枣庄市市中区牛羊布病流行病学调查

孟 巍 陈 萍 许瑞利 （山东省枣庄市市中区畜牧兽医局 277100）

刘书军 （山东省枣庄市市中区西王庄乡畜牧站）

邱兆民 （山东省枣庄市市中区齐村镇畜牧站）

朱瑞良* 李奕芙 （山东农业大学动物科技学院 泰安）

枣庄市市中区牛羊布病流行病学调查

孟 巍 陈 萍 许瑞利 （山东省枣庄市市中区畜牧兽医局 277100）

刘书军 （山东省枣庄市市中区西王庄乡畜牧站）

邱兆民 （山东省枣庄市市中区齐村镇畜牧站）

朱瑞良*李奕芙 （山东农业大学动物科技学院 泰安）

为全面了解枣庄市市中区牛羊布氏杆菌病的流行情况，为该病的预防和防治提供参考依据，开展了全区牛羊布氏杆菌病流行病学调查，采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验相结合的方式对枣庄市市中区采集870份(奶牛333份，羊537份)血清进行检测。结果：奶牛333份血清中，检出5份阳性，羊537份血清均为阴性，但通过调查问卷了解到，养殖户对布氏杆菌病知识了解甚少，自我防护意识不到位，今后应加强布氏杆菌病的宣传和检测工作，积极采取防控措施，以免造成病原从外流入本区。

布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的一种人畜共患的传染病，我国农业部将其列为二类动物疫病[1]，其特征是引起动物的生殖器官和胎膜发炎，引起流产、早产、不孕、不育、胎盘滞留、睾丸炎、关节炎、神经损伤及各种组织的局部病灶，牛、羊、猪最易感[2]，严重危害畜牧业生产和人类健康。虎红平板凝集试验与试管凝集试验是临床上用于检测布氏杆菌病的常用方法，虎红平板凝集试验简便易行，方便快捷，常用于样品的初步检测，但其检出阳性率较高，常有假阳性出现，在实际工作中，常采用虎红平板凝集试验初检，试管凝集试验复检的方法，便可得出快速、准确的结果[3]。

1 调查方法

1.1 问卷调查

设计牛、羊布氏杆菌病流行病学调查问卷，发放调查问卷62份，涉及全区6个乡镇。

1.2 血清学试验

1.2.1 血清的制备与保存 待血清析出时，分装入离心管，放于4℃冰箱用于试验检测，将其他备份血清放于-20℃冰箱冻存。

1.2.2 试剂 布氏杆菌病虎红平板凝集试验和布氏杆菌病试管凝集试验抗原、阳性血清、阴性血清均购自青岛易邦生物工程有限公司。

1.2.3 血清检测 对采集的870份血清使用布氏杆菌病虎红平板凝集试验初步检测，待其出现疑似阳性结果，再使用试管凝集试验进行复检。（1）虎红平板凝集试验方法及判定标准：参照国家标准GB/T18646-2002动物布氏杆菌诊断技术，在灭菌洁净的玻璃板片上，分别吸取被检血清30μL与虎红平板凝集抗原30μL混合均匀，同时以阳、阴性血清作对照。在4min内出现肉眼可见凝集现象判为阳性，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性。（2）试管凝集试验(SAT)方法及判定标准：首先稀释血清，稀释度依次为1∶12.5、l∶25、1∶50、1∶100。加入等量稀释后的抗原，混匀，则血清稀释度依次为l∶25、1∶50、1∶100、1∶200。同时做阴性对照和阳性对照及抗原对照，并配制比浊管。将全部试管、对照管及比浊管充分振荡后置37℃温箱24h，取出检查并记录结果[4]。参照比浊管，按各试管上层液体亮度判读，++++菌体完全凝集，100%下沉，上层液体100%清亮；+++菌体几乎完全凝集，上层液体75%清亮；++菌体凝集显著，液体50%清亮；+凝集物有沉淀，液体25%清亮；－凝集物无沉淀，液体均匀混浊。

2 结果与分析

2.1 调查问卷结果与分析

本次牛羊布氏杆菌病流行病学调查问卷结果汇总见表1。

表1 牛羊布氏杆菌病流行病学调查结果

一共发放调查问卷62份，其中养奶牛31户，养绵羊14户，养山羊28户，牛、羊混养2户，绵羊、山羊混养9户。养殖方式以圈养和圈养兼放养为主。77.4%养殖户有3年以上的养殖经验，只有48.4%的养殖户对布病有所了解，51.6%的养殖户不了解甚至不知道。有42户从外地购买牛、羊，其中有检疫证的34户。对饲养场进行定期消毒的户为56户，占总调查户的90.3%。屡配不孕的共计24户，流产率为9.0%，其中第一胎流产率为7.7%，对流产物进行消毒的为30户，占总调查人数的48.4%，进行无害化处理的户有34家，占总调查户的54.8%。

2.2 血清学结果与分析

2.2.1 奶牛血清学结果与分析 奶牛布氏杆菌病初检及可疑病例复检结果，见表2。由表2可知，初检结果7头牛为阳性，经试管凝集试验复检，2支试管凝集物无沉淀，液体均匀混浊，为阴性，5支试管菌体几乎完全凝集，上层液体75%清亮，判定为阳性。

表2 奶牛布氏杆菌病初检及可疑病例复检结果

2.2.2 羊血清学结果 羊布氏杆菌病初检及可疑病例复检结果，见表3。由表3可知，均为阴性。

表3 羊布氏杆菌病初检及可疑病例复检结果

3 讨论

布氏杆菌病是人畜共患的传染性疾病，由布氏杆菌引起。其临床特点是长期发热、多汗、关节痛、睾丸炎、肝脾肿大等，同时可引起母畜流产[5]，给畜牧业造成巨大的经济损失。

通过这次调研发现，本区畜间布鲁氏菌病感染率低。在采集的870份血样中，仅有5份牛血清为阳性。对于呈阳性的牛采取及时扑杀，焚烧、深埋、消毒等无害化处理，并做好登记备案、消毒灭源等其它疫点拔除工作，达到净化家畜布氏杆菌病的目的。

枣庄市中区作为布氏杆菌病无定义流行病区，对布氏杆菌病主要是以预防为主。在这次调研中发现：（1）仍有部分养殖户不了解布病相关防治知识，必须加大布病防治知识的宣传力度，使养殖户真正具备自我防范布鲁氏菌病的自觉性及技能性[6]。（2）畜间防制不足，无害化处理意识不强，应严格按防治程序进行无害化处理，定期消毒，减少畜间传播机率。（3）鲁氏菌布病防控措施没有完全到位，在免疫、检疫、监测、淘汰阳性畜、消毒等各项防控措施中，都不同程度的存在一些问题，在今后需加强基层兽医站的建设，增加防检设备投入，提高业务人员素质；加强检疫督查，对牲畜交易市场、定点屠宰场、农贸市场加大检疫督查力度，严禁未经检疫牲畜及产品进入市场，对各种违法行为要严肃处理，将传入风险降至最低。

近年来本区大力发展牛羊养殖业，从外省引进大量牛、羊，因此各部门应对布氏杆菌病引起足够的重视；全面、准确掌握疫情动态，加强布氏杆菌病的检测工作，积极采取防控措施，以免造成病原从外流入我区。

[1] 罗明星, 周碧君，王开功等. 贵州省家畜布氏杆菌病血清学检测[J]. 贵州农业科学, 2009, 37(1)∶ 109-110.

[2] 蔡一非. 奶牛布氏杆菌的分离鉴定、血清学检测方法比较与流行病学调查[D]. 乌鲁木齐∶ 新疆农业大学, 2008.

[3] 田峰. 湖北省2005-2009年畜间布鲁氏菌病血清学检测分析[D]. 武汉∶ 华中农业大学, 2010.

[4] 胡登林, 马长丽，爱尔拜尔等. 塔城地区牛羊布鲁氏杆菌病血清学调查与风险分析[J]. 湖北畜牧兽医, 2013, 34(1)∶ 26-27.

[5] 洛松西热. 西藏自治区当雄县布氏杆菌病血清学调查与防治对策[D].扬州∶ 扬州大学, 2010.

[6] 孙延星, 窦玉凤, 刘建平等. 新疆兵团农五师地区牛羊布鲁氏菌病流行病学调查及防制[J]. 中国畜牧兽医文摘, 2011, 44(8)∶ 70-71 .

S858.26

A

1007-1733(2013)10-0071-02

2013–07–17）

基金支持：本课题得到山东省现代农业产业技术体系羊产业创新团队(SATS-201226-3)和山东省畜牧兽医局项目支持。

*通讯作者