DEK蛋白在胃癌中表达的影响

李树学

【摘 要】目的：研究DEK蛋白在胃癌中表达的影响。方法：121例胃癌和39例正常组织制作成组织芯片，利用免疫组织化学方法检测DEK蛋白在胃癌及正常胃组织中表达的水平。结果：DEK蛋白在121例胃癌中86例呈阳性表达，早期胃癌及进展期胃癌的阳性表达率与正常胃粘膜组织比较有显著性差异（P<0.001），进展期胃癌的阳性表达率与早期胃癌相比有显著性差异（P<0.001）。不同组织类型中，DEK蛋白在未分化癌、鳞状细胞癌和管状腺癌衣粘液腺癌和印戒细胞癌相比均有显著性差异（P<0.001）。结论：DEK蛋白的高表达与胃癌的发生发展中起重要作用，并与胃癌的组织学类型、浸润程度、淋巴结转移及远处转移有密切相关，可作为胃癌早期诊断及预后判定的一个指标。

【关键词】胃癌 DEK蛋白：免疫组织化学：组织芯片

1材料与方法

1.1实验材料 胃癌组织芯片

人胃癌组织芯片购置于上海芯超生物科技有限公司，组织芯片编号为200点的0D-CT-Dgstm01-002（90例胃癌，8例正常组织，12例其他器官对照组织，共110例）和62点的OD-CT-Dgsm03-003（31例胃癌和31例癌旁组织）。

1.2主要试剂

1.2.1 PBS缓冲液（PH：7.2-7.4）：购于美国CAMBREX公司；

1.2.2 枸橼酸缓冲液（PH：6.0）：购于北京中山生物技术有限公司；

12.3 单克隆抗体：DEK抗体为美国US bio生物公司产品；

1.2.4 ABC免疫组织化验试剂盒：购于北京华美生物工程公司。

1.3 实验方法：

1.3.1免疫组织化学染色方法检测DEK蛋白在胃癌中的表达

免疫组织化学染色方法根据ABC试剂盒说明书步骤进行。

1.3.2免疫组织化学染色结果判定

DEK蛋白以细胞核呈棕黄色颗粒为阳性。蛋白表达采用双评分半定量法进行评分。

1.4 统计学处理

应用SPSS13.0统计软件处理分析，免疫组织化学染色结果分析采用卡方检验，P<0.05具有统计学意义。

2结果

2.1 DEK蛋白在胃癌中的表达见表1

2.2 DEK蛋白在胃癌不同组织学类型中的表达见表2

2.3 DEK蛋白的过表达与胃癌病理学行为的相关性见表3

3 讨论

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，其死亡率局世界癌症的第二位，在我国胃癌的死亡率局各种恶性肿瘤的首位。目前发现参与胃癌的发生发展过程的癌基因有C-met、ras、bcl-2、c-myc、survivin、Ki-67、CDK4和MMPs基因等。淋巴结转移是胃癌侵袭转移的重要方式，在胃癌的早期即可出现。有无淋巴结转移对胃癌的治疗方案产生重要影响。因此，早期发现淋巴结转移并及时进行治疗是改善胃癌预后、提高生存率的关键。

DEK蛋白广泛存在于有机体的大多数细胞中，是一种丰富的细胞核蛋白，存在于大多数生物体中和一些单核细胞有集体中（小木军除外）。研究发现DEK蛋白与自身免疫疾病的发生有密切相关，同时在许多恶性肿瘤比如膀胱癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、小细胞肺癌和肝癌中，DEK蛋白均有过表达。人类DEK蛋白是在急性粒细胞白血病（AML）亚型中作为一种融合蛋白，这种AML亚型的特征是有特殊的染色体异位（6；9）（p23；q34）。它广泛存在于有机体的大多数细胞中（酵母菌除外）。人类的DEK蛋白由375个氨基酸组成。DEK蛋白定位于细胞核，主要分布与细胞核的常染色质，DEK的表达水平与细胞的生理状态有密切相关，细胞增殖状态时DEK表达水平升高。而静止或终末分化状态时细胞内的DEK表达水平降低。

我们利用胃癌组织芯片，通过免疫组化方法研究DEK蛋白在胃癌中的表达及病理学行为相关性。结果表明，DEK蛋白在胃癌中的阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织，两组间有非常显著的统计学差异 （p<0.001），在临床病理学行为的相关性方面，DEK蛋白的高表达与肿瘤 组织学类型、浸润程度、淋巴结转移和远处转移有密切相关。表明DEK蛋白在胃癌的早期诊断及预后判定的潜在指标。

参考文献：

[1] Zhao J，Zhang X，Xin Y. Up-regulated expressionof Ezrin and c-Met protins are related to the metastasis and prognosis of gastric darcinomas[J]. Histopathol. 2011，26（9）：1111-20.

[2] Sureka C， Ramesh T. Molecular assessment of c-H-ras p21 expression in Helicobacter pylori-mediated gastric carcinogenesis[J]. Mol Cell Biochem. 2012，362（1-2）：169-76.

[3] Leal MF， Calcagno DQ ，Borges da Costa Jde F， et al. MYC，TP53， and chromosome 17 copy-number alterations in multiple gastric cancer cell lines and in their parental primary tumors[J]. J Biomed Biotchnol. 2011，2011：631268.

[4] Gryko M， Pryczynicz A， Guzinska-Ustymowicz K， et al. Immunohistochemical assessment of apoptosis-associated proteins： p53，Bcl-xL， Bax and Bak in gastric cancer cells in correlation with clinical and pathomorphological factors[J]. Adv Med Sci. 2012，22：1-7.

[5] Carrasco V， Canfran S， Rodriguez-Franco F， et al.Canine gastric catcinoma：immunohistochemical expression of cell cycle proteins （p53， p21， and p16）and heat shock proteins （Hsp27 and Hsp70）[J]. Vet Pathol. 2011，48（1）：322-9.

[6] Kim YH， Lee HS， Lee HJ， et al. Prognostic siginficance of the expression of Smad4 and Smad7 in human gastric carcinomas[J]. Ann Oncol. 2004， 15（4）：574-80.

[7] Xiong X， Ren HZ， Li MH， et al. Down-regulated miRNA-214 induces a cell cycle Gl arrest in gastric cancer cells by up-regularing the PTEN protein[J].Pathol Oncol Res.2011， 17（4）：931-7.

[8] Kim MA， Lee HE， Lee HS， et al. Expression of apoptosis-related proteins and its clinical implication in surgically resected gastric carcinoma[J]. Virchows Arch. 2011，459（5）：503-10.

[9] Datta A， Adilson ME， Mogilevkin Y， et al. Oncoprotein DEK as a tissue and urinary biomarker for bladder cancer[J]. BMC Cancer. 2011， 11：234.

[10] Han S， Xuan Y，Liu S， et al. Clinicopathological signifcance of DEK overexpression in serous ovarian tumore[J]. Pathol Int. 2009，59（7）；443 -7.

[11] Wu Q，Li Z，Lin H ，et al.DEK overexpssion in uterine cervical cacers[J].Pathol Int .2008，5（6）；378-82

[12] Liu S，Wang X， Sun F， et al. DEK overexpression is correlated with the clinical features of breast cancer[J]. Pathol Int. 2012， 62（3）；176-81.

[13] Yan X， Li F， Dozmorov I， et al.External Qi of Yan Xin Qigong induces cell death and gene expression alterations promoting apoptosis and inhibiting proliferation， migraton and glucose metabolism in small-cell lung cancer cells [J]. Mol Cell Biochem. 2012， 363（1-2）：245-55.

[14] 林黎娟，蔡英兰，张晓燕，等。 肝细胞癌中阅耘运蛋白的表达及其意义[J]. 临床与实验病理学杂志， 2011，27（70：778-779.

[15] Kip M， Gohring F， Ostendorp T， et al.SAF-Box， a conserved protein domain that specifically recognizes scaffold attachment region DNA[J]. Mol Cell BIOL. 2000，20（20）：7480-9.

[16] Aravind L， Koonin EV. SAP-a putative DNA-binding motif involved in chromosomal organization[J]. Trends Biochem Sci. 2000，25（3）：112-4.

[17] Kappes F， Burger K，Baack M， et al.Subcellular localization of the human proto-oncogene protein DEK[J]. J Biol Chem. 2001，276（28）：26317-23.

[18] Hu HG，Schlten I， Gruss C， et al. The distribution of the DEK protein in mammalian chromatin[J]. Biochem Biochem Biophys Res Commun. 2007，358（4）：1008-14.