睫状神经营养因子与碱性成纤维细胞生长因子对大鼠视神经损伤后功能变化的影响

杨惠婷 姚 鹏 张晓娟

睫状神经营养因子与碱性成纤维细胞生长因子对大鼠视神经损伤后功能变化的影响

杨惠婷 姚 鹏 张晓娟

目的观察球后注射神经营养因子（睫状神经营养因子Ciliary neurotrophicfactor,CNTF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对大鼠视神经损伤后视觉诱发电位变化的研究。方法将45只健康成年大鼠、体重200～225g、Wistar大鼠随机分成三组，对照组、CNTF治疗组和bFGF治疗组，比较三组间大鼠F-VEP。结果视神经急性损伤后F-VEP波幅变得低而宽，对照组21d时诱导不出典型波形。结论CNTF治疗组有视神经保护作用，bFGF治疗组对视神经有保护作用，二者差异无显著性。

bFGF；CNTF；视网膜神经节细胞；视神经损伤；视神经保护

目前睫状神经营养因子CNTF及其受体广泛存在于神经系统能够促进多种神经细胞的存活，在神经系统发育、分化和损伤修复中对中枢神经再生的意义越来越引起人们的重视。因此本研究通过动物实验进一步印证和比较两种药物对视神经功能恢复的效果。

1 材料与方法

1.1 实验动物选取健康成年SD大鼠45只，雄性，体重200～225g，由哈尔滨医科大学动物实验中心提供。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组将实验组动物随机分为对照组、CNTF治疗组、bFGF治疗组。各组又分为7、14、21d三个时间，每组5只大鼠，每只动物进行单眼实验，另一眼作为正常对照。三个实验组视神经夹挫伤后，伤眼球后立即注射0.9%生理盐水注射液0.1ml、CNTF 0.1ml、bFGF 0.1ml(2000u)，双眼分别行F-VEP检查。分别于伤后7、14、21d随机处死动物取材，每次5只，处死前双眼分别行F-VEP检查。

1.2.2 观察方法闪光视觉诱发电位（F-VEP）：0.6%戊巴比妥钠麻醉大鼠后，Mydrin-p（日本参天制药公司）散瞳；采用银针电极，阻抗＜2kΩ，暗适应后在暗室内用全视野闪光刺器，先后分别刺激左、右眼，刺激频率1.7Hz，通频带宽1～100Hz，分析时间400ms，叠加200次，连续测量至少3次。得出F-VEP波形图。

2 结果

2.1 视觉诱发电位（F-VEP）正常大鼠F-VEP潜伏期短，电位幅值陡直。视神经急性损伤时测得的F-VEP波形变得低而宽。视神经损伤21d以后对照组对刺激无应答，诱导不出典型波形；CNTF治疗组F-VEP波形幅值较正常低缓，随时间延长逐渐接近于正常组；bFGF治疗组F-VEP波形与CNTF治疗组F-VEP波形接近，幅值较正常平缓，随用药时间延长逐渐接近于正常组。

2.2 F-VEP潜伏期及幅值变化视神经急性损伤后，N1P1波形显著降低，P1峰潜时明显延长，与正常组比较有极显著差异性（P＜0.001），见表1。

表1 视神经急性损伤组与正常组F-VEP比较

2.3 治疗21d后各组间F-VEP比较CNTF治疗组和bFGF组的P1峰潜时及N1P1波幅与对照组比较，各组间行t检验，差异均有显著性（P＜0.05）；而CNTF治疗组的P1峰潜时及N1P1波幅与bFGF组相比较差异无显著性（P＞0.05），见表2。

表2 治疗21d后各组间F-VEP比较

3 讨论

CNTF对神经作用的研究已较成熟。CNTF缺陷型鼠到成年期后运动神经元大量丢失，说明CNTF对体内运动神经元的生长和发育起到重要作用[1]。外源性CNTF恰能激活其效应细胞膜上的受体，形成具有生物活性的CNTF受体化合物，通过轴浆逆向运输至胞体，发挥保护神经元与促进轴突再生的作用[2]。bFGF是近年来研究较为广泛而又深入的神经营养因子，国内外大量的动物实验证实bFGF对促进中枢神经的再生有确切意义，并且小部分应用于临床，比如治疗视神经疾病。视神经损伤的部位对RGCs轴突再生长度有影响，一般来讲，视神经损伤部位离眼越远，RGCs轴突再生能力越低，bFGF能促进发育期或成熟RGCs的存活，它们仅能促进轴突分枝和发芽，而不是长距离的再生。但是bFGF同时还是血管内皮生长因子，具有很强的促血管壁细胞增生的作用。

视神经夹挫伤模型是视神经的不完全损伤模型，能较相似地模拟临床。视神经受到相当程度的损伤后，如不能及时施加保护因素将导致不可逆性损害。F-VEP能真实地反映视神经的功能状态，于节细胞和神经纤维的形态学改变相互印证了CNTF与bFGF对视神经损伤有保护作用，二者之间比较无统计学差异。

[1] Awai H, Clarke DB, Kittlerova P, et al. Brain-derived neurotrophic factor andneurotrophin-4/5 stimulate growth of axonal branches from regenerating retinal ganglion cells[J]. J Neurosci, 1996,16：3887-3894.

[2] Mata M, Jin CF, Fink DJ. Axotomy increases CNTF recepter mRNA in rat spinal cord[J]. Brain Res, 1993(610)：162-165.

R774.6

A

1673-5846(2013)02-0141-02

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