酸小檗碱在30 min时就能溶出50%，在2 h时溶出曲线可达到平衡，仅有J厂家能达到90%以上。另外除E厂家的三黄片外，其余均符合Weibull模型分布。然而中药成分多样复杂，其疗效受多方面因素的影响，这些建立在西药制剂上的溶出模型对中药制剂的适用性还有待进一步的考察。

在试验过程中发现，盐酸小檗碱的溶出度易受温度的影响，在热水中的溶解度较高而在冷水中的溶出度较低，在取出溶出液到测定的过程中若温度降低，很有可能会使盐酸小檗碱析出，溶出液中盐酸小檗碱的浓度变小，导致测定时吸光度减小，试验结果的不准确。所以在试验过程中应保证即取即测，尽量避免对试验结果产生影响。

本试验对不同厂家三黄片中盐酸小檗碱的溶出度进行了研究，分析不同厂家生产的三黄片的体外溶出度的差异，为三黄片的质量控制和质量提升奠定基础，同时也为三黄片的临床应用提供参考依据。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:457.

[2]龚海红.药物溶出度试验的应用概述[J].海峡药学，2008，20(11):123－125.

[3]黎 阳.基于拟合方法的药物溶出度数据的计算机处理[J].广西民族学院学报:自然科学版，1998，4(3):46－47.

[4]苏银发，陈浩华，白学敏，等.Excel规划求解法在药物溶出模型拟合和优选中的应用[J].中国医院药学杂志，2007，27(6):839－841.