枯草芽孢杆菌对蛋鸡后期生产性能及肠道健康的影响

■Anas AbdelqaderAbdur-Rahman Al-Fataftaha Gürbüz Das罗正（译）

(1.约旦大学农学院畜牧系；2.建明工业(珠海)有限公司，广东珠海 519040)

蛋壳质量是家禽养殖业中重要的指标，他可以影响蛋鸡的利润和种蛋的孵化能力。蛋壳强度是防止蛋破损和病原微生物进入的第一道防线。蛋壳质量受到多个因素的影响，比如疾病、营养状态、热应激和日龄(Roberts，2004)。蛋壳质量随着鸡的日龄增加逐渐变差，主要原因是蛋的重量在增加，同时由于形成蛋壳体内的钙逐渐流失(Etches，1996)。因此蛋壳从第22周开始到第57周，蛋壳的厚度从0.403 mm下降到0.373 mm(Al-Batshan等，1994).很多学者认为老龄的禽对钙的吸收能力减弱(Roland，1988；Al-Batshan等，1994；Grobas等，1999)，因此到后期破蛋会逐渐增加。由于这个问题，很多研究人员在研究通过什么方法改善蛋壳质量，比如育种、营养、生物学方法、药物途径等(Roland,1988；Al-Batshan 等，1994；Grobas等，1999)。目前营养改善蛋壳质量方面的研究主要集中在钙的使用上面(Keshavarz等，1993；Safaa等，2008；Skr ivan等，2010)。然而有学者报道增加日粮中钙的含量对生产性能和蛋重没有影响(Bar等，2002；Keshavarz等，1993)。不仅如此，还会影响镁和其他对骨骼很重要的矿物质的吸收，对磷的需求也会增加(Brink等，1992；Bar等，2002)。有报道称在形成蛋壳时肠道可吸收钙的量比增加日粮中总钙的量对蛋壳质量更加重要(Skr ivan等，2010)。增加钙的吸收对蛋壳质量尤为重要(Chen等，2004)。因此，增加钙的量不是关键，增加钙的消化吸收能力才是可行的。

肠道微生物在肠道黏膜完整性方面扮演着重要角色，如果完整性受到破坏将导致黏膜的通透性增加，从而造成细菌感染(Lambert,2009)。当母鸡变老，其肠道结构也会随之改变，更加容易失去完整性(Burel等，2009)。肠道完整性受到损坏会导致病原微生物的数量增加，有益菌数量减少。因此在日粮中添加有益微生物能帮助恢复肠道完整性，改善肠道健康，提高营养物质吸收(Panda等，2008；Awad等，2009；Knap等，2011)。枯草芽孢杆菌是最安全的并且被广泛应用在动物日粮中的有益菌(EFSA,2007)。报道称其可以杀灭或抑制有害微生物(Knap等，2011)，调节肠道微生态平衡(Knarreborg等，2008)，改善肠道完整性和营养物质吸收效率(Samanya等,2002；Teo等，2007)。

枯草芽孢杆菌能直接稳定肠道微生态系统，恢复肠道的完整性，因此推测枯草芽孢杆菌可以改善高日龄蛋鸡肠道健康。到目前为止枯草芽孢杆菌改善高日龄蛋鸡生产性能、蛋壳质量以及肠道菌群还没有报道，本研究旨在探讨枯草芽孢杆菌对蛋鸡生产性能和蛋壳质量的改善，同时评估其对回肠和盲肠中微生物组成的影响。

1 材料和方法

鸡的饲养管理和使用都按照欧盟议会理事会关于实验动物用于以科学试验为目的的规定进行。

1.1 试验设计、鸡和日粮组成

试验在约旦大学Al-Muwgar农业研究中心进行。80只罗曼白蛋鸡购自商业蛋鸡场，试验为期12周，从64周开始到75周结束。80只蛋鸡被随机分为2组，每组5个重复，每个重复8只鸡，每只鸡笼底面积1 375 cm2。整个试验周期温度被自动控制在（22±3）℃，光照每天16 h，鸡群自由饮水和采食。在试验之前鸡群用基础日粮饲喂，日粮组成见表1。

表1 基础日粮配方组成（g/kg）

表1中基础日粮为玉米-豆粕型，不含抗球虫药，配方平衡满足蛋鸡营养需求(NRC，1994)。试验组日粮在此基础上每吨添加200 g克洛生TM11。克洛生是枯草芽孢杆菌PB6的芽孢，源于健康鸡的肠道，该产品每千克含孢子数2×1011个。试验组和对照组分开饲养，保证日粮不交叉。

1.2 产蛋和蛋壳质量测定

每天收集两组的鸡蛋，称重记录。取每周最后一天的鸡蛋分离蛋壳和内容物，测量蛋壳重量、厚度和密度。蛋壳测定时将蛋膜去掉，用温水清洗，60℃烤干称量。蛋壳厚度用千分尺通过中部、两头及气室测量后取平均值。蛋壳密度用蛋壳质量除以蛋壳表面积得到。蛋壳表面积按照Carter 1975年的文献方法计算。采食量每天记录，最后取平均值。饲料转化率根据蛋重和饲料消耗计算。

1.3 回肠和盲肠微生物组成

试验结束后将鸡只处死，对照和试验组各20只，从回肠和盲肠取新鲜的粪便1 g放入无菌袋内送到实验室进行细菌计数。样品在采集后1 h内用生理盐水稀释10倍，然后10倍梯度稀释涂到培养皿上。选择合适的生长密度平板进行细菌计数，然后取平均值。

乳酸杆菌、双歧杆菌、产气荚膜梭菌、和空肠弯曲杆菌分别用Rogosa琼脂、Beerens琼脂、加强型梭菌琼脂培养基、麦康凯琼脂培养。空肠弯曲杆菌常规培养24 h，其他菌在培养皿在37℃厌氧培养48 h。

1.4 数据处理

统计分析用SAS软件进行，每组中的重复均为一个组进行分析。

2 试验结果与分析

2.1 枯草芽孢杆菌PB6对蛋鸡后期产蛋性能的影响

饲料中添加枯草芽孢杆菌后与对照组相比产蛋率、蛋重、饲料转化率都显著改善，结果见表2。枯草芽孢杆菌PB6组产蛋率74.4%，对照组70%，枯草芽孢杆菌PB6组比对照组高出4.4个百分点；枯草芽孢杆菌PB6组饲料转化率2.3，对照组2.8，比对照改善0.5，差异显著(P＜0.05)；枯草芽孢杆菌PB6组平均蛋重为64.8 g，对照组61 g，比对照组高3.8 g(P＜0.05)；其他指标两个组保持一致。

表2 枯草芽孢杆菌对蛋鸡生产性能的影响

2.2 枯草芽孢杆菌PB6对蛋鸡后期蛋壳质量的影响（见表3）

表3 枯草芽孢杆菌对蛋鸡后期蛋壳质量影响

由表3可知，通过测定发现在产蛋后期与对照组相比枯草芽孢杆菌PB6组蛋壳重量占蛋重百分比比对照组高1.5个百分点(P＜0.05)；蛋壳厚度比对照组厚0.03 mm；蛋壳密度比对照组高3.3 mg/cm2(P＜0.05)。因为后期蛋壳质量变差产生的薄壳蛋、裂纹蛋、破蛋而产生不可上市的鸡蛋，对照组占到8.4%，枯草芽孢杆菌PB6组只有3.5%，比对照组低4.9个点，降低58%，破蛋的减少能带来客观的直接经济效益。

2.3 枯草芽孢杆菌PB6对肠道菌群的影响(见表4)

表4 枯草芽孢杆菌对肠道菌群的影响（lgCFU/g肠道内容物）

由表4可知，回肠和盲肠乳酸杆菌含量饲喂枯草芽孢杆菌PB6的蛋鸡组比对照组高(P＜0.05)，双歧杆菌的数量同样较对照组高(P＜0.05)；产气荚膜梭菌和空肠弯曲杆菌的含量比对照组低(P＜0.05)。

3 讨论

由于近期抗生素禁用，使用益生菌改善家禽肠道健康和生产性能已经成为重要选择。本研究将枯草芽孢杆菌PB6直接添加到饲料中观察其对蛋鸡生产性能和蛋壳质量的直接改善作用。益生菌能增加蛋鸡蛋的大小、产量、质量，同时降低生产成本(Kurtoglu等，2004；Panda等，2008)。这些改善主要与改善代谢过程和营养利用有关(Yeo等，1997)。老龄蛋鸡肠道钙的吸收效率与年轻的蛋鸡相比较差(Roland,1988；Al-Batshan 等，1994；Grobas等，1999)，在本试验中也表现出相同的趋势。在日粮中添加枯草芽孢杆菌PB6后在试验期内蛋壳质量得到了明显的改善，在蛋壳厚度、重量和密度方面的改善直接增加可上市鸡蛋数量。这个结果与Chowdhury等人的试验结果一致。钙的吸收需要活化为离子钙，而微生态制剂则可以帮助维持肠道平衡，促进发酵降低肠道pH值，从而促进发酵产生可吸收钙。本研究通过添加枯草芽孢杆菌有效改善蛋壳质量，与前面理论保持高度一致。在日粮中添加酸化剂可以降低肠道pH值，促进钙的吸收，增加血钙浓度，改善蛋壳质量(Abdel-Fattah 等，2008；Soltan,2008)。从肠道微生态系统角度出发，肠道中乳酸杆菌、双歧杆菌能有效改善蛋鸡生产性能，抑制有害菌的生长。但是随着日龄变化，其菌群结构也会发生变化，因此添加能抑制有害菌的微生态制剂就会保证肠道健康，起到提高生产性能的作用(Cummings等，2002)。本研究在日粮中添加枯草芽孢杆菌后显著提高了蛋鸡后期生产性能，与其他研究人员的结果一致。从肠道微生物数量上来看添加枯草芽孢杆菌的鸡群肠道有益菌的数量较不添加的含量高，而有害菌如产气荚膜梭菌和空肠弯曲杆菌的数量比对照组低。正是由于有益菌的增加，有害菌的减少，使鸡群对营养物质的消化和吸收能力增强，最终实现在相同基础日粮的条件下添加枯草芽孢杆菌的鸡群生产性能高于对照组。

4 结论

通过添加枯草芽孢杆菌PB6可以促进有益菌生长，抑制有害菌繁殖，从而保证肠道菌群平衡，改善蛋鸡的生产性能和蛋壳质量。