仔猪渗出性皮炎的实验室诊断和综合防治

陈亚强张乐宜彭津津

（1重庆市黔江区畜牧兽医局，重庆 409000；2广东省农业科学院兽医研究所，广东广州 510000；3重庆三峡职业学院，重庆 404100）

仔猪渗出性皮炎的实验室诊断和综合防治

陈亚强1张乐宜2彭津津3

（1重庆市黔江区畜牧兽医局，重庆 409000；2广东省农业科学院兽医研究所，广东广州 510000；3重庆三峡职业学院，重庆 404100）

猪渗出性皮炎是由葡萄球菌属细菌引起的一种急性、超急性的高度接触性传染病，该病的主要特征是全身油脂样渗出性皮炎、破溃、结痂，可导致腹水和死亡。本文针对一例猪渗出性皮炎的病例，对其实验室诊断方法、防治措施进行了探讨。关键词：猪渗出性皮炎；葡萄球菌；诊断；防治

猪渗出性皮炎 （Exudative epidermit，EE）又称猪油皮病或煤烟病，是一种急性、超急性的高度接触性传染病，主要特征为全身油脂样渗出、恶臭、破溃，最后形成痂皮，可导致腹水和急性死亡。该病的主要病原是猪葡萄球菌（ ），但其他葡萄球菌如产色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、松鼠源葡萄球菌也可引起该病的发生[1]。5～6日龄的哺乳仔猪和刚断奶的仔猪最易感染该病，偶见母猪感染[2]。普遍认为脱落毒素的产生是该病的主要致病因子[3]，脱落毒素目前有6种类型，分别是EXHA、EXHB、EXHC、EXHD、SHETA和SHETB，这些毒素可以选择性地消化真皮表面的Desmogen-1，导致细胞与细胞间的断裂分离，特别是棘细胞层的细胞分离[4]。引起该病的细菌主要通过破损的皮肤侵入机体，此外机体免疫力低下也会导致该机会性病菌侵入。猪渗出性皮炎无季节特异性，目前该病的预防和治疗尚无有效的疫苗和抗生素[5]。

1 发病情况及临床症状

2011年4月，广东省增城市某猪场6～10日龄的2头哺乳仔猪首先开始发病，病初眼眶周围出现红斑，猪场工作人员以为是打架咬伤，2天后背部也出现红斑，并发现有水泡，病猪食欲下降，被毛杂乱，卧地不起，颤抖，并出现呼吸急促现象，体温高达40.5℃。发病第3天，全窝开始发病，症状严重程度不一。发病第5天，皮肤表面渗出物和地面污物混合，形成一层棕黄色油脂样痂皮。整窝猪只注射青霉素和链霉素，治疗后无效，猪只开始死亡，窝死亡率达40%。之后送病猪的病料进行实验室诊断，经治疗后剩余猪只痊愈。

2 病理变化

病猪消瘦，颌下淋巴结肿大，呈大理石样外观，心包积液；肺脏表面散在有大小不等的出血点，边缘有淤血；肝脏发黄；肾脏肿大，形态不规则。

3 实验室诊断

3.1 细菌分离与培养

用棉签刮取没有污物的皮肤处，同时无菌采病猪心脏、肺脏和淋巴结，分别在普通琼脂培养基和血平板培养基上划线进行细菌培养，37℃培养过夜。皮肤组的平板中菌落较多，病猪心脏、肺脏和淋巴结组的普通琼脂培养基和血平板培养基上均可观察到乳白色、表面光滑隆起的单一圆形菌落。

3.2 镜检

运用革兰氏染色法对待检菌落染色，显微镜下可观察到蓝紫色的球菌（图1），呈葡萄串状排列，初步确定为葡萄球菌。

图1 葡萄球菌镜检结果

3.3 生化试验

将纯培养的细菌接种于葡萄球菌属细菌生化编码鉴定管（项目：尿素、蔗糖、精氨酸水解、木糖、乳糖、甘露

糖、麦芽糖、木醇、甘露醇、蕈糖、乙酰葡糖胺、硝酸盐还原、蜜二糖、果糖、V-P、山梨醇）进行生化鉴定，对照TH-16S细菌生化编码鉴定书，分析确定所分离到的菌株编码及鉴定率，结果表明此菌编码为331320（鉴定率94.3%，T值为0.89），初步确定为猪葡萄球菌。

3.4 PCR鉴定

将纯培养后的葡萄球菌按照AXYGEN细菌基因组DNA提取试剂盒步骤提取细菌基因组DNA，然后运用已建立的多重PCR检测方法进行PCR鉴定，循环条件为：94℃预变性5分钟；94℃变性 50秒、54℃退火 50秒、72℃延伸1分钟，循环33次；最后72℃延伸10分钟，琼脂糖凝胶电泳观察结果，回收明亮条带并测序。电泳结果表明（图2），在GAP（826 bp）和EXHA基因引物扩增处出现了明显的条带，表明其属于葡萄球菌属，并含有EXHA毒素基因；测序结果表明该菌和猪葡萄球菌（GenBank:DQ321689.1）的匹配率为99%，确定为猪葡萄球菌。

图2 PCR鉴定结果M:DL2000 marker；Y:阴性对照；1～4:样品；K:空白对照

4 讨论与防治

4.1 药敏试验

用接种棒挑取单个菌落，在普通营养琼脂平板上重复划线。然后将商品药敏试纸片贴在表面，37℃培养18小时，观察抑菌圈大小。结果显示：头孢噻呋抑菌圈为23 mm、头孢拉定21 mm，高度敏感；新生霉素18 mm，恩诺沙星16 mm，中度敏感；米诺环素5mm，四环素6mm，低敏感；青霉素、链霉素、氯霉素、庆大霉素耐药。

4.2 综合防治

因葡萄球菌很容易产生耐药性，因此猪场若发生该病，最好进行实验室诊断，然后经药敏试验确定用何种抗生素，以免导致葡萄球菌带毒菌株的变异而造成耐药。此外，还有研究表明EE的发生与免疫力有很大关系，可能是由于免疫失败而造成免疫力低下，进而引发该病。因此，合理的免疫程序、良好的饲养管理和使用敏感的药物进行预防性投药有助于预防该病的发生。

4.2.1 加强饲养管理

为给仔猪提供充足的奶水和母源抗体，应保障母猪有足够和清洁的饮水，可在水中添加300g/吨的食盐、200g/吨的柠檬酸以及电解多维；提高母猪营养水平，日粮中蛋白质水平提高2%～3%，矿物质水平提高3%～6%；保持良好的产房环境卫生，通风、温湿度适当，做好定期消毒工作。减少仔猪的皮肤划伤，将产床上尖锐的地方磨平，在剪牙、断尾等易造成感染的环节严格消毒、规范操作，避免仔猪互相打架。

4.2.2 制定合理的免疫程序

猪场要做好母猪猪瘟和口蹄疫的免疫。若免疫失败，母猪抵抗力下降，母源抗体也会随之减少，将会导致仔猪极易感染葡萄球菌，引起EE。所以各场应根据各自情况，制定合理的免疫程序，购买正规疫苗，保存得当，在免疫过程中遵循操作规范，避免免疫失败。

4.2.3 定期驱虫

对不同阶段的猪群进行定期驱虫，并做好详细记录。

4.2.4 药物预防与治疗

有条件的猪场可以定期分离鉴定产房细菌，通过药敏试验进行预防性投药，坚持预防为主、早发现早治疗的原则。治疗该病前最好先经药敏试验确定抗生素种类，本病例最后使用头孢噻呋钠2 mg/kg，地塞米松2 mL，10%恩诺沙星2.5 mg/kg，每日2次，连用3～5天，同时在猪体表涂鱼石脂软膏，最终在治疗后5～8天时剩余猪只痊愈。如果有脱水严重的猪则及时补液，氯化钠3.5g、碳酸氢钠2.5g、氯化钾1.5g、葡萄糖20 g和适量维生素C、维生素B6溶于1 L水中进行口服补液。

[1]Chen S,Wang Y,Chen F,et al.A Highly Pathogenic Strain of Staphylococcus sciuri Caused Fatal Exudative Epidermitis in Piglets[J].PLoS One,2(1):e147. doi:10.1371.

[2]杨鼎，郝永清，宋长绪.猪葡萄球菌脱落毒素研究进展[J].动物医学进展，2009，30 (4):60-64.

[3]WegenerHC,Andresen LO, Bille-Hansen.Staphylococcus hyicus viru-Lence in relation to exudative epidermitis in the piglet[J].Can J Vet Res,1993,57: 119-125.

[4]Fudaba Y,Koji N,Lars OA,et al. Staphylococcus hyicus exfoliative toxins selectively digest porcine desmoglein 1[J]. Microb Pathog,2005,39(5-6):171-176.

[5]孙娟.仔猪葡萄球菌性皮炎的诊治[J].畜牧兽医科技信息，2007(2):60.

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2013-08-03