元安颗粒对慢性心力衰竭大鼠心肌组织黏附分子表达的影响*

范建民 张 稳 唐 莹 廖若夷 雍苏南

（湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007）

慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是指任何原因造成的心肌损伤，使心肌结构和功能发生改变，导致心室泵血功能降低而引起的临床综合征，是各种心脏病的终末阶段。一经诊断，少有完全恢复，大多数呈进行性恶化。中医药在防治CHF方面积累了许多宝贵经验，特别是在改善症状，提高生活质量，防止病情反复方面显示着良好的疗效。本实验旨在观察元安颗粒对CHF大鼠心肌组织黏附分子表达的影响，探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物 14周龄WKY（Wistar Kyoto）大鼠 60只，体质量（213±19.4） g，健康雄性，批号，SCXK（沪 2010-0003），由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

1.2 药物 元安颗粒（组成：当归、玄参、丹参、金银花、甘草、毛冬青）由湖南中医药大学第一附属医院药剂科制备，批号：101103；卡托普利片：每片 25 mg，湖南湘雅制药有限公司生产，批号：1009106。

1.3 仪器 SJ-42型多导生理记录仪，EUB-565A型彩色超声波诊断仪，BS-600L型高精度电子天平（上海友声衡器有限公司制造），BTS-20型数字彩色图象显微分析系统 （英国华粤行公司），YH-4型压力换能器（航天医学工程研究所），KDC-2046型低温离心机（中国科学技术大学科技实业总公司，中德光电仪器分公司），AF100 型制冰机（意大利 SCOTSMAN），D-8 型切割式匀浆器 （德国ART公司），LKB-Ⅲ型超薄切片机（广州市华俊医疗器械有限公司）。

1.4 分组及造模 采用结扎大鼠冠状动脉前降支法造成心肌梗死后形成CHF模型。实验前将60只大鼠常规喂养1周，然后随机分为空白组、模型组、卡托普利组、元安颗粒剂低剂量组、元安颗粒剂中剂量组、元安颗粒剂高剂量组，每组10只，分笼喂养。除空白组外，其余5组实验动物麻醉后，气管插管，连接呼吸机，在左侧2~3肋间开胸暴露心脏，挑破心包，于左心耳下2 mm穿线结扎左冠状动脉前降支，轻轻挤压胸腔排出空气，关胸。以结扎后心电图ST段弓背抬高为造模成功依据。并于造模前后分别用SJ-42型多导生理记录仪记录心电图、心音图、心尖搏动图，于手术6周后用EUB-565A型彩色超声波诊断仪进行心功能检测，检测每只大鼠造模前后心率（Heart Rate，HR）、心脏射血前期 （PEP）、 左室射血时间 （left ventricular ejection time，LVET），以射血分数（ejectionfraction，EF）下降到60%以下作为造模成功标志。

1.5 给药方法 元安颗粒高剂量组以人等效量4倍［4×大鼠体表面积/成人平均体表面积（以60 kg换算）×成人每日用量］灌胃；元安颗粒中剂量组以人等效量2倍灌胃；元安颗粒低剂量组以人等效量1倍灌胃；卡托普利片成人每日用量为25 mg，以人等效量4倍灌胃。以上药物用蒸馏水溶解稀释为2 mL/只灌胃，每日1次，连续4周。空白组及模型组均以2 mL蒸馏水灌胃，每日1次，连灌4周。

1.6 标本采集与检测

1.6.1 组织学观察 观察造模成功后心肌梗死程度，取全层心肌经甲醛固定、包埋、切片、HE染色，光学显微镜下观察，由专业病理学医师进行鉴定。

1.6.2 ELISA法检测血清中心肌组织黏附分子表达治疗4周后，从所有存活的WKY大鼠腹主动脉采血1 mL，经3500 r/min低温离心机离心10 min，取上清液采用ELISA法检测血清中心肌组织黏附分子［细胞黏附分子（ICAM-1）、血管黏附分子（VCAM-1），P-选择素（P-selectin）］表达的情况，试剂盒购自奥地利Blender Med System提供。

2 结 果

2.1 组织学变化 见图1。光镜下观察结扎WKY大鼠冠状动脉前降支法造成心肌梗死后，心肌缺血45 min后可见心肌组织水肿，组织疏松，间隙加宽，多数心肌细胞核正常，胞质染色均匀，可见少量细胞核固缩，心肌纤维排列失去正常结构，呈明显的波浪状，符合心梗早期病理变化，认为造模成功，可形成CHF模型。

图1 模型组大鼠心肌病理改变

2.2 元安颗粒对CHF大鼠造模前后心肌组织黏附分子表达的影响 见表1。与模型组比较，元安颗粒低、中、高剂量组及卡托普利组心肌组织黏附分子（ICAM-1，VCAM-1，P-selectin）表达均有不同程度降低，差异有统计学意义（P＜0.05），其中元安颗粒高剂量组疗效显著（P＜0.01）。结果表明，心肌细胞黏附分子（ICAM-1，VCAM-1，P-selectin）在冠状动脉硬化及斑块破裂中的作用已越来越显著。在细胞因子的作用下，内皮细胞、白细胞等ICAM-1、VCAM-1，P-selectin的表达明显增加，可促进单核细胞进入内皮下成为巨噬细胞进而转变为泡沫细胞，与心肌损伤直接相关。

表1 给药前后各组CHF大鼠ICAM-1、VCAM-1、P-selectin比较

表1 给药前后各组CHF大鼠ICAM-1、VCAM-1、P-selectin比较

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

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3 讨 论

中医学对心衰病因的认识，多为感受外邪、劳损久病、情志内伤、先天不足。其病理基础为心气不足，与肺、脾、肾关系密切。心衰病机主要有心脉痹阻、心阳不足、水饮凌心。《素问·逆调论》所描述心功不全的种种表现，与美国纽约心脏学会（NYHA）心功能分级极为相似。中医对胸痹辨证分型的研究较多，所分证型种类不尽相同。1985年全国冠心病辨证论治研究座谈会制定了《冠心病心绞痛中医辨证试行标准》，其辨证分为本虚标实两大类，分两类13证［1］。1992年《中药新药治疗胸痹（冠心病心绞痛）的临床研究指导原则》分为心血瘀阻、痰浊壅塞、阴寒凝滞、心肾阴虚、气阴两虚、阳气虚衰共6证。王永炎［2］对其辨证分两类7型。郭志华［3］认为冠心病心绞痛临床常见证型为心血瘀阻、寒凝心脉、气阴两虚、心阳不振、痰浊阻塞、气滞心胸6种。2002年《中药新药治疗充血性心力衰竭的临床研究指导原则》［4］分为心血瘀阻、气虚血瘀、气滞血瘀、痰阻心脉、阴寒凝滞、气阴两虚、心肾阴虚、阳气虚衰8种。因此本方从热毒血瘀着手，方中当归甘温而润，辛香善行，既可补血，又可活血；玄参甘、苦、咸，清热凉血、泻火解毒；两者共为君药。丹参“专入血分，其功在于活血行血，内之能达脏腑而化瘀滞”；毛冬青活血祛瘀，清热解毒，共为臣药。金银花甘寒清香，“养血止渴通络”，清热解毒为佐。甘草甘平，调和诸药为使。诸药相伍，共奏活血化瘀、清热解毒之功，喜获良效。

［1］ 张伯臾.中医内科学［M］.3版.上海：上海科学技术出版社，1985：755-757.

［2］ 王永炎.中医内科学［M］.5版.上海：上海科学技术出版社，2002：108.

［3］ 郭志华.冠心病心绞痛2432例中医辨证分型综合统计分析［J］.湖南中医杂志，1998，14 （2）：7-8.

［4］ 国家食品药品监督管理局.中药新药治疗充血性心力衰竭的临床研究指导原则［M］.北京：中国医药科技出版社，2002：68-73.