注射用银杏叶提取物对小鼠神经系统的影响

张红萍 徐丽丹 浙江省东阳市人民医院中药房 东阳 322100

俞忠明 董 宇 浙江省中医药研究院中药研究中心

注射用银杏叶提取物对小鼠神经系统的影响

张红萍 徐丽丹 浙江省东阳市人民医院中药房 东阳 322100

俞忠明 董 宇 浙江省中医药研究院中药研究中心

目的：观察注射用银杏叶提取物静脉注射对动物神经系统的影响。方法：以注射用银杏叶提取物高剂量（18mg/kg）、中剂量（9mg/kg）、低剂量（4.5mg/kg）静脉注射给药，经小鼠自主活动试验、小鼠转棒试验及与戊巴比妥钠阈下剂量催眠协同作用试验，观察银杏叶提取物对小鼠神经系统的影响。结果：银杏叶提取物高、中、低三个剂量组与溶剂对照组比较，小鼠自主活动数、落棒率及翻正反射发生率均无显著影响（P＞0.05）。结论：注射用银杏叶提取物在剂量范围内对神经系统无明显影响。

小鼠 注射用银杏叶提取物 神经系统

银杏作为一味中药，味微苦，性平，归心、肺经，具有活血化瘀、通经止痛、敛肺平喘、化浊降脂等功效。银杏叶提取物（extract of ginkgo biloba，EGb）是从银杏叶中提取的具有独特药理活性的混合物，国内外许多学者采用现代分离技术和测试手段对银杏叶提取物的化学成分进行研究，从银杏叶提取物中发现了黄酮类、萜类内酯、聚异戊烯醇类、有机酸、烷基酚和烷基酚酸、甾体化合物、氨基酸和微量元素在内的100多种化学成分，其中黄酮具有保护毛细血管通透性、扩张冠状动脉、恢复动脉血管循环、解除心脏平滑肌痉挛等功效。近年对银杏叶提取物药理和神经系统作用进行大量的研究，取得一定进展[1-3]，为银杏叶提取物的临床应用提供了依据。本研究观察银杏叶提取物静脉注射对小鼠神经系统的影响。

1 实验材料

1.1 动 物 ICR小鼠，体质量（20±2）g，雌雄各半，120只，由浙江省中医药研究院动物中心提供。实验动物合格证号：SYXK（浙）2009-0122。

1.2 仪器与试剂 YSD-4Q药理生理多用仪（安徽蚌埠无线二厂）；YLS-4C转棒式疲劳仪（山东省医学科学院设备站）；注射用银杏叶提取物（杭州合核生物化工技术升发有限公司提供）；0.9%氯化钠注射液。

2 实验方法

2.1 对小鼠自主活动的影响[4-6]取小鼠40只，随机分成4组，即注射用银杏叶提取物高剂量组（18mg/ kg）、中剂量组（9mg/kg）、低剂量组（4.5mg/kg）及空白溶剂对照组（0.9%氯化钠注射液），每组10只，雌雄各半。将小鼠置药理生理多用仪中适应10min后测3min内自主活动数，然后取每组相同编号的小鼠间隔一定时间，按组别分别尾静脉注射给药，各鼠分别在给药后15、30、60、120min置药理生理多用仪光电盒中测其活动次数，以给药前后各组活动次数的差值进行统计分析。

2.2 对小鼠肌肉协调能力的影响 小鼠转棒试验（Rotarod Test）[7-9]主要是用于检测小鼠的运动协调能力、药物对小鼠肌肉松弛作用的强度及检测神经毒性物质对小鼠神经系统的影响等。本实验采用转棒试验观察注射用银杏叶提取物对小鼠肌肉协调能力的影响。实验前将小鼠放置转棒上，转速为16次/ min，选取在棒上停留3min以上小鼠40只进行实验，分组方法同2.1。每次取各组相同编号的小鼠，共40只尾静脉注射给药，注射容积0.2mL/10g，小鼠于给药后15、30、60、120min分别放置转棒仪1～4室中的转棒上，记录3min内落棒动物数，计算落棒率。

2.3 对小鼠戊巴比妥钠的阈下催眠剂量影响[10-11]取小鼠40只，分组方法同2.1。按组别进行小鼠尾静脉注射给药，注射容积0.2mL/10g，给药后15min，按27mg/kg的剂量腹腔注射戊巴比妥钠，观察30min内翻正反射消失达1min以上的动物数，计算各组小鼠翻正反射发生率。

2.4 统计学方法 应用SPSS16.0软件，进行方差分析，对于落棒率及入睡率采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

3 实验结果

3.1 四组小鼠自主活动次数比较 各组小鼠活动次数差值、均值经单因素方差分析，差异无统计学意义（P=0.87），见表1。

表1 四组小鼠自主活动次数比较（±s） 次/3min

组别溶剂对照组银杏叶提取物高剂量组银杏叶提取物中剂量组银杏叶提取物低剂量组n/只10 10 10 10剂量/（mg/kg）0 18 9 4.5药前活动次数62.20±24.60 63.70±18.40 59.40±18.72 60.90±18.62 15min 22.80±13.57 20.30±8.00 15.70±4.11 21.10±8.60 30min 26.20±12.05 27.60±17.39 27.60±11.64 29.30±11.20 60min 31.10±13.40 30.60±20.22 26.80±11.35 30.20±10.64 120min 34.00±13.37 35.70±16.43 31.10±11.87 36.40±10.06药后活动次数差值/次

3.2 四组小鼠肌肉协调能力比较 各组小鼠落棒率经卡方检验差异无统计学意义（P=0.06），见表2。

3.3 四组小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量比较 各组小鼠入睡数经卡方检验差异无统计学意义（P=0.73），见表3。

4 讨论

银杏属于裸子植物门银杏科银杏属，只有一个种，至今具有接近2亿年的历史。因此，被称为“活化石”，银杏叶中含有天然活性黄酮及苦内酯等与人体健康有益的多种有效成份，具有溶解胆固醇，扩张血管的作用，对改善脑功能障碍、动脉硬化、高血压、眩晕、耳鸣、头痛、老年痴呆、记忆力减退等方面具有明显效果。其防病、治病、健身的价值和使用在明代李时珍的《本草纲目》中早有记载。银杏叶提取物（EGb）是从银杏叶中提取精制而成的纯天然药物，主要含有黄酮类、萜类和有机酸类等有效成分，具有清除自由基、抑制血小板活化因子、抑制一氧化氮合酶、抑制谷氨酸毒性、保护线粒体等多种生理作用[12-15]，目前已经广泛用于心脑血管疾病的临床治疗。本实验通过注射用银杏叶提取物高、中、低剂量对小鼠自主活动、肌肉协调能力及戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响的研究提示，注射用银杏叶提取物高、中、低剂量对小鼠神经系统的影响与空白对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。表明注射用银杏叶提取物对小鼠神经系统，在剂量范围内使用安全，为注射用银杏叶提取物临床安全使用提供实验依据，同时为银杏叶提取物的深度开发和利用提供可能。

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Influence of the Injection of Ginkgo Biloba Extract on the Nervous System of Mice

ZHANG Hongping，XU Lidan，YU Zhongming，et al.The People's Hospital of Dongyang，Dongyang（322100），China

Objective：To observe the effect of the injection of ginkgo biloba extract on the nervous system of mice. Methods：Forty mice were randomly divided into 4 groups and were intravenously given injection of ginkgo biloba extract at the dose of 18，9，and 4.5 mg/kg and 0.9%sodium chloride injection（served as solvent control），respectively.The spontaneous activity test，turn rod test and hypnotic synergy test under sodium pentobarbital threshold dose were carried out to observe the effect of ginkgo biloba extract on the nervous system.Results：No significant difference was noted in the number of spontaneous activity，rod drop rate，and the righting reflex of mice between the ginkgo biloba extract groups and the solvent control group（P＞0.05）.Conclusion：The injection of ginkgo biloba ex tract in the dose range had no obvious influence on the nervous system of mice.

mice injection of ginkgo biloba extract nervous system

2013-05-23

浙江省科技厅计划项目（No.2012C33125）

董宇，Tel：0571-88849088；E-mail：107393636@qq.com