李 敬 尹晓东 简国艳 樊雨翔
(天津市人民医院,天津 300121)
树突状细胞(Dendritic cells,DC)是体内最强的抗原提呈细胞[1]。正常状况下体内DC数量很少,低于外周血单核细胞的1%,主要以不成熟状态分布在外周组织中。不成熟DC可对外来异物进行摄取、处理、加工。同时,在存在炎性刺激等情况下,DC分化成熟并迁移至外周淋巴结。将抗原信息以主要组织相容性抗原复合物 (Major histocompatibility complex,MHC)的方式提呈给初始T细胞,使其致敏为抗原特异性T细胞。我院在进行肿瘤患者DC疫苗治疗时,采用国内外普遍认可的双侧腹股沟24点皮内注射技术,将107/4 mL的DC疫苗回输患者体内,取得了较为满意的结果。现总结如下。
1.1 一般资料 2012年3月我院生物治疗中心接受DC疫苗治疗的恶性肿瘤患者共58例,男32例,女26例,年龄47~82岁,平均62岁。DC疫苗107/4 mL,每周1次,连续3周双侧腹股沟处皮内注射,共174例次。
1.2 方法 DC疫苗分别放入两支2 mL一次性注射器中,每支含DC疫苗的细胞数量为0.5×107,体积为2 mL;为减少注射时对活细胞可能造成的损伤,选择8号针头以替代常规皮内注射使用的4.5或5号针头。做皮内注射前,详细询问患者有无过敏史,用2 mL一次性注射器及8号针头,抽取DC疫苗药液2 mL,2支,排尽空气。选择大腿内侧靠近腹股沟处,按皮内注射消毒法常规消毒皮肤。左手绷紧皮肤,右手持注射器,使针头斜面向上,与皮肤呈5~15°刺入皮内,待针头斜面进入皮内后,放平注射器,注入药液0.1~0.2 mL,使局部形成一圆形隆起的皮丘,皮肤变白,毛孔变大。 注射完毕,迅速拔出针头,切勿按揉。重复操作,单侧12点;双侧同时共24点,表盘式注射,直径10 cm,通常各点注射不是严格等量的;注射结束后,清理用物,按时观察反应,嘱患者卧床休息1~2 h。
1.3 结果 在多点皮内注射的174例次中,3例次因穿破皮肤导致失败,15例次因操作不熟练导致分布不均匀未成表盘式排列,2例因患者中途拒绝改为静脉回输,其余均顺利完成治疗。
2.1 注射前 皮内注射前访视患者,告知本科室已熟练掌握此项技术,经上千例临床病例实际操作积累了丰富的经验,解释皮内注射的具体操作方法和临床意义及其与静脉注射的区别,如实介绍在既往治疗患者中出现的常见副作用以及应对处理方法,消除患者的怀疑及恐惧心理,并告知患者在皮内注射过程中如实在不能忍受皮内注射的疼痛,可以随时放弃并选择静脉注射途径,取得患者最大程度的配合。对有心脏等合并症等患者,进行心电监护,注意血压、心率、呼吸频率及体温的变化,必要时可给予吸氧及遵嘱给予药物治疗。如本文病例之一的82岁老年患者,注射前为其详细解释皮内注射方式下DC细胞直接进入免疫系统发挥作用,与传统的静脉注射需流经血液系统有所区别,经过细心教导,患者表示理解并愿意接受治疗。注射时,向患者展示麻药,由于患者皮肤薄且明显紧张,采取浅进针方式并同时进行抚慰,患者自述痛感不明显。患者于第五次回输后晚间发热,体温38-38.5℃,采取物理降温后缓解,未使用其他药物,无其他过敏反应,自述食欲好转,甲床(指甲)由凹陷变为饱满。
2.2 注射中 皮内注射过程中戴好口罩、帽子,戴无菌手套严格无菌操作;按照输血常规方法对所注射的DC疫苗与患者身份核对无误后行皮内注射,先与患者做简单语言交流安抚,讲明皮内注射的重要性,减轻患者对皮内注射疼痛的恐惧,待患者心情平静后再进行皮内注射,操作中观察患者有无不适,询问患者的感受,并鼓励患者坚持;注射结束后,棉签按压止血,再次消毒穿刺点,外贴无菌输液贴。如患者不能进行正常皮内注射,可改为静脉注射。
2.3 注射后 注射结束后,留患者观察1 h,患者无不适主诉则治疗结束。再次强调可能会出现的全身发热,局部红肿,过敏性皮疹以及简单的处理方法,嘱下次注射时间,并留相关医生和护士的电话,备用。皮内注射后3天内,每天1次电话随访。
3.1 DC疫苗注射途径对诱导全身性免疫应答意义重大。长期以来静脉途径一直是DC疫苗回输的主要途径,但由于静脉回输的DC可能在肝、脾等处被破坏,极少数能接触二级淋巴组织的初始T细胞,使得免疫治疗效果下降。因此在DC疫苗临床应用中,患者体内仅表达出低水平的肿瘤抗原特异性免疫反应,因而总的临床效果不满意。
3.2 皮内注射法是将小量药液注入表皮与真皮之间的方法。注射量小,一般不超过0.2 mL。主要用于药物过敏试验,预防注射等。采用双侧腹股沟24点皮内注射技术是国内外公认的DC疫苗皮内注射方法,可以使DC疫苗发挥最大的疗效。疼痛问题没有针对性的解决方法。DC疫苗多点皮内注射副作用可出现在操作过程中或者在72 h内,常见发热,体温在38℃左右,一般发生在注射后 5~6 h,无需特殊处理,8~12 h可自行缓解。
双侧腹股沟24点皮内注射技术将107/4 mL的DC疫苗回输患者体内,操作中观察患者有无不适,并鼓励患者坚持;注射结束后,棉签按压止血,再次消毒穿刺点,外贴无菌输液贴。如不能进行正常皮内注射,可改为静脉注射。
〔1〕Kim BR,Yang EK,Kim DY,et al.Generation of anti-tumour immune response using dendritic cells pulsed with carbonic anhydrase IX-Acinetobacter baumannii outer membrane protein A fusion proteins against renal cell carcinoma[J].Clin Exp Immunol,2012,167(1):73-83.