巫仁高 王爱仙 刘福阳 邓文明 胡 蕾
(福建省南平市农业科学研究所,福建 建阳 354200)
黑木耳新品种Au053的选育与应用*
巫仁高 王爱仙 刘福阳 邓文明 胡 蕾
(福建省南平市农业科学研究所,福建 建阳 354200)
采集分离野生黑木耳菌株98个,经过驯化与筛选,选育出优良菌株Au053。经与南方地区主栽品种新科1号、新科5号、Au139两年五个点的区试比较,以Au053表现最好,比新科1号增产9.7%,比新科5号增产10.0%,比Au139增产10.3%;遇高温高湿气候,2个对照菌株普遍发生严重的流耳、烂袋现象,而Au053不发生流耳、烂袋,稳定性较好。
黑木耳;新品种;Au053;驯化;选育
黑木耳是我国传统的食用菌栽培菌类之一,目前其袋料栽培所使用的菌株在南方普遍存在菌丝活力差、抗杂能力弱的问题。生产制袋环节容易严重感染杂菌,出耳阶段遇高温高湿极易发生“流耳”,出现烂耳烂袋现象,给生产者造成严重损失[1~3]。本所通过对黑木耳新品种的选育研究,获得菌丝活力强、抗杂能力强、产量高、出耳管理相对粗放、适宜南方气候栽培的黑木耳新品种Au053,供生产上推广应用。
1.1 野生黑木耳的采集 2005年5月,南平地区连续降雨半个月,雨后伴随高温天气,白天最高气温达到30 ℃,是典型的高温高湿气候。根据黑木耳的一般生长习性,此时人工栽培和野生黑木耳普遍发生流耳的情况下,在野外有可能采集到为抵抗不良环境而产生的有效变异菌株,在逆环境中表现出抗逆性强、生长活力强、生长良好的野生黑木耳子实体。经多次搜寻,先后3次分别在建阳市小湖镇生态林区及庵山林区采集到在不同腐木上生长良好的野生黑木耳子实体。2005年10月,又分别在上述区域采集到生长良好的野生黑木耳子实体。
1.2 野生黑木耳子实体的组织分离、驯化 将采集的野生黑木耳子实体及时妥善带回实验室,分别用75%酒精浸泡3 min后,用无菌水漂洗数次,在接种箱内无菌条件下切取耳片边缘0.5 cm大小的组织块接入预先制备好的PDA试管培养基斜面上,编号,贴好标签,置于25 ℃恒温箱中培养,共获得98个野生黑木耳组织分离菌丝体[3]。经多次PDA培养基菌丝生长对比试验、拮抗试验,淘汰菌丝细弱、长势差的菌丝体,最终获得菌丝长势较好、菌丝体互不亲和的菌株10个。
1.3 出耳筛选试验 2005—2006年,对筛选出的10个野生黑木耳驯化菌株进行秋栽和春栽两次出耳试验,观察记录各菌株菌丝在栽培料中的生长、出耳、流耳情况和产量表现,淘汰菌丝细弱、栽培不出耳和出耳极少的菌株,筛选出4个菌丝长势较好、出耳较正常、产量较高、抗流耳的菌株,分别为Au053、Au053′、Au0531、Au083。2006—2007年,对初选出的4个黑木耳野生菌株进行栽培出耳对比试验,淘汰出耳不稳定、产量低的菌株Au053′、Au0531,筛选出菌株Au053和Au083。
2.1 拮抗性 将筛选出的新菌株Au053、Au083与主栽菌株新科1号、新科5号、Au139进行拮抗试验。结果表明2个新菌株与主栽菌株间有明显拮抗线,互不亲和,证明为不同菌株。
2.2 菌丝活力 由表1可看出,在相同温度下,Au053菌丝萌发、定植较快,Au083、Au139次之,新科1号、新科5号较慢。定植后菌丝长势,Au053、Au139粗壮浓密,新科1号、新科5号较粗壮、较浓密,Au083纤细稀疏,颜色较白。Au053菌丝走速最慢,新科1号菌丝走速最快,Au083居中。
2.3 生物学效率 Au053、新科1号、新科5号、Au139、Au083的生物学效率分别为69.67%、59.59%、 60.78%、 46.81%、 49.52%(表1)。Au053比新科1号、新科5号、Au139、Au083分别增产10.08%、8.89%、 22.86%、20.15%,差异达极显著水平。
2.4 流耳与烂袋 将5个菌株各100袋于2009 年2月1日统一下地进行流耳与烂袋观察试验,每筒有一处以上出现流耳或者烂口即属流耳或烂袋。根据3月1日、3月20日、4月10日及4 月30日的试验观察记录(表2),新科1号、新科5号、Au139发生流耳和烂袋的比例明显高于Au053、Au083,尤其是在第二潮耳管理期间(4 月10日观察),新科1号、新科5号、Au139发生流耳的比例分别达78%、80%、55%,烂袋的比例分别为62%、60%、48%,而Au053、Au083则为0。
2.5 抗杂菌能力 于2009年4月6日至16日进行各菌株抗杂能力试验。结果表明,Au053菌丝与杂菌菌丝接触处形成明显的拮抗线,其抗绿色木霉、链孢霉能力最强;Au083菌丝与杂菌菌丝接触部位也形成较为明显的拮抗线,但有少量菌丝被杂菌菌丝侵食,抗杂能力次之;新科1号、新科5号、Au139菌丝与杂菌菌丝接触处,无拮抗线形成,菌丝被杂菌包围、侵食,抗杂能力较弱。
通过以上试验可知,Au053菌丝萌发、定植较快,菌丝长势粗壮浓密、洁白,抗杂菌能力强,生物学效率高,遇高温高湿气候不发生流耳、烂袋,在南方气候条件下表现出高产、抗流耳、不烂袋的显著优势,初定为南方袋栽黑木耳优良品种。
3.1 Au053与主栽菌株DNA指纹及营养分解酶活的变化规律 通过福建农林大学菌物研究中心对Au053与主栽菌株DNA指纹的测定,Au053在遗传上明显与新科1号、新科5号和Au139菌株不同。通过对4个菌株营养分解酶CMC酶、木聚糖酶、淀粉酶、漆酶的活性及其变化趋势的测定,发现Au053营养分解酶有其独特的变化规律,尤以漆酶为明显,其菌丝菌龄在20天时漆酶几乎没有活性,至菌龄40天后漆酶活性急剧上升;而其他菌株菌丝在20天时漆酶活性降到接近于0,以后不再出现活性。
3.2 Au053分类鉴定 经中国科学院微生物研究所检测鉴定,Au053隶属木耳目、木耳科、木耳属,其汉语名和拉丁学名为黑木耳Auricularia auricula-judae(Bull.) Quél。
表1 新选育菌株与主栽菌株菌丝萌发、定植时间、长势、产量及生物学效率比较
表2 新选育菌株与主栽菌株流耳、烂袋情况比较
为检测新品种Au053的丰产性、稳定性及抗病性,以评价其利用价值,2008-2011年在福建省多地进行新品种联合区域试验。
4.1 产量表现 2008-2009年在福建省南平农业科学研究所试验基地、武夷山食用菌办公室、浦城县食用菌厂、建阳市食用菌办公室和建宁县食用菌技术推广站进行新品种联合区域试验。供试的4个品种两年5个试验点的平均产量见表3。其中Au053的两年平均干耳产量为116 g/袋,高于3个对照菌株,较新科1号增产9.7%,较新科5号增产10.0%,较Au139增产10.3%。
对表3干耳产量进行多重比较LSD法分析,结果表明:年份间、地点间,以及地点×年份、品种×年份、地点×品种、地点×品种×年份的互作方差没有差异,而品种间差异达极显著水平。4.2 稳定性分析 利用多重比较LSD法分析,得出产量的稳定性及综合评价,结果以新品种Au053丰产性和稳定性都较好。
表3 2008—2009年福建省黑木耳新品种区试试验平均产量(干重,单位:g/袋)
4.3 抗病性鉴定 建阳市农业局植保站2009—2011年对Au053进行田间生产抗病性调查鉴定,杂菌感染率平均为9.6%,木霉病和细菌性斑点病发病率均为0,流耳发病率为0.16%;2009—2010年,南平市农业局植保站的田间抗病性调查鉴定结果为,Au053杂菌感染率平均为12.2%,木霉病及细菌性斑点病发病率为0,流耳发病率为0.4%。表明Au053抗病性较强,特别是抗流耳能力明显优于其他主栽品种。
黑木耳Au053属中温偏高型菌株,子实体单生为耳状,或群生为花瓣状,胶质,中凹,半透明,被面呈青褐色,多皱缩,有绒状短毛,腹面黑色、平滑,鲜耳红褐色或者褐色,有脉状皱纹,耳片柔软,耳面疏生短绒毛。子实体直径6~11 cm,厚0.8~1.0 mm,干后强烈收缩,松泡率(干湿比)9~12倍,口感胶柔滑润。2011年10月,南平市产品质量检验所对Au053子实体成分的检测结果为:灰分7.0%,粗蛋白12.7%,粗脂肪2.6%,总糖(以转化糖计)47.5%,粗纤维4.6%,铁258 mg/100g,钙234 mg/100g等。
Au053菌丝的萌发温度为18 ℃,生长温度为14~40 ℃,最适生长温度23~25 ℃,菌丝致死温度为42 ℃,出耳最适温度18~22 ℃。培养料含水量为56%~68%时菌丝均能生长,最适含水量为61%~65%。菌丝生长适宜的pH为5.0~7.5,最适6.0~6.5。原基发生需光照刺激,光照刺激后原基处会分泌少量红色或者褐色色素,属正常生理反应,不影响出耳和产量。出耳期间遇连续降雨、高温高湿气候不会发生流耳现象,表现出较强抗流耳病害特性,适合在南方气候条件下生产应用。
[1] 杨新美. 中国食用菌栽培学[M]. 北京: 农业出版社, 1988: 355-377.
[2] 郑美腾. 福建食用菌 [M]. 北京: 中国农业出版社, 2000: 157-160.
[3] 吕作舟. 食用菌栽培学[M]. 北京: 高等教育出版社, 2006: 96.
*Au053认定名称更改为“南耳1号”。