HPLC法测定三七续骨胶囊中延胡索乙素的含量

李松宾 张令令

（1河南省商丘市食品药品检验所，商丘476000；2河南省商丘医学高等专科学校，商丘476000）

HPLC法测定三七续骨胶囊中延胡索乙素的含量

李松宾1张令令2

（1河南省商丘市食品药品检验所，商丘476000；2河南省商丘医学高等专科学校，商丘476000）

目的 建立三七续骨胶囊中延胡索乙素的HPLC含量测定方法。方法采用ODS-C18色谱柱5μm（4.6×250mm），流动相：甲醇：0.1%磷酸（三乙胺调pH至6.0）（55∶45）；流速：1.0ml·min-1；检测波长280nm。结果延胡索乙素在0.0939～0.9390μg范围内线性关系良好（r＝1），平均加样回收率为98.83%，RSD＝0.50%（n＝6）。结论本方法简便快速、结果准确，可较好的控制该制剂的质量。

三七续骨胶囊；延胡索乙素；高效液相色谱法

三七续骨胶囊经过多年临床经验证明是质量稳定、疗效可靠的医院制剂，由三七、延胡索、红花、血竭、土鳖虫、乳香、没药、骨碎补、自然铜、川断等10味中药材加工制成，具有活血止痛、消肿散瘀、接骨续损之功效，主治跌打损伤、筋伤骨断。延胡索乙素为延胡索的主要有效成分，延胡索乙素具有活血、行气、止痛的作用，对三七续骨胶囊疗效的发挥起重要作用。国内现行的质量标准中未收载含量测定项目，为了有效地控制制剂质量，本文采用HPLC测定了延胡索中延胡索乙素的含量，可较好地控制该制剂的质量。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器AUW-220D电子分析天平DSQ10260超声仪Agilent 1200高效液相色谱仪。

1.2 试药延胡索乙素对照品（批号：110726-201112，

来源：中国药品生物制品检定所）；水纯化水，甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯；三七续骨胶囊（样品由宁陵县中医院提供，批号20120801；20120802；20120803）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱：ODS-C18色谱柱5μm（4.6× 250mm），0.1%磷酸：甲醇（45∶55）为流动相；检测波长280nm；流速1.0ml·min-1；进样量10μl。理论板数按延胡索乙素峰计算不低于3000。

2.2 对照品制备取延胡索乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml中含延胡索乙素46μg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备取供试品约3.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入浓氨试液-甲醇（1∶20）混合溶液50ml，精密称定重量，放置过夜，超声处理1小时，放冷，再精密称定重量，用浓氨试液-甲醇（1∶20）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

2.4 线性关系考察取延胡索乙素对照品溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别进样2、5、10、15、20μl，记录延胡索乙素峰面积值，以峰面积（A）为纵坐标，以对照品进样量（C）为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y＝0.84276X-15.96853 r＝1。结果显示，在0.0939～0.9390μg范围内延胡索乙素进样量与峰面积值呈良好的线性关系。

2.5 干扰试验取不含延胡索的阴性样品（自制）约3.0g，照供试品溶液制备方法制备，注入液相色谱仪，进样量10μl，阴性对照液对测定无干扰，结果见图1。

图1 高效液相色谱图

2.6 精密度试验取同一浓度的对照品溶液（46.95ug／ml），重复进样6次，每次10μl，测定延胡索乙素峰面积，RSD＝1.50%（n＝6），表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性试验取同一浓度供试品溶液，分别在0、2、4、8、12、16h进样测定，结果延胡索乙素峰面积RSD＝0.97%，显示供试品溶液在16小时内峰面积基本稳定。

2.8 加样回收率试验称取已知含量为0.3553mg／g的样品6份，每份约3.0g，精密称定，分别置1～6号锥形瓶中，分别精密加入对照品储备液20ml，按照供试品溶液制备方法制备，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果（%）

2.9 含量测定取3批样品，按制备供试品溶液制备方法制备样品溶液，按照“2.1”项色谱条件测定，按外标法计算延胡索乙素的含量，结果见表2。

表2 3批样品中延胡索乙素的含量

3 讨论

参考中国药典并结合指标成分的理化性质，我们比较了热回流提取和超声提取两种方法，发现超声提取方法含量高、操作简便［1］，利于控制该制剂的质量。

［1］陆益，黎远东，梁宁生，等．RP-HPLC法测定香术止痛酊中延胡索乙素的含量［J］．广西医科大学学报，2008，25（3）：427-428．

Determination of Tetrahydropalmatine in Sanqi Xugu Capsule by HPLC

Li Songbin1Zhang Lingling2
(1 Shangqiu Institute for Food and D rug Control,Shangqiu,Henan Prouince,476000,China; 2 Shangqiu Medical College,Shangqiu,Henan Prouince,476000,China)

Objective Establishing the determination method of the HPLC in the Tetrahydropalmatine of Sanqi Xugu Capsule．MethodsWe used ODS C18chromatographic column 5μm（4.6×250mm），Methanol：0.1%Phosphate（55∶45）as mobile phase．The content was detected at a waveleng of 280nm，the flow rate was 1.0mlomin-1．ResultsThe Tetrahydropalmatine had a good linear relationship in the range of 0.0939～0.9390μg（r＝1），the average recovery was 98.83%，RSD＝0.50%（n＝6）．ConolusionThe established method is accurate，sensitive and simple．It can be used for quality control of Sanqi Xugu Capsule．

Sanqi Xugu Capsules；Tetrahydropalmatine；HPLC

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.19.102

1672-2779（2013）-19-0146-02

苏 玲

2013-08-16）