TPPA 法在假阳性梅毒筛查中的应用

常秋月，陆建荣

(1 南通市中心血站，江苏南通2 260061;2 南通市第三人民医院)

梅毒是由梅毒螺旋体(TP)所引起的慢性全身性疾病。该病传染性强，主要传播途径有性接触、母婴传播及输血传播。近年来，我国梅毒的感染率呈大幅度上升趋势。选择简单、快速、高敏感性和特异性诊断方法和试剂，对发现传染源、控制梅毒传播具有重要意义。目前国内临床实验室进行梅毒血清学检测最为常用的方法是ELISA 法，但有一定的假阳性率。2012年1～12月，我们对梅毒筛查阳性的献血人员采用梅毒螺旋体抗体颗粒凝集实验(TPPA)法进行复查鉴定，现分析其筛查情况。

样本及材料:选择我站2012年1～12月献血人员血清标本83 175 份。筛查TP-ELISA 试剂购自厦门新创生物股份有限公司及北京万泰生物股份有限公司，TPPA 试剂盒为日本富士株式会社产品。

检测方法:血液标本及时分离血清后分别用两个厂家生产的TP-ELISA 试剂采用双抗体夹心法进行检测，阳性标本再用TPPA 法进行鉴定。检测方法和结果判读均严格按照试剂说明书;每次试验均设立阴阳对照，筛查试验设室内质控。

结果:在83 175 份血清标本中，ELISA 检出TP阳性534 份，TPPA 确证试验发现4例为阴性，假阳性率为0.7%。

讨论:机体感染TP 后，体内可产生特异性抗TP抗体和非特异性抗类脂质抗体［1］。目前ELISA 双抗原夹心法是国内临床实验室进行梅毒血清学检测最常用的方法，当特定标本的吸光度值超出试剂盒设定的阳性判断值(Cut-off)时判为反应性或阳性;反之则判为非反应性或阴性。ELISA 双抗原夹心法灵敏度高，特异性强;判定结果时可用酶标仪直接读取吸光度，原始数据易于保存。早期国内主要采用一步法，但抗体浓度太高时会出现钩状效应，造成漏检［2，3］;近年来多采用二步法，大大降低了漏检率。

TPPA 法以纯化的TP 抗原包被惰性的人工明胶颗粒，包被了TP 抗原的明胶颗粒与血清中的特异性TP 抗体结合后出现肉眼可见的凝集反应，通过系列稀释，可以得到极为准确的结果，是目前国内外公认的梅毒血清学检查的金标准;但其操作繁琐，结果判断受人为误差影响较大，且试剂成本较贵，不适于大批量筛查［3］。

本研究ELISA 法假阳性为0.7%。其原因除与溶血、离心不彻底、细菌污染、洗板机洗涤时洗液溢出等有关外，某些治疗性抗体、嗜异性抗体、自身抗糖尿病抗体、类风湿因子、甲胎蛋白等特殊成分在ELISA 反应过程中具有一定的吸附作用，也可使显色反应结果出现假阳性。为提高梅毒检测的准确性，宜先用ELISA 法做筛查试验，对阳性者再用TPPA 法确认。

［1］李丹，崔巍，高伟.血清中梅毒抗体检测的研究进展［J］.内蒙古医学杂志，2010，42(3):321.

［2］易永忠，张光永，胡可，等.高浓度梅毒抗体血清样本致携带污染及钩状效应1例［J］.中国输血杂志，2006，19(4):299.

［3］陈龙菊，高艳，巫贡晓，等.ELISA 双抗原夹心法检测梅毒的应用研究［J］.临床输血与检验，2001，3(4):25.