CD54和CD62P在急性脑梗死患者血清中的表达

喻 敏 李华军

(中国人民解放军95924部队卫生所，湖北 武汉 430313)

脑血管病是严重危害老年人的身体健康和生命的主要疾病。随着研究的不断深入，发现急性脑梗死病灶是由缺血中心区、周围的缺血丰富带组成，脑组织缺血后大量白细胞浸润，细胞内钙超载、大量氧自由基生成，神经细胞产生不可逆的损害，引起一系列炎症反应及损伤。其中血液成分的改变，血液中有形成分如(黏附分子)与多种炎性反应参与等在脑血管淤积〔1〕，阻塞血管，而导致脑梗死的发生。本研究拟利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对急性脑梗死患者外周血细胞间黏附分子(CD54)和血小板黏附分子(CD62P)的表达进行研究。

1 材料与方法

1.1 病例选择 急性脑梗死:男60例，女30例，共90例;年龄55～70岁，平均63岁。符合第四届全国脑血管病会议制定标准。(1)根据病史、发病时症状、体征及神经科体格检查、影像学检查(头部CT或头部MRI平扫)病程在7 d内的急性脑梗死病例;(2)神经功能缺失程度计分大于分;(3)无严重肝肾疾病、血液系统疾病、出血性疾病依据前循环脑梗死、后循环脑梗死的发生分为:前循环脑梗死(发病48 h～7 d):男40例、女15例、年龄55～68岁平均61.5岁;后循环脑梗死(发病48 h～7 d):男20例、女15例、年龄55～70岁 平均62.5岁;正常对照组为我院收集体检中心体检均为健康人员，除外神经疾病，共23例，其中男10例、女13例、年龄55～80岁，平均69岁。

1.2 研究方法 标本采集及测定方法:所有检测对象晨起后空腹采集静脉血3～5 ml，30 min内制备灭活，置于－20℃冰箱内储存。采用酶联免疫吸附法测定血清中CD54和CD62P水平;酶标试剂盒为上海富众(亚平宁)生物科技发展有限公司生产。操作的流程均按照说明书进行试验，应用ELISA对抗体夹心法及ELISA间接法〔2〕。

1.3 统计学方法处理 应用SPSS10.0软件包进行统计分析软件分析数据，组间进行t检验，各项指标的相关性采用直线回归分析。

2 结果

脑梗死患者 CD54〔(455.31±56.26)ng/ml〕和 CD62P〔(1 479.43± 106.5)ng/ml〕水平与健康对照组 〔(184±46.1)、(577.03±58.23)ng/ml〕比较明显升高(P＜0.01)。

3 讨论

在急性脑梗死的发病过程中，神经细胞完全缺血缺氧后，十几秒出现电位变化，导致大脑皮层生物电活动完全消失，脑内动脉血流中断持续5 min，神经细胞就可以出现不可逆性损害，细胞内ATP供应不足，释放大量结合钙，出现严重的细胞内钙超载〔3〕。大量氧自由基生成，炎性介质的产生，造成神经变性、坏死等脑组织严重的病理变化〔4〕。CD54属于黏附因子免疫球蛋白超家族，存在内皮细胞表面，在体内分布广泛。发生病变情况下，如内皮细胞、Th细胞、神经胶质细胞。大量研究证实，脑缺血损伤是一个炎症反应过程，外周血黏附性增高可以与缺血损伤细胞凋亡关系密切，脑梗死发生的严重程度有关〔5〕。CD54主要介导细胞黏附及活化，而Th细胞及血管内皮细胞黏附后引起一系列细胞反应及钙超载。本研究表明，急性脑梗死患者血清中CD54水平明显高于对照组，与病变程度有明显关系，脑梗死病情越严重黏附分子水平越高。

CD62P主要分布在内皮细胞及α颗粒，是血小板膜表面的一个富含半胱氨酸。高度糖基化的糖蛋白，经组胺、补体、氨基酸及凝血酶等刺激后迅速与质膜融合，在血小板表面进行表达，开启了血小板的细胞、内皮细胞相互黏附作用。

血中CD62P基础水平来源于血小板，在病理状态下，CD62P水平活化内皮细胞分泌组织发生炎症或系列损伤时，可通过不同机制增强人内皮细胞CD62P。mRNA持续性转录，这些均是CD62P参与炎症反应的重要机制〔6〕。CD62P在急性脑梗死发生发展中，由于血管内皮细胞的损伤，从而导致内皮下胶原暴露，使血小板不断流入暴露的胶原下，使血小板被活化，血小板“膜颗粒”在瞬间出现易位，在血小板表面表达，可对活化的血小板进行识别〔7〕。在本实验研究中，急性脑梗死患者CD62P的表达明显高于正常对照组，更进一步揭示了CD62P表达在促使梗死形成。血小板激活中起关键性作用。本实验研究证明CD62P表达与神经功能缺损程度呈正相关，脑梗死病情好转时CD62P表达量减少或不表达，进展性脑梗死病情进一步加重趋势时CD62P表达明显增加。因此通过对CD62P的检测科判断脑梗死预后程度，同时指导治疗。综合上述两种黏附因子CD54、CD62P的检测，发现CD54、CD62P在急性脑梗死发病的病理生理过程中的重要参与者，它对动脉粥样硬化斑块及血栓形成起重要作用。因此，在脑梗死发病早期，CD54、CD62P是急性脑梗死发病的病理生理过程中的重要参与者，它对动脉粥样硬化斑块及血栓形成起重要作用，所以CD54、CD62P在血清中的含量是诊断和预后程度的重要指标。

1 Saliba E，Henrot A.Inflammatory mediators and neonatal brain damage〔J〕.Biol Neonate，2001;79(3-4):224-7.

2 Mukherjee MD，Wong MD，Griffin MD，et al.Ten-fold augmentation of endothelial up take of vascular endothelial growth factor with ultrasound after systemic administration〔J〕.JAm Coll Cardiol，2000;35:1678-86.

3 吴 江.神经病学〔M〕.北京:人民卫生出版社，2008:341-2.

4 高 帆，聂亚雄.P-选择素与缺血性脑卒中〔J〕.神经疾病与精神卫生，2009;9(2):174-6.

5 Madri JA，Graesser D.Cell migration in the immune system:the evolving inter-related roles of adhesion molecules and proteinases〔J〕.Dev Immunol，2000;7:103-16.

6 Klaus L.The role of selection in inflammatory and disease〔J〕.Trends Mol Med，2003;9(6):263-8.

7 Andre D，Hartwell D.Hrachovinoval I，et al.Pro-coagulant state reaulting from high level of soluble P-selectin in blood〔J〕.Proc Natl Sei，2000;97(25):13838-40.