穿心莲内酯共研磨物的制备及其体外溶出考察

陈美仪??陈倩萍??黎凤眉

[摘要] 目的 通过共研磨技术改善穿心莲内酯体外溶出度水平。 方法 运用高效液相色谱法作为检测方法，制备不同比例和辅料的穿心莲内酯共研磨物，并考察其体外溶出度。 结果 F68，PEG6000和PVP所制备的共研磨物均能有效提高穿心莲内酯的溶出度，其中F68 促进穿心莲内酯的溶出最为明显，且随着载体比例的增加而提高，120 min内累计百分溶出率能达到95%。 结论 穿心莲内酯F68共研磨物能明显提高穿心莲内酯的体外溶出度。

[关键词] 共研磨法；穿心莲内酯；溶出；泊洛沙姆

[中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）08-40-03

穿心莲内酯系穿心莲中提取得到的二萜内酯类化合物，是穿心莲的主要有效成分之一，具有清热解毒、凉血消肿等功能，现代药理学研究还表明，穿心莲内酯还具有抗肿瘤、免疫调节、抗心血管疾病、保肝利胆等作用[1-4]。虽然穿心莲内酯应用广泛，但在进一步开发推广的前景上，很大程度上仍受到其水溶性低的限制。

难溶性药物在水中溶解度低，口服后难以达到治疗浓度，这大大影响其在体内的转运过程，使其难以为机体吸收而导致生物利用度差。共研磨技术是一种采用高分子材料为载体，通过药物在研磨过程中的相互作用提高难溶性药物体外溶出度的一种方法[5]。本实验以穿心莲内酯为传统名优中药的模型药物，通过共研磨技术制备高分子材料与穿心莲内酯的共研磨物，旨在提高难溶性中药的溶出情况，使其产生更好的疗效。

1 仪器与试剂

ZRS—8G智能溶出仪（天津大学无线电厂）；LC-10AT高效液相色谱仪（岛津，日本）；SPD-10A紫外可见检测器（岛津，日本）；穿心莲内酯（纯度≥99%，成都欧康植化科技有限公司）；聚维酮（K30，天津市海纳川科技发展有限公司），聚乙二醇6000（天津市福晨化学试剂厂）；泊洛沙姆188（F68，德国BASF化学公司）；甲醇（天津市四友精细化学品有限公司）。

2 方法

2.1 供试品制备

物理混合物制备：穿心莲内酯和F68分别用研钵研磨20 min，并过80目筛，按1∶5的药物-辅料比例进行混合。两者混合均匀后即可得穿心莲内酯F68物理混合物。

共研磨物制备：分别按一定的比例称取穿心莲内酯和三种辅料（F68，PEG6000，PVP），混合均匀后，在研钵中加液研磨40 min，烘干并过80目筛，得到穿心莲内酯共研磨物。

2.2 溶出度测定

按中国药典（2010版）附录中有关桨法的规定进行，转速为（100±1）r/min，水浴温度为（37 ±0.5）℃，溶出介质为pH 6.8磷酸盐缓冲液，溶出介质体积为1000 mL。

分别称取原料药，共研磨物及物理混合物适量，置于事先预热的溶出仪中，分别于5、10、15、20、30、40、50、60、90、120 min时，取样5 mL，随后立刻补液5 mL，样品液储存待处理后测定。

2.3 含量测定

色谱条件[6]：色谱柱为Diamonsil-C18柱（250mm× 4.6mm，5μm，迪马公司）；流动相为甲醇-水（70∶30），流速1.0 mL/min；检测波长225 nm；柱温为室温。

对照液的制备：精密称取穿心莲内酯12 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为标准储备液。分别吸取一定量的甲醇储备液用甲醇稀释成穿心莲内酯浓度为12、24、36、48、60、72、84、96μg/mL的对照品溶液，过0.45μm滤膜，进样20μL测定。

供试品的制备：取溶出待测液0.5 mL，置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释定容后，过0.45μm滤膜，进样20μL测定。

3 结果

3.1 HPLC分析方法学

结果表明，穿心莲内酯在12～96μg/mL范围内线性关系良好，辅料对药物的测定无干扰，回归方程为

Y=9.262×103C-1.328×104 （r=0.9998）。

在8 h内测定RSD为0.94%，表明样品稳定性良好，高中低浓度平均回收率为99.7%、100.4%、100.2%，精密度测定RSD为0.73%，表明HPLC法符合穿心莲内酯的测定要求。

3.2 穿心莲内酯共研磨物的体外溶出考察

如表1所示，加入F68后制得的穿心莲内酯物理混合物及共研磨物均不同程度提高了穿心莲内酯原料药的溶出度。在120 min内，原料药的累计百分溶出率不到40%，而物理混合物则超过60%，共研磨物则高达95%。对于物理混合物和共研磨物而言，15 min的累计百分溶出率已经超过原料药在120 min内的累计百分溶出率。对比物理混合物及共研磨物，共研磨物明显具有更为显著的促溶作用。在120 min内，共研磨物的累计百分溶出率超过95%，相比原料药提高了约1.5倍。

3.3 不同载体制备的穿心莲内酯共研磨物

F68，PEG6000和PVP所制得的共研磨物均显示出对原料药有促进溶出的作用。从表2中可以看出，在溶出实验开始后的10 min，F68的促溶作用尤为显著，随后溶出速度逐渐放缓并趋于平缓，与PEG6000及PVP两种辅料在10 min后的释放速度相差不大。由于在开始阶段的较强溶出促进作用，穿心莲内酯F68共研磨物在120 min内能达到95%累计百分溶出率的理想水平，而以PEG6000及PVP作为共研磨物，120 min内的累计百分溶出率仅为70%和85%。因此，F68的促溶出效果明显好于其他两种辅料。

3.4 不同比例的穿心莲内酯F68共研磨物

如表3，当改变研磨辅料的载体比例时，结果表明促溶作用与辅料的用量成正比。当辅料用量为药物的3倍时，120 min内累计百分溶出率为82%，而比例提高至5倍后，累计百分溶出率可达95%，再将比例提高1倍，辅料量提至10倍后，累计百分溶出率已达到99%。根据结果，我们认为药物辅料1∶10的比例已达到饱和作用，再提高辅料的比例也只能某种程度上提高药物的初始释放速度，对120 min内的释放度提高已无重要意义。

4 结论

实验证明，加入有药物促溶作用的辅料，无论是利用物理混合还是共研磨法，均能有效提高药物溶出度，而其中共研磨的作用效果尤为显著。在所选取的几种药物促溶辅料中，F68的促溶作用明显优于其他两种辅料，而且随着辅料用量的增加，促溶效果则随之越来越明显，在药物辅料比例为1∶10的比例时，促溶作用达到饱和状态。共研磨物的制备工艺简单可控，从实验室条件到大生产的过渡具有切实可行性。本实验中所制备的穿心莲内酯F68共研磨物，将为此类难溶性药物的开发提供了一条切实可行，高效快捷的途径。

[参考文献]

[1] 覃林花，郑智武，孔玲，等.穿心莲内酯对肿瘤坏死因子- A和白介素- 12表达的抑制作用[J].第二军医大学学报，2011，32：717-720.

[2] 杨琼，李曙光，董建华，等.穿心莲内酯及其衍生物的抗肿瘤作用及机制[J].山东医药，2009，12：108-109.

[3] 何晓东，龚萍，亓翠玲，等.穿心莲内酯滴丸抗小鼠黑色素瘤作用的研究[J].广东药学院学报，2011，27：163-165.

[4] 杜红，牛欣，李海燕，等.穿心莲内酯微乳抗炎作用研究[J].中华中医药杂志研究，2012，27：94-96.

[5] 秦凌浩，王晓明，胡巧红，等.酮康唑固体分散体及共研磨物的制备及其体外溶出作用研究[J].中国药房，2011，22：2740-2743.

[6] 张火旺.高效液相色谱法同时测定止痢宁片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量[J].中国药业，2011，20：30-31.

（收稿日期：2013-03-27）