ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验价值分析

2013-04-29 13:02海尔尼沙
医学美学美容·中旬刊 2013年9期
关键词:感染诊断

海尔尼沙

【摘要】 目的: 探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)方法在诊断梅毒螺旋体(TP)感染中的临床检验应用价值。方法: 选择2010年1月至2013年5月接收的梅毒患者68例,采用甲基胺红不加热血清试验(TRUST)和ELISA试剂分别检测68例梅毒患者和30例自身免疫性疾病患者的血清样本,将检测结果与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测结果进行对比,比较TRUST和ELISA试剂的假阳性率和假阴性率。结果: TRUST假阳性率、假阴性率分别为16.67%(5/30)、26.47%(18/68)。ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。ELISA与TPPA检测结果完全一致,无假阳性和假阴性结果。ELISA方法检测的假阳性率和假阴性率分别显著性低于TRUST(P<0.05)。结论: ELISA方法检测TP结果可靠,可以作为筛选和确认梅毒的首选方法。

【关键词】梅毒螺旋体;感染;ELISA法; 诊断

【中图分类号】R453【文献标识码】A【文章编号】1004-4949(2013)09-135-02

梅毒是一种传染性强、危害性大的性疾病,病原体是梅毒螺旋体(TP)。血清学检测是诊断梅毒的常用实验室检测方法,即非梅毒螺旋体抗原血清试验和梅毒螺旋抗原血清试验[1]。一般用甲基胺红不加热血清试验(TRUST)、不加热血清反应素试验(USR)等非梅毒螺旋体抗原血清试验,其特异性较差,存在一定的假阳性率和假阴性率,常用于大样本的初步筛选。TP-ELISA属于梅毒螺旋抗原血清试验,敏感性和特异性均较强,常用作临床梅毒的确认实验,其特异性强,灵敏度高,操作简单方便,可全自动化,可以用于大样本的检测。作者采用ELISA方法对本院2010年1月至2013年5月就诊的梅毒患者68例进行检测,并与TRUST、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)相对照,探讨其在TP感染诊断中临床检验应用价值,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料: 我院2010年1月至2013年5月性病专科经过临床诊断和血清学检测诊断梅毒患者68例,其中Ⅰ期10例、Ⅱ期50例、Ⅲ期6例、潜伏期2例。同期内,我院接收自身免疫性疾病患者30例,均采用临床诊断和自身血清抗体检测,排除了梅毒阳性患者。

1.2 血清样本采集: 采集梅毒患者68例和自身免疫性疾病患者30例的静脉血清样本6 ml,冷藏备用。

1.3 仪器与试剂: 奥地利TECAN生产的全自动酶标仪、美国BIO-RAD洗板机、恒温水浴箱、上海荣盛生物技术有限公司的TRUST试剂盒(批号20100907)、广州中山生物公司的ELISA试剂盒(批号20100713)、日本富士会社TPPA试剂盒(批号20101006)。

1.4检测方法: 采用TRUST和ELISA试剂分别检测研究对象血清样本,具体操作步骤严格按照试剂盒说明书要求进行检测。比较两种方法检测结果的假阳性率和假阴性率。

1.5 统计学处理: 采用SPSS18.0统计软件进行所有数据处理,计数资料与百分率表示,组间比较采用χ2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 血清TRUST、ELISA、TPPA检测结果: TRUST试验检测阳性50例、阴性48例,其中潜伏期2例、Ⅰ期梅毒2例、Ⅱ期梅毒4例,以及已经治愈的患者10检测结果均是阴性。TRUST假阳性率、假阴性率分别为16.67%(5/30)、26.47%(18/68)。与TPPA检测结果比较,TRUST假阳性率、假阴性率与TPPA有明显差异(χ2=6.37,P<0.05)。TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例,TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。TP-ELISA与TPPA检测结果完全一致,无假阳性和假阴性结果。TP- ELISA方法检测的假阳性率和假阴性率分别显著性低于TRUST(χ2=7.19,P<0.05)。

3 讨论

TP-ELISA是近年随着梅毒螺旋基因工程的研制进而建立的诊断梅毒的新方法。Zrein等在1995年合成了TpN47和TpN15,将其用于梅毒检测,发现ELISA方法的正确诊断率是99.8%,敏感性99.9%[2]。1996年,Gerber等采用PCR法扩增梅毒螺旋抗原DNA,并与大肠杆菌结合进行表达,产生了一系列梅毒螺旋体抗原,用ELISA方法进行检测,发现TpN44.5、TpN17和TpN47这3种抗原滴度最高,且相互结合敏感性更高。人体受到TP感染后4周~8周在血清中才能检测到一定数量的抗体,特异性抗体较非特异性抗体早出现。梅毒患者治疗后,非特异性抗体会逐渐转阴。TRUST不适用于Ⅰ期梅毒的诊断,该方法对潜伏期梅毒敏感性也较低。本研究中发现,TRUST的假阳性率、假阴性率分别为16.67%(5/30)、26.47%(18/68)。有假阳性结果也有假阴性结果,表明TRUST用于梅毒螺旋体感染的初步筛查也不适用。TP-ELISA方法采用酶联免疫吸附技术检测血清中存在的特异性抗体,可以作为梅毒螺旋体感染的单一筛选方法。本研究中发现,TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例,TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。TP-ELISA与TPPA检测结果完全一致,无假阳性和假阴性结果。

综上所述,TP-ELISA方法利用了基因重组工程合成抗原,检测血清中特异性抗体,特异性强、灵敏度高,与TPPA检测结果保持一致。TP-ELISA方法检测结果可靠,可以作为筛选和确认梅毒的首选方法,值得临床推广应用。

参考文献

[1] 马聪,王芳,徐武夷. 梅毒螺旋体实验室检测技术的研究进展[J]. 中华医院感染学杂志,2002,12(12):958-950

[2] 丛宪玲,姜日花,朱明姬,等. 580例梅毒患者实验室检测结果分析[J].中国实验诊断学,2003,7(3): 264-265.

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